竹酢粉對斷奶湖羊生長性能、血液生理生化指標及血清抗氧化和免疫指標的影響

高錄貴 王 景 仲華玲 孟 云 趙 政 劉明美

(江蘇聯合職業技術學院淮安生物工程分院，淮安 223200)

長久以來，生長快、培育周期短、一次栽培只要管理得當便可長久利用[1]的竹材加工剩余物未得到工業化利用[2]。竹酢液又叫竹醋液，是竹材經熱解、冷凝收集得到的棕褐色透明液體，低溫條件下與食用糊精噴霧干燥即得竹酢粉。竹酢液/粉組分復雜，富含醋酸、酚類、酮類等有機活性物質，其在斷奶仔豬和育肥豬方面的應用研究取得了一定成果。研究表明，竹醋液/粉在提高育肥豬生長性能與機體抵抗力及改善肉品質與肉色等方面發揮著重要作用[3-5]，并能提高斷奶仔豬的生長性能、調節免疫器官中細胞因子白細胞介素-10、白細胞介素-22等的mRNA表達水平[6]，提高脫氧雪腐鐮刀菌烯醇作用下的仔豬的生長性能、抗氧化性能和緩解小腸黏膜損傷等[7-8]。

隨著綠色添加劑在畜禽養殖中的開發及應用，國內外學者開始關注竹酢液/粉在畜牧生產中的應用，并取得了一定成果，但研究多聚焦于斷奶仔豬和育肥豬，在反芻動物上的研究卻鮮有報道。近年來，隨著人們生活水平的提高及對羊肉營養價值的廣泛認可，羊肉消費量呈現逐年上漲態勢，有關肉羊綠色生產的研究也開始受到關注。有研究顯示，飼糧中添加2%竹酢粉能提高妊娠后期母羊血液中紅細胞數量、血紅蛋白濃度以及血清中總蛋白、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M含量與總抗氧化能力[9]。截至目前，竹酢液/粉對斷奶湖羊影響的研究未見報道，故本試驗擬以斷奶湖羊為試驗對象，探究竹酢粉對斷奶湖羊生長性能、血液生理生化指標及血清抗氧化和免疫指標的影響，以期為竹酢粉在羊生產中的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用竹酢粉其主要活性物質為有機酸，含量為1.1%，其質量分數為10%的竹酢粉水溶液在25 ℃時的pH≤3.5。根據劉明美等[9]在妊娠后期母羊飼糧中添加2%的竹酢粉、蔣竹英等[7-8]在斷奶仔豬飼糧中添加1%的竹醋液，考慮到斷奶湖羊可能對飼料添加劑的適應性更強，故本試驗確定5%作為飼糧中竹酢粉的添加量。

1.2 試驗設計與飼糧

選擇體重相近、健康的2月齡斷奶湖羊10只，隨機分成2組，每組5只，分別飼喂羊場斷奶湖羊基礎飼糧(對照組)和基礎飼糧+5%(質量比)竹酢粉(試驗組)。基礎飼糧為市售的育肥羊配合顆粒料，其營養指標見表1。竹酢粉按照5%的質量比與育肥羊配合顆粒料攪拌均勻后飼喂。預試期7 d，正試期21 d。試驗期內湖羊飼養管理同羊場其他羊只的常規管理，自由采食和飲水。

表1 育肥羊配合顆粒料營養指標(干物質基礎)Table 1 Nutrition indexes of formula pelleted feed for fattening sheep (DM basis) %

1.3 樣品采集與測定

1.3.1 生長性能

正試期第1天和第21天晨飼前對湖羊逐只稱重，統計初重和末重，計算平均日增重(ADG)；記錄每組試驗羊的采食量，根據總增重和總采食量計算料重比(F/G)。

1.3.2 血樣采集及測定指標

正試期第21天晨飼前每只羊頸靜脈采血3份。其中，一份分裝于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管，使用PE-6800VET全自動動物血細胞分析儀檢測血常規指標，包括白細胞數量、紅細胞數量、血紅蛋白濃度、紅細胞壓積、紅細胞平均體積、平均紅細胞血紅蛋白含量、平均紅細胞血紅蛋白濃度和血小板數量；另一份分裝于肝素鋰抗凝管，使用SMT-120V全自動生化分析儀檢測血液生化指標，包括總蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、葡萄糖、鈣、無機磷、尿素氮、肌酐含量及天門冬氨基酸轉移酶、丙氨酸氨基轉移酶、淀粉酶、肌酸激酶活性；剩下的一份分裝于普通管，室溫放置2 h，4 ℃靜置2～3 h，待血液凝固收縮后，3 000 r/min條件下離心10 min，收集上層血清，使用華衛德朗DR-200BS酶標分析儀以比色法測定血清中總抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性、細胞因子(白細胞介素-2、γ-干擾素)和免疫球蛋白(免疫球蛋白M、免疫球蛋白G和免疫球蛋白A)含量。

