辛伐他汀對(duì)肋骨骨折大鼠外周血T細(xì)胞亞型及炎癥因子表達(dá)的影響Δ

李 建，溫伯泉，郭士兵，王 巖

(1.開(kāi)灤總醫(yī)院林西醫(yī)院麻醉科，河北 唐山 063100；2.唐山市中心醫(yī)院麻醉科，河北 唐山 063000)

骨折創(chuàng)傷部位局部免疫細(xì)胞會(huì)增加并分泌白細(xì)胞介素(IL)17等細(xì)胞因子，參與骨組織形成，增加成骨細(xì)胞的活性，促進(jìn)骨折部位愈合[1]。辛伐他汀的主要功能是抑制內(nèi)源性膽固醇的合成，從而起到降低血脂的作用，在臨床上主要被用于治療高膽固醇血癥和冠心病等，其也可以顯著促進(jìn)骨質(zhì)疏松引起的骨折愈合[2]。本研究將通過(guò)不同劑量辛伐他汀干預(yù)大鼠肋骨骨折模型，探討不同劑量辛伐他汀對(duì)大鼠骨折后不同時(shí)間免疫細(xì)胞及炎癥因子釋放的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器：FACS Calibur型流式細(xì)胞儀(美國(guó)BD公司)；4 ℃冰箱(合肥美菱股份有限公司)；SC-3610型低速離心機(jī)(安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司)；pectraMax190型酶標(biāo)儀(美國(guó)MD公司)；一次性使用微量采血管(20 μl，泰州市宇杰醫(yī)療器械有限公司)。

1.1.2 藥品與試劑：乙醚購(gòu)自天津市申泰化學(xué)試劑有限公司；辛伐他汀(S6196，5 mg)購(gòu)于美國(guó)Sigma公司；Rat 腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)試劑盒(RAB0479)和Rat IL-17 ELISA試劑盒(RAB1906)購(gòu)于美國(guó)Sigma公司；PE Anti-CD8(ab95526，50 μl)和APC Anti-CD4(ab256309，100 μl)購(gòu)于美國(guó)Abcam公司。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：8～10周齡雄性SPF級(jí)SD大鼠，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 方法

1.2.1 大鼠肋骨骨折模型的建立：60只8～10周齡雄性SD大鼠于SPF級(jí)鼠房飼養(yǎng)，室溫調(diào)節(jié)在(25±2)℃，相對(duì)濕度為40%～65%，12 h/12 h晝夜交替照明，自由攝取食物和飲用水。適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，將大鼠隨機(jī)分為三組，即對(duì)照組和辛伐他汀低、高劑量組(5、10 mg/kg)，每組20只[3]。以10%水合氯醛腹腔注射大鼠麻醉，大鼠取俯臥位，常規(guī)剪毛后碘伏消毒，鋪無(wú)菌巾，沿肋骨走形作斜行切口(長(zhǎng)約1 cm)切開(kāi)背部皮膚，肌肉，暴露第6肋骨，銳性剝離肋間肌肉，距脊柱約1.5 cm處用眼科剪剪斷，復(fù)位，分層縫合。……