CYP2D6*10基因多態性對利培酮治療的精神分裂癥患者藥物濃度的影響

陸晉軍，劉文清，吳仁容，陸健，嚴葉良，徐云慶

精神分裂癥病因可能與生長環境、遺傳等因素有關[1]；第二代抗精神病藥利培酮已廣泛用于精神分裂癥治療[2]。

有研究[3]表明，利培酮及代謝物9-羥利培酮(9-OH利培酮)在健康志愿者中的藥代動力學存在較大個體差異，臨床上相同治療劑量下部分精神分裂癥患者易出現不同的不良反應(如催乳素升高、體質量增加等)，可能與利培酮及9-OH利培酮血藥濃度有關。細胞色素P450家族中的 2D6(CYP2D6)屬細胞色素類藥物代謝酶之一，是利培酮的主要代謝酶[4-5]。利培酮于體內經CYP2D6分解為活性代謝產物9-OH利培酮，二者雖均具藥物活性，但前者在體內誘發的藥物不良反應較為明顯。臨床研究[6]證實，維持劑量的利培酮治療2周后，血藥濃度處于穩態，此時9-OH利培酮/利培酮比值呈相對恒定狀態，可較好反映體內利培酮代謝速率。為此，經本院醫學倫理委員會(批號：2018-7號)批準，本研究探討CYP2D6*10基因多態性對利培酮治療血藥濃度的影響。

1 對象和方法

1.1 對象 為2018年5月至2019年5月我院收治的精神分裂癥患者。入組標準：①符合《中國精神障礙分類與診斷標準》第3版[7]精神分裂癥診斷標準；②入組前4 周內未接受系統抗精神病藥治療；③接受利培酮單藥治療，無藥物過敏史；④小學以上文化程度；⑤對本研究知情且簽署同意書。排除標準：①嚴重心、肝、腎及內分泌等重要臟器系統疾病；②惡性腫瘤；③酒精或精神活性物質成癮、濫用者；④患其他類型精神疾病；⑤孕婦及哺乳期婦女。共入組77例，男38例，女39例；年齡18～60歲，平均(40.9±9.7)歲；病程4～10年，平均(7.54±2.65)年；高血壓12例，糖尿病4例，既往有吸煙史2例，既往有飲酒史2例。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 所有患者均接受利培酮單藥治療，起始劑量1 mg/d，根據病情逐漸增加劑量，2 周內劑量增至2～6 mg/d，分別于早上8∶00和晚上20∶00時服藥；直至劑量3 mg/d后維持，8周為一療程。

1.2.2 血藥濃度檢測方法 患者服用維持劑量的利培酮(3 mg/d)2周后，于晨服藥前抽取外周靜脈血5 ml于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-2K)抗凝管中，室溫靜置12 min后以3 000 r/min離心5 min，分離血漿并于-20℃冰箱中保存；采用高效液相色譜串聯質譜分析法,將血清100 μl、乙腈0.5 ml、內標溶液20 μl置入離心管內，經渦旋震蕩15 s后以14 650 r/min的速度離心5 min。吸取上清液置于進樣瓶內，采用血藥濃度數據軟件行進樣分析，線性范圍1～120 ng/ml；按照患者血藥濃度的9-OH利培酮/利培酮比值進行分組，>10歸為A組，5～10歸為B組，<5歸為C組。

1.2.3 CYP2D6*10基因多態性檢測方法 同時留取的EDTA-2K抗凝血，48 h內按照血液基因組DNA提取試劑盒說明書進行白細胞DNA提取，后行PCR擴增體系及循環體系設計。PCR反應條件：50 ℃預變性10 min，繼以95 ℃變性1 min，95 ℃退火15 s，65 ℃延伸1 min，持續循環40個，每個循環結束時進行熒光信號采集。FAM檢測通道選擇CYP2D6*10 C，標為紅色，VIC檢測通道選擇CYP2D6*10 T，標為黑色。從3組中各抽取4例進行CYP2D6*10等位基因測序，基因多態性類型包括野生型(C/C)、雜合突變型(C/T)、純合突變型(T/T)。

1.2.4 療效及不良反應癥狀評估 分別于3組患者治療前、治療8周以簡明精神病量表(BPRS)[8]及治療中出現的癥狀量表(TESS)[9]評估。其中治愈：BPRS較治療前減分≥80%，顯效：BPRS較治療前減分60%～79%，有效：BPRS較治療前減分30%～60%，無效：BPRS較治療前減分<30%，總有效=(治愈+顯效+有效)/總例數×100%；TESS評分總分0～100分，得分越高不良反應越嚴重。

2 結果

2.1 各組一般資料比較 根據血藥濃度9-OH利培酮/利培酮比值，A組、B組及C組分別有30例、20例及27例；各組年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病史比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組一般資料比較

2.2 各組CYP2D6*10基因多態性分布比較 各組CYP2D6*10基因型、等位基因頻率均符合Hard-Weinberg平衡定律，樣本具有群體代表性。A組C/C、C/T基因型及C等位基因頻率顯著高于C組(P均<0.05)，T/T基因型頻率顯著低于B、C組(P均<0.05)；B組C/T基因型及C等位基因頻率顯著高于C組(P均<0.05)，T/T基因型頻率顯著低于C組(P<0.05)。見表2。

