抑制miR-214對七氟醚麻醉后新生小鼠學習認知能力的影響及機制

張祎明,宋 陽,高 揚,張 靜,韓玉琴

(承德市兒童醫院麻醉科,承德 067000;*通訊作者,E-mail:zhangyimingcd@yeah.net)

七氟醚是外科手術中常用的吸入麻醉劑,因其氣道刺激性小、麻醉過程平穩、蘇醒迅速等特點,廣泛應用于新生兒、嬰幼兒的手術麻醉[1]。妊娠后期至出生后6個月是人類大腦發育的高峰期[2]。既往研究表明,新生兒早期多次暴露于七氟醚與其學習認知功能障礙有關[3-5]。目前研究發現,七氟醚對學習認知功能障礙的影響可能與其誘導海馬區一些基因的改變從而降低海馬神經元的再生和存活有關,但具體機制尚不清楚[6,7]。

微小RNA(miRNAs)是一類小的非編碼RNA,由22-25個核苷酸組成,存在于所有真核生物中,參與細胞生命活動的調控[8]。研究顯示miRNA介導的基因調控與神經精神功能障礙有關[9,10]。近期葉濟世等[11]通過miRNA微流體芯片分析顯示,miR-214在七氟醚吸入麻醉的新生大鼠海馬組織中表達明顯上調,可能與七氟醚吸入麻醉誘發的新生大鼠的發育期神經毒性有關。至今,miR-214對七氟醚吸入麻醉誘發的新生兒學習認知能力的影響及作用機制尚不明確。因此,本研究旨在探討miR-214在七氟醚麻醉后新生小鼠海馬區的表達變化,并進一步觀察抑制miR-214對七氟醚麻醉后新生小鼠學習認知能力的影響和可能的機制。

1 材料與方法

1.1 實驗試劑

七氟醚購自日本Maruishi公司;antagomiR-NC、antagomiR-214及PCR引物購自上海吉瑪制藥公司;TUNEL(綠色熒光)細胞凋亡檢測試劑盒購自江蘇碧云天公司;IL-1β、TNF-α和IL-6 ELISA檢測試劑盒購自上海酶聯生物公司;Trizol購自美國Invitrogen公司;逆轉錄cDNA試劑盒、qRT-PCR試劑盒購自日本TAKARA公司;一抗p-PI3K、GAPDH抗體購自美國Santa Cruz公司;HPR偶聯的二抗購自英國Abcam公司。……