參芪扶正注射液抑制ERK1/2、GATA4信號通路改善小鼠心力衰竭實驗研究

陳仁山，肖惠珍，劉 寧，王 帥，丘文軍，楊天化，高忠良，陳清輝

(廣州市中西醫結合醫院，廣東 廣州 510800)

心力衰竭是各種心臟疾病進展的終末階段，病情重，預后差[1]。信號通路在心肌肥厚、心力衰竭的發生和進展中起重要作用，有絲分裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases，MAPK)信號通路是其中重要的一條[2]。研究顯示，手術誘導心臟后負荷增加，可以激活MAPK/ERK1/2/GATA4信號通路，誘發心肌肥厚和心力衰竭發生。中醫認為心衰的基本病機是本虛標實，虛實夾雜，本虛以氣虛為主[3]，益氣扶正是心衰的重要治法。參芪扶正注射液具有益氣扶正作用，對心力衰竭有良好的治療效果[4-5]，但其作用機制尚未明確。本文采用參芪扶正注射液治療心力衰竭小鼠，觀察其作用并探討其具體信號轉導機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與分組 從廣東省醫學實驗動物中心購買8～10周齡SPF級C57BL/6J小鼠50只，體重18～22 g，合格證號：SYXK(粵)2018-0085。適應性飼養7 d，隨機分為正常組、模型組、陽性組、SQ低劑量組、SQ高劑量組，每組各10只。

1.2 實驗設備與試劑 LED數顯圓周搖床、混懸儀(購自賽洛捷克公司，型號分別為：SLK-O3000-S、SCI-VS)，迷你垂直電泳槽、迷你轉印槽、基礎電泳儀電源(購自韋克斯WIX公司，型號分別為：miniPRO4、miniBLOT、EP300)，凝膠成像儀(購自BIO-RAD公司)，VEVO 2100超聲心動儀(購自加拿大Visual Sonics公司)。ERK1/2抗體、GATA4抗體、Phospho-ERK1/2抗體、HPR二抗(購自Affinity公司，批號分別為：AF0115、AF5245、AF1015、AF7011)，BCA蛋白濃度測試盒(購自貝博公司，批號：BB20101)，血清BNP-Elisa試劑盒(購自北京普天同創生物科技有限公司，批號：MM-0060M1)。

1.3 實驗藥物 99.0%鹽酸異丙腎上腺素(Isoprenaline hydrochloride,ISO)(批號：C10935510)，琥珀酸美托洛爾緩釋片(批號：2005117)，參芪扶正注射液(批號：190907)。

1.4 動物造模和給藥方法 通過皮下植入滲透壓泵的方式建立小鼠心衰模型。……