表2 各組CYP2D6*10基因多態性分布比較(例數，%)

2.3 CYP2D6*10基因多態性與利培酮血藥濃度的關系 T/T基因型患者血利培酮濃度顯著高于C/T、C/C基因型患者，而血9-OH利培酮濃度、9-OH利培酮/利培酮比值顯著低于C/T、C/C基因型患者(P均<0.05)；C/T及C/C基因型患者血利培酮濃度、9-OH利培酮濃度及9-OH利培酮/利培酮比值比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 CYP2D6*10基因多態性與利培酮血藥濃度的關系

2.4 各組治療后臨床療效及TESS評分對比 C組總有效率顯著低于A、B組，而TESS評分顯著高于A、B組(P均<0.05)；A、B組總有效率及TESS評分對比差異無統計學意義(P>0.05)。見表4。

表4 各組治療后臨床療效及TESS評分對比較

3 討論

利培酮為第二代抗精神病藥，已被證實可通過結合并抑制高親密性5-羥色胺及多巴胺受體發揮藥理效應，在精神分裂癥的治療中發揮著重要作用[10]。研究[11]認為，約85%的利培酮在體內代謝為9-OH利培酮，9-OH利培酮的藥理作用與利培酮相似。故利培酮及9-OH利培酮血藥濃度總和即為對利培酮的治療反應。細胞色素P450家族中關鍵成員CYP2D6是利培酮代謝反應中最為主要的限速酶，可劃分為弱代謝、中度代謝、強代謝、超強代謝4種表型，影響個體利培酮轉化為9-OH利培酮的速率，體現為個體利培酮及9-OH利培酮藥動學參數差異[12]；由于單純利培酮及9-OH利培酮血藥濃度均伴不同程度的波動，故利培酮、9-OH利培酮單一或聯合的血藥濃度均不適合作為判斷利培酮代謝的指標[13]。當服用利培酮達穩態后個體9-OH利培酮/利培酮比值呈相對恒定狀態，以此比值作為判斷利培酮體內代謝速率的有效指標；通常9-OH利培酮/利培酮比值越大，利培酮的代謝速率越快[14-15]。

本研究患者連續服用利培酮達穩態后以高效液相色譜串聯質譜分析法行利培酮及9-OH利培酮血藥濃度檢測，按照9-OH利培酮/利培酮比值將患者分組；采用實時熒光PCR技術檢測入組者CYP2D6*10基因多態性；結果顯示，各組患者的年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病史比較差異無統計學意義，可排除上述因素對藥物代謝可能造成的影響。各組CYP2D6*10基因多態性分布顯示，A組C/C、C/T基因型及C等位基因頻率顯著高于C組(P均<0.05)，T/T基因型頻率顯著低于B、C組(P均<0.05)；B組C/T基因型及C等位基因頻率顯著高于C組(P均<0.05)，T/T基因型頻率顯著低于C組(P<0.05)；表明CYP2D6*10基因多態性影響9-OH利培酮/利培酮比值。與Molden等[16]及楊燕等[17]對亞洲精神分裂癥患者的研究結果一致。

本研究中，CYP2D6*10 T/T基因型患者利培酮血藥濃度明顯高于C/T、C/C基因型患者，9-OH利培酮血藥濃度及9-OH利培酮/利培酮比值顯著低于C/T、C/C基因型患者，表明CYP2D6*10 T/T基因型對利培酮代謝存在明顯影響；而CYP2D6*10 C/T及C/C基因型患者的利培酮、9-OH利培酮血藥濃度及9-OH利培酮/利培酮比值比較差異無統計學意義，提示CYP2D6*10括野生型、雜合突變型個體對利培酮代謝的影響相對較小；張婷等[18]研究證實CYP2D6*10 T/T基因型個體顯著影響利培酮的代謝；提示CYP2D6*10 T/T基因型個體CYP2D6酶活較低，而CYP2D6*10 C/T及C/C基因型個體CYP2D6酶活更高。

最后在各組治療8周后的療效及不良反應癥狀觀察中，C組總有效率顯著低于A、B組，而TESS評分顯著高于A、B組(P均<0.05)，但A、B組總有效率及TESS評分對比差異無統計學意義，表明CYP2D6*10 T/T基因型與利培酮治療精神分裂癥的臨床療效、不良反應相關。分析原因可能是CYP2D6*10 T/T基因型為利培酮代謝產生影響，導致藥物代謝喪失、性質改變或藥物代謝率下降，從而影響療效及不良反應癥狀。既往研究中王皓等[19]指出CYP2D6基因多態性可為利培酮治療精神分裂癥的臨床療效產生影響，與本次研究結果存在一定相似之處。

綜上，CYP2D6*10基因多態性與利培酮代謝、臨床療效、不良反應密切相關；T/T基因型個體CYP2D6酶活較低，影響利培酮代謝及血藥濃度；臨床利培酮的治療中，對出現的治療反應的不同應考慮到個體利培酮代謝的差異。本研究樣本量偏少，且未探討9-OH利培酮/利培酮比值對CYP2D6代謝類型的預測效能，故今后有待深入探討。