PPARγ在5-HT介導的肺動脈平滑肌細胞增殖和凋亡中的作用

韓新源,酉鵬華,雍志軍,張雪婷,王暄齊,楊俊生,王順達*

(1陜西省人民醫院康復醫學科,西安 710068;2陜西省人民醫院心內科;*通訊作者,E-mail:Wanda0916@163.com)

肺動脈高壓(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一種嚴重的進行性臨床綜合征,以肺血管阻力增加、肺動脈壓力升高為特征,常導致右心衰竭,最終導致死亡[1]。肺動脈高壓發生發展的病理機制包括持續的肺血管收縮、血管重構和原位血栓形成[2,3]。其中血管重構在發病中尤為重要,多由內膜增厚和中膜增生引起,肺動脈平滑肌細胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖/凋亡失衡在這一過程中起著重要作用[4,5]。因此,探索PASMCs增殖/凋亡失衡的分子機制,對預防或逆轉肺血管重構,從而治療肺動脈高壓具有重要意義。有研究表明,5-羥色胺(5-hydroxytrypta,5-HT)參與PAH的發病機制[6]。PAH患者血漿5-HT濃度升高,而誘導血小板5-HT釋放或抑制5-HT攝取的藥物可能有助于PAH的發生[7,8]。過氧化物酶增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)屬于核激素受體超家族成員。有證據表明,PPARγ對PAH發病機制所涉及的多種途徑有影響,激活PPARγ可以減輕肺血管功能障礙和PAH,而PPARγ的靶向基因缺失與自發性PAH的發生有關[9]。近年來,有研究報道PPARγ也在調節細胞增殖和凋亡中發揮重要作用[10]。但目前尚未有研究評價PPARγ對5-HT誘導的PASMCs增殖和凋亡的影響。故本研究旨在探討5-HT對PASMCs增殖和凋亡及PPARγ表達的影響,特別是PPARγ在5-HT誘導的細胞增殖和凋亡的調控中的作用。

1 材料與方法

1.1 實驗主要試劑

人PASMCs(美國ATCC公司)、DMEM培養基、標準胎牛血清(美國Gibco BRL);MTT(美國Sigma公司)、5-HT(美國Tocris公司)、PD98059(美國Sigma公司);15d-PGJ2、羅格列酮和GW9662(美國Cayman公司);anti-PPARγ抗體(美國Santa Cruz公司);Annexin Ⅴ-FLUOS凋亡檢測試劑盒(美國Roche Diagnostics公司)。……