血管內皮損傷生物標志物聯合載脂蛋白A1、NALP3檢測對青年痛風的診斷價值

呂 秋，李 偉，應長江

1.徐州醫科大學附屬淮海醫院內分泌科，江蘇徐州 221002;2.徐州醫科大學附屬醫院內分泌科，江蘇徐州 221000

痛風為一種嘌呤代謝紊亂性疾病，多為尿酸排泄障礙引起，發病率為1%～3%，男女患者比例為15∶1[1]。隨著飲食和生活方式的改變，痛風患者有年輕化的趨勢[2]。早期積極干預及降低尿酸水平能夠延緩疾病進展或阻止臟器損害。核苷酸結合寡聚化結構域(NOD)樣受體蛋白3(NLRP3)為NOD樣受體家族成員，能夠識別多種病原微生物，在炎性聯級反應、固有免疫等過程中有重要作用[3]。載脂蛋白A1(ApoA1)是高密度脂蛋白(HDL)的結構蛋白，有著逆向轉運膽固醇、抗炎、抗氧化、抗動脈粥樣硬化的作用[4]。內皮素1(ET-1)和細胞間黏附分子1(ICAM-1)為臨床常見的血管內皮損傷生物標志物，與心血管內皮損傷關系密切[5]。既往報道顯示，ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3均與痛風有關，但目前國內關于其聯合應用于青年痛風診斷的報道較少[6-8]。本研究分析了血管內皮損傷生物標志物ET-1、ICAM-1聯合ApoA1、NALP3診斷青年痛風的價值，旨在為臨床工作提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年8月至2020年8月徐州醫科大學附屬淮海醫院收治的123例青年痛風患者作為病例組，病程(7.85±2.13)年,其中慢性痛風69例、急性痛風54例；另外，選取同期在徐州醫科大學附屬淮海醫院體檢的健康者60例作為對照組。兩組一般資料[包括性別、年齡、體質量指數(BMI)等]比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。納入標準：(1)痛風的診斷參照《中國高尿酸血癥與痛風診療指南(2019)》中的相關診斷標準[1]；(2)青年人群(年齡16～44歲)；(3)依從性好，可配合完成隨訪；(4)自愿簽署知情同意書。排除標準：(1)繼發性痛風；(2)合并代謝性疾病、自身免疫性疾病、血液系統疾病、傳染性疾病、感染性疾病、惡性腫瘤、高血壓、冠心病；(3)妊娠期或哺乳期婦女；(4)臨床資料不齊全；(5)心、肝、肺、腦等重要臟器功能異常。本研究取得本院醫學倫理委員會批準。

1.2方法 詢問并記錄受試者的吸煙史、飲酒史、高嘌呤飲食情況。于入院次日清晨采集肘靜脈血5 mL，采用Optima MAX-XP臺式超速離心機(貝克曼庫爾特商貿有限公司)，以3 000 r/min離心15 min，分離血清，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清ET-1、ICAM-1、NALP3水平，儀器為ELx808LBS酶標儀(北京澤平科技有限責任公司)，檢測試劑為原廠配套試劑；采用透射免疫濁度法檢測血清ApoA1水平，儀器為PUZS-300全自動生化分析儀(上海帝博思生物科技有限公司)，檢測試劑為原廠配套試劑。

2 結 果

2.1兩組一般資料及4項檢測指標的比較 兩組間吸煙史比較差異無統計學意義(P>0.05)；病例組有飲酒史、高嘌呤飲食比例顯著高于對照組(P<0.05)；病例組血清ET-1、ICAM-1、NALP3水平顯著高于對照組(P<0.05)，病例組血清ApoA1水平顯著低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組間一般資料及4項檢測指標的比較

2.2急、慢性痛風患者血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3水平的比較 急性痛風患者血清ET-1、ICAM-1、NALP3水平顯著高于慢性痛風患者(P<0.05)；急性痛風患者血清ApoA1顯著低于慢性痛風患者(P<0.05)，見表2。

表2 急、慢性痛風患者血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3水平的比較

2.3青年痛風的危險因素分析 性別、年齡、BMI和吸煙史都不具有統計學意義(P>0.05)；飲酒史(OR=3.384,95%CI：1.797～7.143)、高嘌呤飲食(OR=4.011,95%CI：1.439～10.058)、血清ET-1高水平(OR=2.996,95%CI：1.622～6.602)、血清ICAM-1高水平(OR=2.626,95%CI：1.865～7.127)、血清NALP3高水平(OR=2.342,95%CI：1.741～5.806)、血清ApoA1低水平(OR=2.757,95%CI：1.630～6.984)是青年痛風的危險因素(P<0.05)，見表3。

表3 青年痛風的危險因素分析

2.4血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3水平與青年痛風的相關性 根據Spearman相關性分析，將不同類型的青年痛風分別賦值：慢性痛風=1；急性痛風=2。血清ET-1、ICAM-1、NALP3水平與急性痛風相關(r=0.813、0.657、0.663，P<0.05)；血清ApoA1水平與慢性痛風相關(r=-0.356，P<0.05)。

