桑葉黃酮對(duì)巴馬香豬肝臟和腎臟化學(xué)組成的影響

馮淦熠 劉瑩瑩 黃瑞林 周 玲

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128；2.中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，長(zhǎng)沙 410125；3.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，長(zhǎng)沙 410131)

桑葉是?？浦参锷?MorusalbaL.)的葉，具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與藥理活性作用，在1993年即被我國(guó)國(guó)家衛(wèi)生部認(rèn)定為藥食兩用品[1]。桑葉中含有多種天然活性成分，如黃酮、多酚、多糖及生物堿類物質(zhì)[2]，具有降血糖[3]、降血脂[4]、保護(hù)心臟[5]、增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力[6]、抗腫瘤[7]和抑菌[8]等功效。桑葉黃酮(flavonoids from mulberry leaf，F(xiàn)ML)作為桑葉中最重要的活性成分之一，占桑葉干物質(zhì)的1%～3%[9]，其主要成分包括蕓香苷、槲皮素、異槲皮素和二氫山奈素4類[10]。

近年來，隨著畜牧行業(yè)對(duì)新型植物性蛋白質(zhì)飼料的需要，桑葉潛在的飼用價(jià)值被進(jìn)一步發(fā)掘。有關(guān)桑葉中天然活性成分的研究日益增多，特別是對(duì)FML降糖、降脂等生理作用及機(jī)制的研究正逐漸被更多從業(yè)者重視[11]。陳冰等[12]研究發(fā)現(xiàn)，添加適量的FML能改善吉富羅非魚肌肉中氨基酸組成，提高其抗氧化能力。江正菊等[13]研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)ML可遏制患高血脂癥大鼠的血糖持續(xù)升高的趨勢(shì)，對(duì)穩(wěn)定血脂濃度也有一定的作用。此外，F(xiàn)ML還可使患有高血脂癥的大鼠動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)顯著降低，進(jìn)而起到預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的作用[14]。李向榮等[15]則研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)ML能夠加速膽固醇的轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝，從一定程度上揭示了桑葉總黃酮提取物的降脂作用。

肝臟是動(dòng)物最重要的器官之一，承擔(dān)著維生素合成與儲(chǔ)存、膽汁分泌與排泄、有毒物質(zhì)代謝、分泌性蛋白質(zhì)合成及造血等生理功能，最能反映機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)、生理和病理狀態(tài)[16-17]。同時(shí)，肝臟參與了機(jī)體的糖脂代謝，作為胰島素的靶器官，既能通過糖異生作用合成葡萄糖，又能主動(dòng)攝入葡萄糖并將其轉(zhuǎn)化為糖原儲(chǔ)存起來，對(duì)維持血糖平衡具有積極意義[18]。肝臟是將動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的甘油三酯、磷脂以及膽固醇等脂質(zhì)分解為游離脂肪酸的主要場(chǎng)所，因此其代謝能力的正常與否關(guān)乎到血脂平衡與體脂的沉積。當(dāng)飼糧中脂質(zhì)含量過高時(shí)，機(jī)體脂類合成代謝作用增強(qiáng)，進(jìn)而導(dǎo)致甘油三酯與膽固醇在肝臟中的過量沉積，易誘發(fā)非酒精性脂肪肝與高脂血癥[19]。腎臟則是動(dòng)物最重要的排泄與內(nèi)分泌器官，它通過排尿的形式來調(diào)節(jié)并維持機(jī)體內(nèi)水、電解質(zhì)和酸堿平衡，通過分泌激素參與全身電解質(zhì)、水和血壓的調(diào)節(jié)[20]。研究表明，游離脂肪酸的升高是糖尿病患者腎功能損害的危險(xiǎn)因素之一，因此糖尿病患者要改善預(yù)后必須合理控制血脂[21]。朱盼[22]研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)源性n-3多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid，PUFA)能通過上調(diào)超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1，SOD1)的表達(dá)，緩解動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的氧化應(yīng)激，對(duì)抑制鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的腎臟纖維化、預(yù)防并改善糖尿病腎病具有非常重要的作用。目前，關(guān)于FML對(duì)動(dòng)物機(jī)體肝臟與腎臟中的脂肪酸和氨基酸沉積的影響研究甚少，因此有必要借助合適的動(dòng)物模型對(duì)其進(jìn)行深入探索。

