抑郁癥與雙相障礙患者血清可溶性主要組織相容性復合體I類相關基因B水平研究

張同同，胡科，張凱，殷嘉浚，袁建民，王國強

據中國精神衛(wèi)生調查報道，中國抑郁癥和雙相障礙的終生患病率共16.6%，12個月患病率為9.3%，并呈現上升狀態(tài)[1]。抑郁癥的主要特征為顯著持久的心境低落和快感缺失，嚴重者可能會有自殺傾向[2]，而雙相障礙臨床表現重疊或者癥狀不典型，常常導致誤診誤治，對患者的社會功能產生有較大影響[3]。由于抑郁癥和雙相障礙治愈率低且復發(fā)率高，早期識別和有效治療能降低復發(fā)率，因此臨床上需要客觀的生物標記物來鑒別診斷抑郁癥和雙相障礙。

在一項薈萃分析中，Oerlemans等[4]對抑郁癥患者隨訪超過10年，發(fā)現抑郁癥患者比正常人的癌癥患病風險明顯升高，尤其是肺癌。與健康人相比，抑郁癥和雙相障礙患者血液中的一些免疫因子和蛋白質發(fā)生了變化，如白細胞介素(IL-6)、趨化因子(CCL3)、腫瘤壞死因子(TNFR80)等[5]。以往關于腫瘤的研究結果表明，這些免疫因子失活或者蛋白質變性是許多癌癥的啟動和促進因素[6]，腫瘤與抑郁癥和雙相障礙之間是否存在某種關聯性值得我們去研究。

主要組織相容性復合體Ⅰ類相關基因B(MICB)蛋白可以激活細胞毒性淋巴細胞表達的NKG2D(表達于自然殺傷細胞表面的Ⅱ型膜蛋白受體)，然后促進自然殺傷細胞(NK細胞)消滅癌細胞[7]。腫瘤可以通過MICB蛋白分解脫落形成可溶性MICB(sMICB[8]來逃避NKG2D受體介導的腫瘤免疫。研究[9-10]顯示sMICB是一種良好的腫瘤標志物，在惡性腫瘤患者血液中升高如黑色素瘤和乳腺癌。Smith等[11-12]研究提示巨噬細胞誘發(fā)的炎癥反應在抑郁癥及雙相障礙的病理生理機制中起到至關重要的作用。Graham等[13]通過BUHMBOX分析指出，在基因水平上，MICB與抑郁癥的異質性相關，影響情緒障礙的發(fā)展。

本研究團隊動物實驗偶然間發(fā)現，抑郁態(tài)小鼠與正常小鼠血清sMICB水平差異有統(tǒng)計學意義，迄今為止，抑郁癥和雙相障礙患者血清sMICB水平尚未見報道。因此，本研究探索抑郁癥和雙相障礙患者血清sMICB水平的變化及與抑郁癥狀嚴重程度之間的相關性。

1 對象和方法

1.1 對象 患者組(抑郁組和雙相組)為2019年9月至12月在無錫精神衛(wèi)生中心住院1周以內的抑郁癥與雙相障礙患者，對照組為同一時間段在社區(qū)招募的健康人。

抑郁組納入標準：①符合《精神障礙診斷與統(tǒng)計手冊》第五版(DSM-5)對抑郁癥的診斷；②年齡18～75歲，漢族；③無其他符合DSM-5診斷標準的精神障礙；④自愿簽署知情同意書。排除標準：①有嚴重的軀體性疾病或者腦器質性損傷；②女性參與者在研究期間懷孕、打算懷孕以及處于哺乳期。

雙相組納入標準：①符合DSM-5對雙相障礙的診斷，目前處于抑郁發(fā)作；②年齡18～75歲，漢族；③無其他符合DSM-5診斷標準的精神障礙；④自愿簽署知情同意書。排除標準：同抑郁組。

對照組納入標準：①年齡18～75歲，漢族；②無任何精神病發(fā)作史以及精神疾病陽性家族史；③自愿簽署知情同意書。排除標準同抑郁組。

共招募148例被試，其中對照組60名(男25名，女35名)，抑郁組57例(男21例，女36例)，雙相組31例(男11例，女20例)。本研究經南京醫(yī)科大學附屬無錫精神衛(wèi)生中心醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 社會人口學信息收集 采用一般人口學調查問卷，統(tǒng)計參與者的姓名、性別、年齡、病史等基本信息數據。

