通痹顆粒通過(guò)TRAF3/PTPN22信號(hào)通路調(diào)控類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠T細(xì)胞自噬實(shí)驗(yàn)研究

葛子靖，王莘智，徐豫湘，范伏元，田 英，劉 丹

(湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南 長(zhǎng)沙 410007)

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一類自身免疫性疾病，具有極高的致殘率[1]。主流觀點(diǎn)認(rèn)為，免疫細(xì)胞、因子都對(duì)RA的發(fā)展有決定性的影響[2]。T細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)無(wú)疑是RA基礎(chǔ)研究及防治的關(guān)鍵核心[3]。T細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)對(duì)適應(yīng)性免疫系統(tǒng)發(fā)揮正常功能至關(guān)重要。自噬可調(diào)節(jié)T 細(xì)胞的存活及分化，并在T 細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用。PTPN22是維持T細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵基因，且可調(diào)節(jié)自噬依賴性的免疫因子的釋放[3]。研究發(fā)現(xiàn)，TRAF3可通過(guò)PTPN22調(diào)節(jié)T細(xì)胞受體(TCR)信號(hào)通路[4]。根據(jù)上述研究成果進(jìn)行合理地推測(cè)，RA的發(fā)病機(jī)制可能是TRAF3/PTPN22信號(hào)通路表達(dá)異常，影響B(tài)eclin1介導(dǎo)的T細(xì)胞自噬，從而導(dǎo)致T細(xì)胞穩(wěn)態(tài)失衡，進(jìn)而誘發(fā)RA的發(fā)生。通痹顆粒對(duì)“氣血虧虛、寒濕痹阻”型RA患者療效顯著；實(shí)驗(yàn)研究表明其能改善患者中醫(yī)證候，并能減少血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)水平[5-7]。本研究試從T細(xì)胞自噬角度闡明通痹顆粒治療RA的作用機(jī)制，為中藥防治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的研究提供新的思路與靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：Wistar大鼠：雄性，平均體重(1000±20) g，鼠齡 8～10周，清潔級(jí)。從上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司購(gòu)買(mǎi)。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物：受試中藥為通痹顆粒，由當(dāng)歸、全蝎、沒(méi)藥、白芍、乳香、川芎、桂枝、黃芪、僵蠶、黃柏等組成，來(lái)源于湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，屬院內(nèi)制劑。制備方法：取通痹顆粒6 g，用10 ml無(wú)菌0.9%氯化鈉溶液溶解，搖勻，制成0.6 g/ml藥液，放至4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

西藥陽(yáng)性藥：雷公藤多苷片(濃度1 mg/ml)，灌胃，劑量8.75 ml/kg，1次/d，連續(xù)16 d?！?br>