巴馬香豬屬華南型豬，原產(chǎn)于廣西巴馬瑤族自治縣境內(nèi)的巴馬鎮(zhèn)，產(chǎn)區(qū)群眾稱之為“冬瓜豬”“芭蕉豬”或“兩頭烏”[23]。巴馬香豬是我國(guó)的本土小型豬種之一，屬典型的脂肪型動(dòng)物。本研究以育肥期的巴馬香豬雜交后代為動(dòng)物模型，分析FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中氨基酸代謝與脂質(zhì)代謝的影響，有望為抑制脂肪沉積、生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)豬肉產(chǎn)品提供技術(shù)手段，對(duì)畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展具有重要理論和實(shí)踐意義。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

FML由西安某生物科技有限公司生產(chǎn)，采用高效液相色譜(high performance liquid chromatography，HPLC)法提取，純度大于80%(主要成分為黃酮和黃酮醇類)，為鵝黃色粉末。

1.2 動(dòng)物分組和處理

選用體況健康、體重[(45.11±4.23) kg]相近的育肥期巴馬香豬雜交后代60頭，按體重隨機(jī)原則分為5組，每組3個(gè)重復(fù)(欄)，每個(gè)重復(fù)4頭豬。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.02%、0.04%、0.08%和0.16%的FML。

1.3 基礎(chǔ)飼糧

試驗(yàn)所用基礎(chǔ)飼糧為玉米-豆粕型，參照我國(guó)《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 65—2004)并結(jié)合試驗(yàn)豬場(chǎng)實(shí)際情況進(jìn)行配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

續(xù)表1項(xiàng)目 Items含量 Content蘇氨酸 Thr0.51鈣 Ca0.61總磷 TP0.54有效磷 AP0.24

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)前先對(duì)試驗(yàn)豬舍進(jìn)行消毒，整個(gè)試驗(yàn)期為67 d，包括7 d預(yù)試期和60 d正試期。每日分2次飼喂，分別在08：00和16：00；豬只自由采食和飲水，每天07：00和15：00清糞2次，每天沖洗豬圈。其他飼養(yǎng)管理及防疫程序嚴(yán)格按照豬場(chǎng)常規(guī)方法進(jìn)行。

1.5 樣品采集

在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天每組隨機(jī)選擇6頭豬(共30頭)，禁食12 h，次日早上空腹稱重后屠宰；取肝臟、腎臟各2份，每份100 g，放入封口袋，-20 ℃保存。

1.6 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.6.1 組織器官發(fā)育指標(biāo)

稱取各組試驗(yàn)豬的頭、心臟、肝臟、脾臟、腎臟及板油重量并記錄。

1.6.2 常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)

取各組試驗(yàn)豬的腎臟或肝臟組織樣品，對(duì)其干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量進(jìn)行測(cè)定；采用冷凍干燥法(GB/T 6435—1986)測(cè)定水分含量，采用凱式定氮法(GB/T 6432—1994)測(cè)定粗蛋白質(zhì)含量，采用乙醚抽提法(GB/T 6433—1994)測(cè)定粗脂肪含量。

1.6.3 氨基酸指標(biāo)

稱取約0.2 g腎臟或肝臟凍干樣品，放置于水解管中，加入6 mol/L的鹽酸溶液10 mL，封口后放入110 ℃恒溫箱內(nèi)水解22 h，冷卻后將水解管中的溶液轉(zhuǎn)移、定容至100 mL容量瓶中，吸取濾液1 mL，利用RVC 2-18 CD plus 鹽酸型真空離心濃縮儀(Chirst，德國(guó))蒸干濾液，隨后加入1 mL 0.01 mol/L的鹽酸溶液溶解，稀釋后過0.22 μm濾膜，置于LH-8900型全自動(dòng)氨基酸分析儀(HITACHI，日本)上檢測(cè)氨基酸含量，并計(jì)算必需氨基酸(essential amino acid，EAA)、非必需氨基酸(non essential amino acid，NEAA)、風(fēng)味氨基酸(flavor amino acid，F(xiàn)AA)和總氨基酸(total amino acid，TAA)的含量。

