陰道彩色多普勒超聲參數與微血管密度、促血管生成素-2對卵巢癌的診斷價值

田麗娟 路 偉 岳 虹

卵巢癌是女性常見的生殖系統惡性腫瘤，早期發病無特殊癥狀，大多數患者發現時已經處于中晚期，錯過了治療的最佳時間，因此卵巢癌患者死亡率較高，預后較差[1-2]。研究發現[3-6]，卵巢癌的發生及發展與腫瘤的增殖、新生血管的侵襲、微血管密度(MVD)等均密切相關，因此，如果能早期發現新生血管增生情況對于早期診斷卵巢癌可能有一定的臨床意義。超聲影像學技術是臨床常用的輔助檢查方法，對于腹腔及盆腔臟器疾病均能在一定程度上早期發現，尤其是陰道超聲對女性生殖系統疾病分辨率高，可通過捕捉病灶血流及阻力等情況提高疾病的診斷率。臨床報道顯示，卵巢良惡性腫瘤在超聲影像學下表現并不相同[7-9]。同時，卵巢良惡性腫瘤的微血管密度分布也不相同，因此，本研究對陰道彩色多普勒超聲參數與微血管密度、促血管生成素-2(Ang-2)對卵巢癌的診斷價值進行了進一步研究，為卵巢癌的診斷提供參考，現將相關研究結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2020年8月期間在我院診治的52例卵巢癌患者為研究對象(卵巢癌組)，以1∶1比例隨機選取以上時間段內52例卵巢良性腫瘤患者為對照(卵巢良性腫瘤組)。納入標準：①均通過病理檢查證實為卵巢良性或惡性腫瘤。②在納入研究前尚未進行任何抗腫瘤治療。③納入研究前無盆腔手術史。④患者均行手術治療。排除標準：①合并心、肝、腎等其他重要臟器功能障礙。②合并有其他部位惡性腫瘤。③合并有精神或意識障礙性疾病，存在溝通障礙者。④預期生存時間<6個月者。卵巢癌組年齡45～76歲，平均(64.76±6.90)歲，病程1～4個月，平均(2.56±0.64)個月，體重指數19.21～25.96 kg/m2，平均(21.77±1.75)kg/m2，依據2017年NCCN《卵巢癌臨床實踐指南》分期[10]其中Ⅰ～Ⅱ期16例、Ⅲ～Ⅳ期36例；卵巢良性腫瘤組年齡40～81歲，平均(60.98±8.12)歲，病程1～7個月，平均(2.89±0.70)個月，體重指數19.29～25.91 kg/m2，平均(22.14±1.90)kg/m2。2組患者年齡、病程、體重指數等比較差異無統計學意義(P>0.05)，本研究經過醫院倫理委員會審核通過，患者或家屬知情同意，簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 陰道彩色多普勒超聲檢查 患者在術前常規行陰道彩色多普勒超聲檢查，檢查儀器為美國GE公司生產，型號為DC-3/DC-3T，探頭頻率為7.5 MHz。在排空膀胱后取膀胱截石位下進行檢查，將超聲陰道探頭置入陰道內先在二維模式下觀察病灶所在位置、大小、形態、回聲等，隨后開啟彩色多普勒超聲模式，對病灶血流參數進行觀察及測定，包括動脈血管搏動指數(PI)、阻力指數(RI)、舒張末期流速(EDV)、峰值流速(PSV)、平均流速(VM)，以上參數測定3個周期取平均值。

1.2.2 微血管密度及促血管生成素-2的檢測 采用免疫組化SP法檢查，具體方法參考相關文獻[11-12]，SP試劑盒為武漢博士德生物工程有限公司生產，DAB顯色試劑盒為北京索萊寶科技有限公司生產，鼠抗人 CD34 單克隆抗體為北京中杉金橋生物技術有限公司生產，鼠抗人促血管生成素-2多克隆抗體為英國ABcam公司生產。將切除的病灶標本用10%的甲醛液固定，石蠟包埋及常規切片、染色，應用 Weidener 法計數對微血管密度進行觀察及計數：在低倍鏡下選擇3個血管密集的部位作為觀察部位，再在高倍鏡下在以上每個部位區域內選擇5個獨立視野，計算出被CD34標記的血管內皮細胞，對血管數量進行計算，作為微血管密度，CD34陽性染色為棕褐色。促血管生成素-2染色為棕褐色或棕黃色，根據著色強度分別計分，無色、淡黃色、棕黃色、褐色分別為0分、1分、2分、3分，再根據顯色陽性細胞數計算，≤10%為0分、>10%～30%為1分，>30%～50%為2分，>50%為3分，以上兩種計數分值相加得分為最終陽性表達情況。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 2組患者陰道彩色多普勒超聲參數比較

卵巢癌組PI、RI均低于卵巢良性腫瘤組，EDV、PSV、VM均高于卵巢良性腫瘤組，比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 2組患者陰道彩色多普勒超聲參數比較

2.2 卵巢癌患者不同分期患者陰道彩色多普勒超聲參數比較

卵巢癌組Ⅰ～Ⅱ期患者PI、RI均高于Ⅲ～Ⅳ期患者，EDV、PSV、VM均低于Ⅲ～Ⅳ期患者，比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 卵巢癌患者不同分期患者陰道彩色多普勒超聲參數比較