2.5血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3對青年痛風的診斷價值 4個指標對青年痛風的診斷均有一定的準確度，4項指標聯合檢測的AUC>0.5，準確度比單個指標更高。ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3單獨檢測的AUC比較，差異無統計學意義(P>0.05)；4項指標聯合檢測的AUC高于4項指標單獨檢測，差異有統計學意義(P<0.05)，見表4、圖1。

表4 血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3對青年痛風的診斷價值

圖1 血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3診斷青年痛風的ROC曲線

3 討 論

痛風的病理基礎為高尿酸血癥，而高尿酸血癥是心血管疾病的危險因素[9]。痛風的主要誘發因素是飲酒及高嘌呤飲食。目前青年人群的生活、飲食方式發生了顯著改變，高尿酸血癥和痛風的發病年齡在逐漸年輕化。調查發現，高尿酸血癥在男/女童中的發病率分別為8.8%、0.6%[10]。研究顯示，北京某高校新生中男生與女生的高尿酸血癥的患病率分別為34.47%和11.64%[11]。有研究監測了5 896例17～95歲普通人群的尿酸水平，發現25歲及以下男性的平均尿酸水平相對較高[12]。可見痛風不只是中老年人群的常見病，青年人群也受到了該疾病的影響。痛風若不及時診治，可導致痛風性關節炎、腎臟疾病及心血管系統疾病，危害患者健康。因此，早發現、早診斷、早干預對于改善青年痛風患者臨床癥狀、控制疾病發展、減少或預防并發癥意義重大。

ApoA1是載脂蛋白A家族中的重要成員之一，主要在肝臟和小腸中合成，可參與脂蛋白代謝，還可影響脂代謝相關酶活性、炎性細胞之間的相互作用，降低炎性反應程度。ApoA1水平與高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平呈正相關。ApoA1低水平是心肌梗死的危險因素，而ApoA1高水平可能具有保護效應[13]。ApoA1在高尿酸血癥患者血漿中呈低水平，其水平檢測可為后期治療提供參考[14]。本研究顯示病例組血清ApoA1水平顯著低于對照組，這與既往報道相符[15]，提示ApoA1可能參與了青年痛風的發病過程；血清ApoA1低水平可提示青年痛風高風險，其原因可能為高尿酸水平引起血脂水平紊亂，導致血清ApoA1水平異常降低。NLRP3是炎性小體的組成部分，主要表達于單核細胞、巨噬細胞、T細胞等細胞的細胞質內，可調控促炎性細胞因子分泌，調節炎性反應和免疫細胞功能[16]。當炎性反應發生時NLRP3大量釋放，其下游的促炎性細胞因子白細胞介素1β(IL-1β)水平會顯著升高。NALP3與痛風的炎性反應密切相關[17]，IL-1β受體拮抗劑可以改善慢性痛風患者的臨床癥狀，預防降尿酸水平治療過程中的痛風急性發作。本研究提示NALP3在青年痛風患者血清中呈高水平，NALP3高水平是青年痛風的危險因素，這與以往的研究一致[18]。分析其原因，單鈉尿酸鹽晶體作為一個“危險信號”被細胞內模式識別受體識別，導致NALP3炎性小體形成，促使IL-1β前體迅速轉化為成熟的IL-1β，從而誘導青年痛風發生。

ET-1是一種強烈的縮血管肽，由血管內皮細胞(VEC)分泌，可促進細胞外基質合成及細胞增殖，參與缺血、缺氧等情況下VEC損傷過程。ICAM-1是介導人白細胞(WBC)與內皮細胞黏附的重要分子，能夠穩定細胞之間的相互作用，促進內皮細胞的活化和遷移，促進炎癥受損部位的組織粘連。ICAM-1在靜息的VEC中呈低水平表達，而在受損的VEC中呈高水平表達，是血管內皮損傷的重要標志物，與VEC損傷關系密切。本研究顯示，病例組血清ET-1、ICAM-1水平顯著高于對照組，這與郭敏等[19]的研究結果一致，提示ET-1、ICAM-1與青年痛風的發生有關。進一步分析發現，血清ET-1、ICAM-1水平與青年痛風呈正相關，且血清ET-1、ICAM-1水平越高青年痛風發生風險越大。有研究報道，高尿酸血癥是VEC受損的危險因素，當高尿酸血癥發生時，機體局部氧化應激的發生可導致ET-1、ICAM-1水平升高，造成局部血管內皮的炎性損傷，引起NALP3水平上升，同時高尿酸水平引起血脂水平紊亂造成血清ApoA1水平下降[20]，這可能解釋了血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3在青年痛風患者中水平異常的原因。進一步分析得出，血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3聯合用于青年痛風診斷的AUC為0.978，靈敏度為92.70%，特異度為95.00%，準確度為91.69%，提示血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3聯合用于青年痛風診斷具有較高的價值，若患者血清ET-1>77.82 pg/mL、血清ICAM-1>534.44 μg/L、血清ApoA1<0.87 mmol/L、血清NALP3>6.44 ng/mL，則提示青年痛風發生風險較大。此外，與痛風發生、發展有關的指標還有清蛋白、糖類抗原(CA)724、IL-1β、IL-6、IL-8等[21-23]，這些指標參與青年痛風的具體機制有待進一步研究。

綜上所述，血管內皮損傷生物標志物ET-1、ICAM-1聯合ApoA1、NALP3診斷青年痛風的價值較高。