miR-4778-3p在胃癌組織中的表達及對胃癌MGC803細胞增殖的影響

吳 菁,蔣志勇,李奎生,劉 芳,呂志武,黃明沂,肖 瑤

(1深圳市寶安區福永人民醫院消化內科,深圳 518103;2武漢大學中南醫院影像科;3南方醫科大學附屬深圳寶安醫院消化內科;*通訊作者,E-mail:drjinjie@126.com)

胃癌是人類消化系統最常見的惡性腫瘤,發病率不斷上升[1]。很多胃癌患者在首次確診時已位于晚期,失去手術治療機會,5年生存率很低[2]。探求胃癌的發病機制及新的治療策略是目前胃癌研究領域的熱點。微小RNA(microRNA,miRNA)是一類內源性非編碼RNA,在真核細胞中高度保守[3]。miRNA可通過調節關鍵基因表達,影響細胞的分化、增殖和發育[4]。據報道,胃癌組織中存在多個miRNA異常表達,其在胃癌的發生和發展過程發揮重要作用[5,6]。Zhang等[7]研究發現,miR-4778-3p在復發或轉移的宮頸癌患者組織中呈低表達,抑制宮頸癌細胞的惡性生物學行為。miR-4778-3p在胃癌組織中的表達及對胃癌細胞增殖的影響尚不清楚。本研究旨在檢測miR-4778-3p在胃癌組織中的表達,通過體外實驗探討miR-4778-3p對胃癌細胞增殖和細胞周期的影響及作用機制。

1 材料與方法

1.1 組織標本

選取2018年7月至2020年12月間本院胃腸外科行手術切除的38例胃癌組織及癌旁組織(距腫瘤邊緣>5 cm)。男性25例,女性13例,年齡51.76±8.96歲。病灶直徑<5 cm 12例,病灶直徑≥5 cm 26例。Ⅰ期4例,Ⅱ期6例,Ⅲ期28例。淋巴結轉移21例,無淋巴結轉移17例。所有患者術前均未接受放療或化療。本研究經本院倫理委員會批準,所有患者均簽署知情同意書。

1.2 細胞株與主要試劑

胃癌MGC803細胞購于中國科學院上海生科院細胞資源中心,收集對數生長期細胞用于實驗;miR-4778-3p mimic、miR-NC、SMC4-Wt野生型質粒、SMC4-Mut突變型質粒均購于廣州銳博生物科技有限公司;Lipofectamine 3000轉染試劑購于美國Invitrogen公司;胎牛血清、RPMI-1640培養基購于美國Gibco公司;雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒購于……