1.6.4 中長(zhǎng)鏈脂肪酸指標(biāo)

稱取約0.5 g腎臟或肝臟凍干樣品，置于50 mL離心管中，加入4 mL苯-石油醚(1∶1)混合溶劑，密閉浸提24 h；加入4 mL 0.4 mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液，置于漩渦混合器上振蕩3 min，靜置30 min。加入超純水分層后，取上層溶液并加無水硫酸鈉以吸去樣品中的水分。取200 μL待測(cè)樣品，加800 μL正己烷稀釋后過0.22 μm濾膜，借助7890A型氣相色譜儀(Agilent，美國(guó))對(duì)樣品的中長(zhǎng)鏈脂肪酸含量進(jìn)行測(cè)定。

色譜分析條件為：色譜柱，SP-2560(100 m×0.25 mm×0.20 μm)毛細(xì)管柱，載氣為高純氮?dú)?，流?.8 mL/min；柱溫，初始溫度140 ℃，保持5 min，以3 ℃/min升至220 ℃，保持40 min；火焰離子化檢測(cè)器(FID)溫度280 ℃，進(jìn)樣量1 μL，分流比20∶1。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件中的ANOVA過程進(jìn)行單因素方差分析，并進(jìn)行線性(linear)和二次(quadratic)分析，P<0.05為差異顯著，差異顯著時(shí)采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，結(jié)果用平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 FML對(duì)育肥豬組織器官發(fā)育的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加FML對(duì)育肥豬器官重量無顯著影響(P>0.05)。

表2 FML對(duì)育肥豬組織器官發(fā)育的影響Table 2 Effects of FML on tissue and organ development of fattening pigs kg

2.2 FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響

2.2.1 FML對(duì)育肥豬肝臟中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響

由表3可知，隨著FML添加水平的提高，育肥豬肝臟中粗脂肪含量呈二次顯著降低(P<0.05)；其中，0.16%FML組育肥豬肝臟中粗脂肪含量顯著低于對(duì)照組和0.02%FML組(P<0.05)。

表3 FML對(duì)育肥豬肝臟中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響Table 3 Effects of FML on conventional nutrient contents in liver of fattening pigs %

2.2.2 FML對(duì)育肥豬腎臟中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加FML對(duì)育肥豬腎臟中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量無顯著影響(P>0.05)。

表4 FML對(duì)育肥豬腎臟中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響Table 4 Effects of FML on conventional nutrient contents in kidney of fattening pigs %

2.3 FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中氨基酸含量的影響

2.3.1 FML對(duì)育肥豬肝臟中氨基酸含量的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加FML二次降低了育肥豬肝臟中甘氨酸、谷氨酸、酪氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、天冬氨酸、纈氨酸和組氨酸含量(P<0.05)，線性降低了育肥豬肝臟中苯丙氨酸、精氨酸、賴氨酸和亮氨酸含量(P<0.05)；其中，0.04%FML組育肥豬肝臟中酪氨酸含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

表5 FML對(duì)育肥豬肝臟中氨基酸含量的影響Table 5 Effects of FML on amino acid contents in liver of fattening pigs

2.3.2 FML對(duì)育肥豬腎臟中氨基酸含量的影響

由表6可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加FML對(duì)育肥豬腎臟中所有氨基酸含量無顯著影響(P>0.05)。

表6 FML對(duì)育肥豬腎臟中氨基酸含量的影響Table 6 Effects of FML on amino acid contents in kidney of fattening pigs