1.4 數據處理與統計分析

使用Excel 2007對試驗數據進行初步整理后，采用SPSS 22.0統計軟件進行獨立樣本t檢驗。數據用平均值±標準差(mean±SD)表示，以P<0.01作為差異極顯著標準，以P<0.05作為差異顯著標準。

2 結 果

2.1 竹酢粉對斷奶湖羊生長性能的影響

由表2可知，飼糧中添加5%竹酢粉的試驗組斷奶湖羊的末重、平均日增重與對照組無顯著差異(P>0.05)，料重比比對照組增加了7.40%。

表2 斷奶湖羊的生長性能Table 2 Growth performance of weaned Hu sheep

2.2 竹酢粉對斷奶湖羊血常規指標的影響

由表3可知，試驗組斷奶湖羊血液中白細胞數量極顯著高于對照組(P<0.01)，紅細胞數量、血紅蛋白濃度、平均紅細胞血紅蛋白含量均顯著高于對照組(P<0.05)，其他指標與對照組雖無顯著差異(P>0.05)，但也均高于對照組。

表3 斷奶湖羊的血常規指標Table 3 Blood routine indexes of weaned Hu sheep

2.3 竹酢粉對斷奶湖羊血液生化指標的影響

由表4可知，試驗組斷奶湖羊血液中淀粉酶活性和尿素氮/肌酐顯著低于對照組(P<0.05)，天門冬氨基酸轉移酶、丙氨酸氨基轉移酶活性與尿素氮含量也低于對照組，但差異不顯著(P>0.05)，甘油三酯和肌酐含量高于對照組，差異亦不顯著(P>0.05)，其他指標與對照組均無顯著差異(P>0.05)。

表4 斷奶湖羊的血液生化指標Table 4 Serum biochemical indexes of weaned Hu sheep

2.4 竹酢粉對斷奶湖羊血清抗氧化和免疫指標的影響

由表5可知，試驗組斷奶湖羊血清中白細胞介素-2含量顯著高于對照組(P<0.05)，γ-干擾素含量有高于對照組的趨勢(P=0.053)，其他指標與對照組均無顯著差異(P>0.05)。

表5 斷奶湖羊血清抗氧化和免疫指標Table 5 Serum antioxidant and immune indexes of weaned Hu sheep

3 討 論

3.1 竹酢粉對斷奶湖羊生長性能的影響

竹酢粉能提高斷奶仔豬[3,5,8,10]和肉雞[11]的生長性能，究其原因可能是竹酢粉中的酸、酚等成分對動物腸道微生物產生了有益影響，從而改善了腸道環境。本研究發現，飼糧中添加5%竹酢粉對斷奶湖羊的生長性能無顯著影響。這可能與牛、羊等反芻動物瘤胃內微生物數量龐大，竹酢粉對機體與其體內微生物的互利共生關系影響不大或者試驗期較短或者瘤胃微生物對竹酢粉進行了降解等有關，具體原因還需進一步研究。

3.2 竹酢粉對斷奶湖羊血液生理指標的影響

白細胞數量的變化可以反映機體細胞免疫水平的高低，進而反映機體的免疫狀態[12]。本試驗發現，飼糧中添加5%竹酢粉能極顯著提高斷奶湖羊血液中白細胞數量，蔣竹英等[8]的研究也有類似發現，說明飼喂竹酢粉可提高湖羊的抗病能力。紅細胞不僅是血液輸送氧氣的主要載體，還含有多種天然免疫分子，具有多種天然免疫功能，是一種重要的天然免疫細胞[13]。研究表明，在飼糧或脫氧雪腐鐮刀菌烯醇污染下飼糧中添加竹醋液，可提高斷奶仔豬血液中紅細胞數量和血紅蛋白濃度[7-8]；飼糧中添加2%竹酢粉能提高妊娠后期母羊血液中紅細胞數量和血紅蛋白濃度[9]。本試驗得到了相似結果，這說明竹酢粉在預防動物貧血、提高新陳代謝和天然免疫等方面有一定作用。

