基于MAPK信號通路Nell-1蛋白對人牙髓干細胞神經向誘導分化的作用

閆雪萍 吳杉杉 王利婷 史璐

牙髓神經是存在于牙髓組織內的神經感受器，主要發揮感覺功能，并參與調控牙髓微環境和牙本質再生，通過提高牙髓神經的再生功能，對于損傷牙齒正常功能的修復、減少牙髓治療相關并發癥有重要意義[1-2]。神經細胞本身缺乏再生能力，損傷后難以自我修復，因此如何促進神經細胞修復成為研究熱點。人牙髓干細胞(human dental pulp stem cells，hDPSCs)是由神經嵴發育而來、位于牙髓組織中的成體干細胞，具有與骨髓間充質干細胞相似免疫表型，可自我更新和多向分化，有較強的克隆能力，且有易獲得、培養條件簡單的優點，為牙髓神經細胞的再生修復提供了新的研究途徑[3]。尼爾樣-1型分子(nel-like molecule-1，Nell-1)是一種具有高度保守性的分泌型蛋白，對于成骨細胞分化、新生骨形成等方面有正向調節作用[4]。研究[5]證實，Nell-1能與其位于成骨譜系細胞表面的受體Integrinβ1結合，啟動絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)信號級聯，影響細胞的粘附、增殖與分化。目前關于Nell-1促進成骨向分化的相關研究較多，在神經向分化方面的相關研究較少。本研究通過體外分離hDPSCs，研究Nell-1蛋白基于MAPK信號通路對hDPSCs神經向誘導分化的調控作用及機制，為牙髓疾病的治療提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細胞取材 取材于口腔頜面外科門診18～25 歲志愿者，因正畸或阻生齒新鮮拔除健康完整恒牙，從中分離hDPSCs。研究實施前向志愿者講述牙齒用途，均知情同意,并獲得醫院倫理委員會批準。

1.1.2 藥物、主要試劑和儀器 人重組Nell-1蛋白[(R&D systems，lic.Minneapolis，MN55413，USA)；……