續(xù)表6項(xiàng)目 ItemsFML添加水平 FML supplemental levels/%00.020.040.080.16SEMP值 P-value方差分析 ANOVA線性 Linear二次 Quadratic絲氨酸 Ser/%0.540.600.560.570.580.0140.8130.7140.848蘇氨酸 Thr/%0.560.630.580.600.620.0150.7090.5360.795天冬氨酸 Asp/%1.081.221.141.151.200.0310.6750.4920.706纈氨酸 Val/%0.720.810.750.770.800.0200.6800.4840.752異亮氨酸 Ile/%0.550.630.570.570.620.0730.6120.5060.801組氨酸 His/%0.340.390.360.360.370.0100.6890.7180.755必需氨基酸 EAA/%5.596.305.795.806.170.1620.7500.5920.850非必需氨基酸 NEAA/%5.466.195.695.856.070.1490.6520.4660.720風(fēng)味氨基酸 FAA/%4.655.294.854.995.180.1260.5550.4500.700總氨基酸 TAA/%11.0412.4811.4911.7912.240.3050.6880.4940.751必需氨基酸/總氨基酸 EAA/TAA0.5070.5040.5020.5040.5050.0010.7250.4820.390風(fēng)味氨基酸/總氨基酸 FAA/TAA0.4220.4250.4250.4240.4230.0010.9200.7870.683必需氨基酸/非必需氨基酸 EAA/NEAA1.0301.0161.0101.0171.0180.0040.7230.4770.391

2.4 FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中脂肪酸含量的影響

2.4.1 FML對(duì)育肥豬肝臟中脂肪酸含量的影響

由表7可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加FML線性提高了育肥豬肝臟中十五烷酸甲酯(C15∶0)含量(P<0.05)，二次提高了肝臟中棕櫚油酸(C16∶1)、十七烷酸(C17∶0)、花生酸(C20∶0)、二十碳四烯酸(C20∶4n6)和飽和脂肪酸(saturated fatty acid，SFA)含量(P<0.05)，二次降低了肝臟中亞麻酸(C18∶3n6)、二十四烷酸(C24∶0)、不飽和脂肪酸(unsaturated fatty acid，UFA)、PUFA和n-6 PUFA含量(P<0.05)。

表7 FML對(duì)育肥豬肝臟中脂肪酸含量的影響Table 7 Effects of FML on fatty acid contents in liver of fattening pigs

其中，0.02%FML組育肥豬肝臟中肉豆蔻酸(C14∶0)含量顯著低于其他各組(P<0.05)；0.04%和0.16%FML組肝臟中C15∶0含量顯著高于對(duì)照組和0.02%FML組(P<0.05)，0.08%FML組肝臟中C15∶0含量顯著低于0.04%FML組(P<0.05)；0.16%FML組肝臟中C16∶1含量顯著高于其他各組(P<0.05)；0.08%和0.16%FML組肝臟中C17∶0含量顯著高于0.02%FML組(P<0.05)，0.16%FML組肝臟中C17∶0含量顯著高于0.04%FML組(P<0.05)；0.02%FML組肝臟中油酸與反油酸(C18∶1n9)含量顯著高于其他各組(P<0.05)；0.04%、0.08%和0.16%FML組肝臟中C20∶0含量顯著高于對(duì)照組與0.02%FML組(P<0.05)；0.16%FML組肝臟中C18∶3n6含量顯著低于對(duì)照組和0.02%FML組(P<0.05)；0.08%FML組肝臟中二十碳一烯酸(C20∶1)含量顯著高于0.02%和0.16%FML組(P<0.05)，肝臟中二十碳二烯酸(C20∶2)含量顯著高于0.16%FML組(P<0.05)；0.02%FML組肝臟中C24∶0含量顯著高于0.16%FML組(P<0.05)；0.16%FML組肝臟中SFA含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；0.02%FML組肝臟中PUFA含量顯著高于0.08%和0.16%FML組(P<0.05)。

2.4.2 FML對(duì)育肥豬腎臟中脂肪酸含量的影響

由表8可知，與對(duì)照組相比，飼糧添加FML二次提高了育肥豬腎臟中C15∶0、C18∶3n6、α-亞麻酸(C18∶3n3)和n-3 PUFA含量(P<0.05)，二次降低了腎臟中C14∶0和C16∶1含量(P<0.05)。

表8 FML對(duì)育肥豬腎臟中脂肪酸含量的影響Table 8 Effects of FML on fatty acid composition in kidney of fattening pigs