3.3 竹酢粉對斷奶湖羊血液生化指標的影響

胰腺、唾液腺、胃、膽囊、空腸、回腸等是血清淀粉酶的主要來源，當其損傷或出現炎癥時，會引起血液中淀粉酶活性升高[14]。天冬氨酸氨基轉移酶和丙氨酸氨基轉移酶作為評價肝功能的重要指標，可以反映肝臟的受損情況。當心臟和肝臟組織細胞發生炎癥、壞死或在冷熱應激狀態時，血清轉氨酶活性升高[15]。本試驗中，竹酢粉可顯著降低血液中淀粉酶活性，同時谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活性也稍低于對照組，表明竹酢粉可能對湖羊的胰腺和肝臟具有一定的保護作用。

血液中的甘油三酯主要來源于食物攝入、消化吸收、轉化或動物體內自身合成，甘油三酯的主要功能是供給與儲存能源，還可固定和保護內臟。本試驗發現，試驗組斷奶湖羊血液中甘油三酯含量略高于對照組，表明竹酢粉可能會提高湖羊對脂肪的吸收。肌酐是機體內肌肉代謝的產物，在肌肉中，肌酸主要通過不可逆的非酶脫水反應緩緩地形成肌酐，再釋放到血液中，隨尿排泄，因此血液中肌酐含量與體內肌肉總量關系密切。本試驗發現，試驗組斷奶湖羊血液中肌酐含量略高于對照組，表明試驗組湖羊的肌肉含量高于對照組或竹酢粉使湖羊肌肉代謝加強。

尿素氮是機體蛋白質代謝的主要終末產物，血液中尿素氮含量是反映蛋白質的代謝方向和飼料氨基酸平衡的一個指標。肝臟是體內生成尿素的最主要器官，因此肝臟尿素生成量的減少可為其他器官如肌肉的蛋白質沉積提供充足的氨基酸等原材料。陳代文等[16]的研究發現，血清尿素氮含量與豬的肌肉增長或日增重呈負相關。本試驗中，試驗組斷奶湖羊血液中尿素氮含量略低于對照組，表明竹酢粉可能會提高湖羊對氮的利用率，增加肌肉蛋白質沉積。

3.4 竹酢粉對斷奶湖羊血清抗氧化和免疫指標的影響

總抗氧化力是反映機體對外來刺激的代償能力和機體自由基代謝狀態強弱的重要指標[17]，超氧化物歧化酶具有消除超氧陰離子毒性、保護細胞免受損傷的功能[18]。研究發現，竹醋液在清除氧自由基和提高油脂抗氧化能力方面具有與茶多酚相似的效果[19]，斷奶仔豬飼糧中添加1%竹醋液能夠提高血清總抗氧化力[8]。本試驗結果顯示，飼糧中添加5%竹酢粉后斷奶湖羊血清總抗氧化力和超氧化物歧化酶活性無顯著變化。

免疫球蛋白G是動物血清中的主要免疫球蛋白，在機體抗菌、抗病毒、抗感染方面發揮主要作用；免疫球蛋白M是機體初次接觸抗原物質最早產生的抗體，具有激活補體等作用；血清免疫球蛋白A含量占總免疫球蛋白A的85%左右，其具有免疫球蛋白G、免疫球蛋白M的部分生物學功能[20]。本研究發現，飼糧中添加5%竹酢粉對斷奶湖羊血清中免疫球蛋白M、免疫球蛋白G和免疫球蛋白A含量均無顯著影響。

細胞因子在免疫調節中起重要作用。白細胞介素-2和γ-干擾素可由Th1型細胞分泌，主要促進T淋巴細胞增殖、介導細胞免疫和炎癥反應[21]。本試驗結果顯示，飼糧中添加5%竹酢粉能顯著提高斷奶湖羊血清中白細胞介素-2，并有提高γ-干擾素含量的趨勢，結合前面有關極顯著提高其血液中白細胞數量的結果，初步得出5%竹酢粉可能在提高斷奶湖羊抗病力和細胞免疫力方面發揮了一定作用。

4 結 論

本試驗條件下，斷奶湖羊飼糧中添加5%竹酢粉對其生長性能無顯著影響，但可顯著或極顯著提高其血液中白細胞數量、紅細胞數量、血紅蛋白濃度、平均紅細胞血紅蛋白含量，顯著降低血漿中淀粉酶活性和提高細胞免疫因子(白細胞介素-2、γ-干擾素)含量。綜上可知，5%竹酢粉在提高斷奶湖羊免疫力和抗病力方面發揮了一定作用。