2.3 2組患者微血管密度及促血管生成素-2表達情況比較

卵巢癌組微血管密度及促血管生成素-2表達陽性率高于卵巢良性腫瘤組，比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 2組患者微血管密度及促血管生成素-2表達情況比較

2.4 卵巢癌患者不同分期患者微血管密度及促血管生成素-2表達情況比較

卵巢癌組Ⅰ～Ⅱ期患者微血管密度及促血管生成素-2表達陽性率均低于Ⅲ～Ⅳ期患者，比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表4。

表4 卵巢癌患者不同分期患者微血管密度及促血管生成素-2表達情況比較

2.5 2組患者陰道彩色多普勒超聲參數與微血管密度及促血管生成素-2的相關性

spearman相關分析顯示，卵巢癌組患者陰道彩色多普勒超聲下PI、RI與微血管密度、促血管生成素-2之間有負相關性，與EDV、PSV、VM之間有正相關性(P<0.05)，見表5。卵巢良性腫瘤組患者以上參數之間無相關性(P>0.05)，見表5。

表5 2組陰道彩色多普勒超聲參數與微血管密度及促血管生成素-2的相關性

3 討論

卵巢癌的發生與遺傳、環境等多種因素密切相關[3-6]，在國內外卵巢癌的患病率均有增高趨勢[1-2，13-15]，已經成為嚴重影響到女性身體健康的生殖道惡性腫瘤之一。同時由于卵巢癌的早期癥狀并不典型，因此通過婦科檢查等很難對其早期診斷，大部分臨床就診時病情已經處于中晚期，生存時間明顯縮短，因此早期的診斷對于卵巢癌患者的預后意義重大。

研究發現[16-18]，腫瘤的生長和浸潤與血管的生成密切相關，尤其是惡性腫瘤典型的特點之一就是有大量的新生血管生成，同時伴隨著新生血管生長，腫瘤也隨之快速生長及轉移。新生血管的特點是管壁較薄，無平滑肌，僅為內皮細胞組成，因此彈性較差，分布也較為紊亂，管腔相對增粗，因此如果在病灶內發現存在大量的新生血管，往往提示病灶為惡性。超聲目前是惡性腫瘤常用的篩查方法，通過超聲多普勒檢查可觀察到腫瘤內血管的分布狀況，而且還能通過包塊有無包膜等特點綜合判斷包塊的性質，惡性腫瘤包塊在彩色多普勒下主要會表現為大量的新生血管，新生血管血流有低阻力和高流速的特征，往往同時伴有走形異常及動靜脈瘺，因此觀察新生血管情況可判斷腫瘤的良惡性。本研究中卵巢癌患者陰道彩色多普勒觀察到PI、RI均低于卵巢良性腫瘤組，EDV、PSV、VM均高于卵巢良性腫瘤組，而且卵巢癌組Ⅰ～Ⅱ期患者PI、RI均高于Ⅲ～Ⅳ期患者，EDV、PSV、VM均低于Ⅲ～Ⅳ期患者，研究結果與臨床報道的結果是一致的，表明陰道彩色多普勒超聲有助于卵巢良惡性腫瘤的鑒別，而且對卵巢癌的進展分期判斷也有一定臨床價值。

目前微血管密度被認為是反映腫瘤血管生成的主要標志[19-21]，CD34能特異性的對血管內皮細胞進行標記，因此常用于微血管密度的檢測。被CD34標記的血管內皮會呈現棕褐色，通過對切除的卵巢腫瘤組織進行免疫組化SP法檢查，觀察微血管密度的表達，結果顯示卵巢癌組織內微血管密度表達率明顯高于良性卵巢腫瘤組織，同時隨著卵巢癌的分期增加微血管密度分布隨之增加，研究結果與臨床報道的結果一致[22-23]，說明微血管密度能反映卵巢癌的生長及浸潤速度，微血管密度越高表明卵巢癌具有更高的轉移和惡化進展趨勢。促血管生成素-2是特異性的血管生成刺激因子，是作用于內皮細胞的細胞調節因子，是有進行血管重構的組織中活化的內皮細胞分泌的，能破壞血管的完整性，影響到細胞之間的連接，可拮抗促血管生成素-1從而促使新生血管的生成，促血管生成素-2在惡性腫瘤組織中表達明顯，但是在正常組織中則表達有限，因此臨床上可通過檢測促血管生成素-2的表達來判定腫瘤的良惡性及腫瘤的惡性程度。本研究結果顯示卵巢癌組織中促血管生成素-2表達陽性率明顯高于卵巢良性組織，而且隨著卵巢癌的分期進展促血管生成素-2表達率也隨之增加，進一步說明促血管生成素-2可用于良惡性腫瘤的判斷及卵巢癌的病情嚴重程度輔助診斷[24-26]。

綜上所述，陰道彩色多普勒血流顯像血流參數、微血管密度、促血管生成素-2均與卵巢癌及其病情進展程度密切相關，對卵巢癌的輔助診斷有較高的臨床價值。本研究結果spearman相關分析顯示卵巢癌組患者陰道彩色多普勒超聲下PI、RI與微血管密度、促血管生成素-2之間有負相關性，與EDV、PSV、VM之間有正相關性，卵巢良性腫瘤組患者以上參數之間無相關性，表明通過陰道彩色多普勒超聲觀察卵巢腫瘤的血流參數在一定程度上可對腫瘤性質進行判斷，彩色多普勒超聲下的血管參數在一定程度上可反映出腫瘤的新生血管情況。