續(xù)表8項(xiàng)目 ItemsFML添加水平 FML supplemental levels/%00.020.040.080.16SEMP值 P-value方差分析 ANOVA線性 Linear二次 Quadraticn-3多不飽和脂肪酸 n-3 PUFA/%0.183c0.184c0.208bc0.221ab0.242a0.0060.045<0.001<0.001n-6多不飽和脂肪酸 n-6 PUFA/%43.34844.34043.73046.13645.7000.6240.6560.1690.400n-6/n-3多不飽和脂肪酸 n-6/n-3 PUFA196.435b241.497a204.375ab194.922b194.629b6.8730.0380.1920.187

其中，各FML添加組育肥豬腎臟中C14∶0含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；0.16%FML組腎臟中C15∶0含量顯著高于0.04%FML組(P<0.05)；對(duì)照組腎臟中C16∶1含量顯著高于其他各組(P<0.05)；0.08%和0.16%FML組腎臟中C18∶3n6含量顯著高于0.02%FML組(P<0.05)；0.08%和0.16%FML組腎臟中C18∶3n3和n-3 PUFA含量顯著高于對(duì)照組和0.02%FML組(P<0.05)，且0.16%FML組腎臟中C18∶3n3和n-3 PUFA含量同時(shí)顯著高于0.04%FML組(P<0.05)；0.02%和0.16%FML組腎臟中二十碳三烯酸(C20∶3n6)含量顯著高于對(duì)照組、0.04%和0.08%FML組(P<0.05)；0.02%FML組腎臟中n-6/n-3 PUFA顯著高于對(duì)照組、0.08%和0.16%FML組(P<0.05)。

3 討 論

3.1 FML對(duì)育肥豬組織器官發(fā)育的影響

已有多項(xiàng)研究表明，在飼糧中添加植物黃酮有利于動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育，對(duì)提高豬、牛和羊等常見經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的生產(chǎn)性能與繁殖性能有較大的幫助。陳慶菊[24]研究發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)飼糧中添加40、80 mg/kg柑橘黃酮能顯著提高斷奶仔豬的末重、平均日增重和平均日采食量，并顯著降低料重比及腹瀉指數(shù)，對(duì)改善斷奶仔豬的腸道健康十分有益。毛玉平等[25]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加100 mg/kg大豆異黃酮不僅對(duì)提高青年奶山羊的平均日采食量、平均日增重和相對(duì)增重最為有利，并且可以通過提高奶山羊血液中雌激素和生長(zhǎng)激素的水平，促進(jìn)動(dòng)物肌肉蛋白的合成，進(jìn)而提高其生產(chǎn)性能。占今舜[26]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加適宜水平的苜蓿黃酮能夠提高奶牛的采食量和產(chǎn)奶量，改善乳品質(zhì)和降低體細(xì)胞數(shù)量。劉瑩瑩等[27]選取60頭巴馬香豬雜交后代，在基礎(chǔ)飼糧的基礎(chǔ)上分別添加0.02%、0.04%、0.08%和0.16%FML，探究了FML對(duì)脂肪型巴馬香豬生長(zhǎng)性能的影響，結(jié)果表明：隨著飼糧FML添加水平的提高，育肥豬的末重和平均日增重呈線性和二次提高，料重比呈線性和二次降低，平均日采食量則無顯著變化。這說明飼糧添加FML有助于提高巴馬香豬的生長(zhǎng)性能，F(xiàn)ML具備作為功能性飼料添加劑進(jìn)而被加以研發(fā)與應(yīng)用的潛力。而在本試驗(yàn)中，飼糧添加FML對(duì)育肥豬頭、心臟、肝臟、脾臟、腎臟和板油等組織器官的重量影響不顯著，原因可能是育肥豬的采食量較大，代謝作用旺盛，外源性的FML難以在較短的飼養(yǎng)周期內(nèi)迅速影響動(dòng)物的器官生長(zhǎng)與發(fā)育。此外，本試驗(yàn)所用的豬數(shù)量較少以及FML添加水平較低也可能是導(dǎo)致該結(jié)果的2個(gè)重要原因。因此，有必要提高FML在育肥豬飼糧中的添加量，延長(zhǎng)飼養(yǎng)期以進(jìn)一步研究FML對(duì)育肥豬組織器官發(fā)育的影響，并綜合評(píng)價(jià)在FML干預(yù)前后試驗(yàn)豬生長(zhǎng)性能的變化。

