小細胞肺癌組織中DBC-1表達及臨床意義

王 麗

小細胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)是肺癌組織類型中較為罕見的低分化神經內分泌腫瘤疾病，其分化程度較低，但惡性程度極高，極易通過血液、淋巴轉移，在發生遠處轉移后，會引發相應部位的癥狀，故患者一旦確診為SCLC，需盡早進行相應治療，以免癌細胞擴散，錯失最佳治療時機[1-2]。目前，臨床治療主要以綜合性治療為主，雖然近年來該病治療水平迅速提升，但其預后效果仍較差，死亡率較高，有研究指出，部分基因改變在其預后中發揮重要作用，故臨床需對其進行探索分析，尋找敏感性較高的腫瘤標志物，以為臨床診治、預后提供有效指導[3-4]。乳腺癌缺失因子-1(deleted in breast cancer-1，DBC-1)因其在乳腺癌組織中缺失而得名，研究指出，其在細胞增殖、凋亡的生理病理過程中發揮重要作用[5]。鑒于此，本研究探討SCLC組織中乳腺癌缺失因子-1(DBC-1)表達及臨床意義。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

采用前瞻性隨機試驗方法，選取許昌市中心醫院病理科2018年3月至2019年12月收治的76例SCLC患者作為研究對象，活檢或手術切除后收集SCLC組織，并收集相應的癌旁組織，經福爾馬林固定，石蠟包埋，連續切片，厚度為4 μm。納入標準：①均符合SCLC診斷標準[6]；②自愿簽署知情同意書。排除標準：①合并其他惡性腫瘤疾病；②合并感染性、血液性疾病；③合并凝血功能障礙。76例患者中男性70例，女性6例；年齡48～78歲，平均年齡為(63.28±3.58)歲；吸煙59例，不吸煙17例；其中活檢組織32例，手術組織44例；有淋巴結轉移者42例，無淋巴結轉移者34例；廣泛期46例，局限期30例。本研究經醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

采用免疫組織化學改良二步法，對DBC-1水平進行檢測：切片常規二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水，采用3%雙氧水滅活內源性過氧化物酶，持續12 min。PBS洗滌3 min×3次，加入一抗，在4 ℃環境下過夜；PBS洗滌5 min×3次，加入二抗，室溫孵育30 min；PBS洗滌5 min×3次，DAB顯色2 min左右；采用蘇木精復染3 min，梯度酒精，二甲苯浸泡，采用中性樹脂封片。待其干燥后，置于顯微鏡下觀察染色情況。

1.3 評價指標

由2名觀察者采用盲法進行觀察，每張切片均選擇5個視野，顯微鏡放大200倍，每個視野計數150個細胞，對癌細胞及其癌旁組織染色情況進行觀察。其中細胞染色呈褐色、深褐色即為DBC-1陽性表達。

1.4 統計學方法

數據應用SPSS 22.0軟件處理，以表示計量資料，計數資料用百分比表示，采用χ2檢驗，采用單因素分析、多項Logistic回歸分析檢驗DBC-1陽性表達對小細胞癌細胞組織預后的影響因素，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 SCLC組織、癌旁組織的DBC-1表達水平

SCLC組織中DBC-1陽性表達率高于癌旁組織，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 SCLC組織、癌旁組織中DBC-1表達水平(例，%)

2.2 DBC-1表達水平與臨床病理參數間單因素分析

經單因素分析顯示，SCLC組織中DBC-1陽性表達與患者年齡、性別、吸煙史無關(P>0.05)，但可能與TNM分期、復發轉移有關(P<0.05)。見表2。

表2 DBC-1表達水平與臨床病理參數間單因素分析(例，%)

2.3 多項Logistic回歸分析

經Logistic回歸分析，提示TNM分期、復發轉移是DBC-1陽性表達的影響因素(OR>1，P<0.05)。見表3。

表3 多項Logistics回歸分析

3 討論

SCLC在肺癌中較為罕見，只占所有肺癌的15%，但其在肺癌疾病中惡性程度最高，且腫瘤細胞生長速度極快，極易出現侵襲性進展，并向遠處轉移，累及全身多處臟腑器官，死亡率極高[7-8]。該病發病機制尚未明確，臨床研究顯示，可能與環境污染、遺傳、吸煙、職業等因素有關，導致肺部組織細胞出現惡性病變，從而誘發SCLC[9]。目前，臨床針對該病多采用綜合性治療方案，包括放化療、手術治療等，以延長患者生存期限為目標，避免其進一步惡化[10]。近年來，雖然SCLC的早期診治及綜合性治療水平明顯提升，但其預后效果仍不甚理想，有研究指出，其預后與機體內某些基因表達水平有關，故臨床需對其進行探索分析，以便促進預后，改善患者生命質量[11-12]。

本研究結果顯示，SCLC組織中DBC-1陽性表達占比高于癌旁組織，經單因素分析顯示，SCLC組織中DBC-1陽性表達與年齡、性別、吸煙史無關(P>0.05)，但可能與TNM分期、復發轉移有關(P<0.05)；為證實本結論，進一步做Logistic回歸分析，提示TNM分期、復發轉移是DBC-1陽性表達的影響因素，可見DBC-1高表達預示SCLC患者預后不良。分析其原因在于，DBC-1是一種新鑒定出的基因，目前臨床關于其相關研究報道較少，對其病理生理功能了解并不確切；因DBC-1在乳腺癌組織中缺失，故臨床將其命名為乳腺癌缺失基因-1[13]。有研究指出，DBC-1在多種腫瘤細胞組織中均表現為低表達，認為其在腫瘤組織中發揮抑制腫瘤因子的作用；也有研究認為，其也可能是1種具有腫瘤類型依賴性的促癌劑[14]。DBC-1研究機制發現，DBC-1對ER、SIRT1等分子的表達、甲基化造成影響，并在調控細胞侵襲、增殖、轉移、凋亡等生理病理過程中扮演重要角色；研究顯示，CK2a經轉錄后，其水平對DBC-1甲基化具有調節作用，且經caspase通路調節，對TNF-α誘導細胞凋亡起到促進作用；另一方面，DBC-1可與SIRT1直接結合，對SIRT1的去乙酰化酶具有抑制作用，從而對SIRT1-p53通路造成影響，有效促進細胞凋亡，由此可見，DBC-1在腫瘤細胞的發生、進展中發揮重要作用[15]。

綜上所述，SCLC組織中DBC-1陽性表達率較高，其與TNM分期、復發轉移等因素有關，可見DBC-1高表達預示SCLC患者預后不良。