CXC類趨化因子配體2通過募集腫瘤相關中性粒細胞促進腫瘤微環境中口腔鱗癌細胞侵襲能力的研究

賈馨雨 郭治辰 孫楊 龔忠誠

已有研究發現炎癥中細菌微生物和腫瘤的發展密切相關，影響了腫瘤的生長、侵襲和轉移[1]。牙齦卟啉單胞菌(P.gingivalis)是牙周炎主要的病原體。它能侵入上皮細胞，干擾宿主免疫反應和細胞周期[2]， 被認為是一種特定且獨立的促瘤微生物因子。P.gingivalis經常在OSCC患者的口腔中被檢測出來[3-4]，有報道稱P.gingivalis菌群的失調與OSCC之間存在顯著關系。它可以進入OSCC細胞胞質，與OSCC細胞相互作用，形成OSCC腫瘤微環境(tumor-microenvironment，TME)，加重慢性炎癥，從而加速腫瘤細胞的增長[5-7]。CXC類趨化因子配體2(CXC-lingand,CXCL2)，是TME中釋放的趨化因子之一?？赏ㄟ^與其特異性受體CXCR2結合激活下游的信號通路引發相關反饋，從而產生生物學效應及功能，促進中性粒細胞趨化、腫瘤細胞生長、維持牙周組織穩態。中性粒細胞(polymorphonuclear leukocytes，PMN)是應答最快的炎性細胞。通過炎癥反應，大量PMN被細胞因子聚集至TME中轉化為腫瘤相關中性粒細胞(tumor-associated neutrophils，TANs)[8]。當P.gingivalis感染OSCC后形成口腔TME，能夠招募大量炎性細胞和炎性介質，而這浸潤的細胞又可以進一步的釋放多種趨化因子來影響腫瘤的增殖、生長、侵襲、血管生成及轉移[9]。其中TANs的趨化一般是認為通過受體CXCRl/CXCR2來實現的[10]。TANs是CXCL2的選擇性靶標，它們通過黏附分子CD11b及CD66b的表面來促進它們的活化。本研究探討CXCL2通過募集TANs促進TME中TSCCA的侵襲力。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器

試劑：P.gingivalis(中國北納生物有限公司)；P.gingivalis及細胞熒光染料(上海碧云天生物科技有限公司)；TSCCA舌鱗狀細胞(上海賓穗生物科技有限公司)；胎牛血清(Gibco公司，美國)；TRIZOL REAGENT RNA抽提試劑(Invitrogen公司，美國)；……