3.2 FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響

動(dòng)物肝臟富含優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素和礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分，是一種食用價(jià)值較高的滋補(bǔ)佳品，據(jù)統(tǒng)計(jì)，每100 g豬肝中的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)高達(dá)19.49 g，高于瘦牛肉與瘦羊肉，動(dòng)物肝臟中不僅含有比例恰當(dāng)?shù)亩喾N氨基酸，還含有大量的超氧化物歧化酶以發(fā)揮其抗脂質(zhì)氧化的作用。據(jù)統(tǒng)計(jì)，每100 g豬肝含5.78 mg鋅和19.21 mg硒，因此食用豬肝有助于補(bǔ)充這些微量元素，提高機(jī)體免疫力[28]。豬的腎臟含有蛋白質(zhì)、脂肪、維生素A、維生素B、維生素C以及鐵、鈣、磷等多種營(yíng)養(yǎng)素，具有補(bǔ)腎療虛、生津止渴的功效，食用與藥用價(jià)值較高[29]。在本試驗(yàn)中，0.16%FML組育肥豬肝臟中粗脂肪含量顯著低于對(duì)照組和0.02%FML組，說明飼糧添加FML能夠改善肝臟中原有的脂質(zhì)代謝情況，加速脂肪的分解與消耗，具有一定的降脂作用，且這種作用呈現(xiàn)出一定的量效關(guān)系，即隨著飼糧中FML添加水平的逐漸提高，肝臟中粗脂肪含量逐漸降低，F(xiàn)ML對(duì)脂質(zhì)代謝的改善作用越強(qiáng)。這與陳仁偉[30]對(duì)沙蔥黃酮的報(bào)道有不一致的地方，原因可能是FML與沙蔥黃酮在成分和化學(xué)結(jié)構(gòu)上存在差異，且其所用樣品為肉羊的背最長(zhǎng)肌，與本試驗(yàn)所用的育肥豬肝臟和腎臟不同。

3.3 FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中氨基酸含量的影響

蛋白質(zhì)的代謝本質(zhì)上是氨基酸在機(jī)體內(nèi)的消化與吸收，氨基酸作為多種酶及激素的母體或原料，在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮著調(diào)節(jié)生理生化功能、促進(jìn)生長(zhǎng)和提高生產(chǎn)性能等作用[31]。飼糧中的蛋白質(zhì)經(jīng)過胃腸道一系列消化作用后，經(jīng)小腸黏膜吸收并以氨基酸形式進(jìn)入血液，在動(dòng)物各器官內(nèi)經(jīng)過脫羧作用合成各種所需要的蛋白質(zhì)[30]。其中，苯丙氨酸、蛋氨酸、賴氨酸、蘇氨酸、色氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸作為動(dòng)物自身不能合成且對(duì)動(dòng)物生理過程有重要作用的8類EAA，它們的含量與比例在很大程度上決定了蛋白質(zhì)的質(zhì)量，進(jìn)而可以用于評(píng)價(jià)豬肉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值；而天冬氨酸與谷氨酸因具有鮮味，與丙氨酸、脯氨酸及甘氨酸均為影響豬肉香味的FAA，F(xiàn)AA的含量與組成可反饋出豬肉味道的鮮美程度[32-33]。

肝臟、腎臟是研究機(jī)體氨基酸代謝的2個(gè)重要器官。肝臟中氨基酸代謝非?；钴S，來自腸道的氨基酸、小肽以及外周組織中多余的氨基酸都能通過血液運(yùn)輸?shù)礁闻K中，經(jīng)轉(zhuǎn)氨作用生成其他的氨基酸，或經(jīng)脫氨參與尿素循環(huán)，亦或合成蛋白質(zhì)，進(jìn)而完成代謝過程。進(jìn)入肝臟的總氨基酸中只有一小部分以游離氨基酸的形式進(jìn)入外周循環(huán)[34]。腎臟是動(dòng)物最重要的排泄器官，通過形成尿液排泄代謝終產(chǎn)物、藥物和毒物等；此外，在腎小球形成的原尿基礎(chǔ)上，經(jīng)腎小管對(duì)水、葡萄糖、蛋白質(zhì)和氨基酸進(jìn)行有效地重吸收，進(jìn)而對(duì)體液、電解質(zhì)和酸堿平衡進(jìn)行調(diào)節(jié)，對(duì)維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)有重要的作用；腎臟作為一個(gè)內(nèi)分泌器官，能產(chǎn)生多種生物活性物質(zhì)，如腎素、促紅細(xì)胞生成素等，亦參與了胰島素、胃泌素和甲狀旁腺激素等體內(nèi)激素的滅活[35-36]。腎臟通過對(duì)氨基酸及多肽類物質(zhì)進(jìn)行合成、降解、濾過、重吸收以及經(jīng)尿排泄等處理，從而對(duì)體內(nèi)氨基酸池的穩(wěn)態(tài)起著重要的作用，在正常的生理狀態(tài)下，腎臟每天會(huì)濾過50～70 g氨基酸，其中有97%～98%的氨基酸會(huì)在近端小管處被重吸收[35]。通過檢測(cè)肝臟和腎臟中的氨基酸含量一方面可以評(píng)價(jià)這些器官中蛋白質(zhì)的質(zhì)量，進(jìn)而作為衡量育肥豬肝臟和腎臟風(fēng)味與品質(zhì)的基礎(chǔ)；另一方面則用于分析FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中氨基酸代謝的影響。在本試驗(yàn)中，飼糧添加FML使育肥豬肝臟中大部分氨基酸含量下降，其中0.04%FML組肝臟中酪氨酸含量顯著低于對(duì)照組，而在腎臟中各氨基酸含量差異不顯著。本試驗(yàn)所得到的一系列結(jié)論與樊路杰[37]的報(bào)道部分相似，與陳冰等[12]、陳仁偉[30]的報(bào)道存在較大差異，初步推測(cè)FML可能會(huì)促進(jìn)肝臟內(nèi)氨基酸的分解。總而言之，育肥豬肝臟和腎臟中氨基酸含量的變化情況在FML的影響下是不同的，而導(dǎo)致這一現(xiàn)象的原因可能是器官差異性，故FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中氨基酸含量的具體影響機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

3.4 FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中脂肪酸含量的影響

脂肪酸按照是否含有雙鍵可分為SFA與UFA，而根據(jù)雙鍵的數(shù)目又可將UFA細(xì)分為只含1個(gè)C—C雙鍵的單不飽和脂肪酸(monounsaturated fatty acid，MUFA)與含2個(gè)或2個(gè)以上C—C雙鍵的PUFA[38]。SFA來源于家畜肉與乳類中的脂肪，其主要作用是提供能量，若攝入不足易導(dǎo)致腦出血、貧血等疾?。淮送猓琒FA可以調(diào)節(jié)肝臟的脂質(zhì)代謝，減輕肝臟脂肪的積累，有效地治療酒精性肝病[39]。PUFA是構(gòu)成生物膜脂質(zhì)結(jié)構(gòu)的重要組分，對(duì)生物膜結(jié)構(gòu)與功能的維護(hù)和穩(wěn)定起著至關(guān)重要的作用；作為一種活性物質(zhì)，PUFA亦與人體免疫系統(tǒng)功能及心腦血管疾病、糖尿病和腫瘤等多種疾病的發(fā)生密切相關(guān)[40]，n-6 PUFA能導(dǎo)致血小板凝集和血栓形成，對(duì)動(dòng)物腫瘤的發(fā)展有促進(jìn)作用，n-3 PUFAs則表現(xiàn)出抑癌作用[39]。其中，C20∶4n6、亞油酸(C18∶2n6)及C18∶3n3是人體必需的3類PUFA，后2類更是作為合成n-6和n-3 PUFA過程中不可或缺的前體[41]。有研究報(bào)道，向妊娠后期的母豬飼糧中添加n-3 PUFA可促進(jìn)孕體發(fā)育，提高仔豬出生前后的存活率，若長(zhǎng)期添加n-3 PUFA，還能緩解斷奶后仔豬所受到的應(yīng)激，增強(qiáng)仔豬對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力，提高其對(duì)葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率[42]。

肝臟在動(dòng)物脂類代謝中起到了非常重要的作用，是脂肪酸合成的主要部位，約占合成脂肪酸的90%以上。肝臟、腎臟等器官也是易發(fā)生脂肪的變性與沉積的部位，因此是研究脂代謝的2個(gè)重要器官[43]。肝腎中脂質(zhì)的不斷積累可能會(huì)導(dǎo)致肝腎中脂質(zhì)代謝的改變，誘發(fā)脂質(zhì)毒性效應(yīng)。作為環(huán)境與藥物毒性的常見靶標(biāo)，腎臟對(duì)機(jī)體脂質(zhì)的異常沉積比較敏感，過多的脂質(zhì)若沉積于腎臟中，會(huì)損傷腎臟的正常功能[44]。由于育肥豬肝腎中的脂肪酸及其降解物對(duì)其風(fēng)味、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值影響較大，因此檢測(cè)肝腎中的脂肪酸組成及含量一方面對(duì)于綜合評(píng)價(jià)FML對(duì)臟器膳食營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的影響是很有必要的，另一方面則可觀察FML對(duì)肝臟和腎臟中的脂代謝過程及脂質(zhì)沉積是否存在改善作用。本試驗(yàn)結(jié)果顯示：0.02%FML組育肥豬肝臟中C14∶0和C17∶0含量顯著低于對(duì)照組，肝臟中C18∶1n9含量顯著高于對(duì)照組，且肝臟中PUFA含量顯著高于0.08%和0.16%FML組。與肝臟類似的是，0.02%FML組育肥豬腎臟中C14∶0含量亦顯著低于對(duì)照組，且飼糧添加FML后，腎臟中C18∶3n6、C18∶3n3和n-3 PUFA含量提高，0.08%和0.16%FML組腎臟中C18∶3n3和n-3 PUFA顯著高于對(duì)照組，說明飼糧添加0.08%和0.16%FML對(duì)提高育肥豬腎臟中部分PUFA尤其是n-3 PUFA含量有利。綜上所述，飼糧添加適宜水平FML可以改善育肥豬肝腎中脂肪酸的組成比例，即提高這些器官中部分PUFA的含量，并降低某些SFA的含量，這一結(jié)論與陳仁偉[30]、劉瑩瑩等[45]、丁赫等[46]的研究結(jié)果相似。但不可否認(rèn)的是，F(xiàn)ML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中UFA和SFA的影響呈現(xiàn)出較大的器官差異性，而導(dǎo)致這一結(jié)果出現(xiàn)的原因可能是肝臟與腎臟之間在結(jié)構(gòu)、功能上存在本質(zhì)不同。目前FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中各類中長(zhǎng)鏈脂肪酸的影響機(jī)制尚不清楚，需進(jìn)一步試驗(yàn)探究。

4 結(jié) 論

飼糧添加適宜水平的FML能夠改善育肥豬肝臟中原有的脂質(zhì)代謝情況，具有一定的降脂作用。隨著飼糧中FML添加水平的逐漸提高，育肥豬肝臟中粗脂肪含量逐漸降低，F(xiàn)ML對(duì)脂質(zhì)代謝的改善作用越強(qiáng)。FML對(duì)育肥豬肝臟和腎臟中氨基酸及中長(zhǎng)鏈脂肪酸的影響存在較大的器官差異性，但添加適宜水平的FML均可以提高肝臟和腎臟中部分PUFA的含量，降低部分SFA的含量。其中，飼糧添加0.02%FML可降低育肥豬肝臟中多種SFA的含量，提高部分PUFA的含量；而添加0.08%和0.16%FML則對(duì)提高腎臟中n-3 PUFA的含量有利。