1.2.2 漢密爾頓抑郁量表(HAMD-24)評估 HAMD-24[14]已在國際上被廣泛使用，它可以更簡潔高效地描述癥狀的嚴重程度和疾病狀態(tài)；所有條目均為正向計分，總分越高，則疾病越嚴重。總分<7分正常;7～17分可能有抑郁癥；17～24分肯定有抑郁癥;>24分嚴重抑郁癥。總分信度系數r為0.88～0.99，效度系數為0.92。HAMD-24由兩名有經驗的臨床醫(yī)師對患者進行精神檢查，采用臨床晤談的方式，檢查結束后，兩名評定者分別獨立評分。

1.2.3 血樣采集與處理 抑郁組和雙相組以及對照組在入組時取清晨空腹肘靜脈血5 ml,然后在半個小時內，使用1000 r/min離心機于20℃室內離心30 min，并立即取出上清液存于4 ℃冰箱保存，在收集所有被試樣本后統(tǒng)一進行酶聯免疫吸附法(ELISA)處理。

1.2.4 血清sMICB濃度測定 按照ELISA試劑盒說明書對收集的血液進行處理檢測sMICB的濃度。該檢測采用了涂布在96孔板上的人類sMICB特異性抗體。將標準品和樣品移入孔中，樣品中的sMICB被固定化的抗體結合到孔中。洗滌孔后加入生物素化的抗人sMICB抗體。洗去未結合的生物素化抗體后，用吸管將HRP結合的鏈霉菌素移至孔中。再次洗滌孔，向孔中加入TMB底物溶液，顏色與sMICB結合量成比例發(fā)展，顏色由藍色變?yōu)辄S色，在450 nm處測量顏色強度，對應的即是sMICB濃度。

2 結果

2.1 各組人口學資料比較 3組被試在性別、年齡、HAMD得分上無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；三組sMICB濃度差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。

2.2 3組血清sMICB水平分析 抑郁組、雙相組和對照組血清sMICB水平差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001)。見表1。兩兩比較顯示，抑郁組與對照組之間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001),雙相組與對照組之間的差異無統(tǒng)計學意義(P=0.174),抑郁組與雙相組間的差異有統(tǒng)計學意義(P=0.005)；經過Bonferroni校正后，得出相同的結果。見表2。

表2 各組血清sMICB水平的多重比較

2.3 臨床效能 以血清sMICB水平115.90 pg/ml為分界值，可以很好地區(qū)分抑郁組與對照組，其中曲線下面積(ROC)為0.733，敏感性和特異度分別為0.733和0.737(P<0.001)，然而血清sMICB水平并不能分辨雙相組和正常組(P=0.291)。此外，sMICB水平還可以用來鑒別抑郁組和雙相組，ROC為0.694，靈敏度為0.645，特異度為0.737(P=0.003)。見表3。

表3 鑒別診斷抑郁癥和雙相障礙的最佳截斷值

2.4 兩患者組血清sMICB水平與HAMD評分的關系 抑郁組和雙相組的血清sMICB濃度與HAMD得分無顯著相關(P均>0.05)。見表4。

表4 抑郁組與雙相組的sMICB濃度與各個量表的相關性

3 討論

本研究探討了抑郁癥和雙相障礙患者血清中sMICB水平與健康人之間的差異，經過比較發(fā)現57例抑郁癥患者與60名健康被試者在sMICB水平上差異具有統(tǒng)計學意義，這與Graham等[13]的研究結果相似。抑郁癥主要是因為腦神經傳遞或者下丘腦-垂體-腎上腺軸的活動出現紊亂導致的，而免疫細胞(巨噬細胞，NK細胞等)分泌的細胞因子銜接這兩種活動[15]，研究表明抑郁癥患者體內的NK細胞比例和絕對值明顯高于健康人[16],在機體自愈的過程中，MICB蛋白在NKG2D的刺激下與高濃度的NK細胞結合，經MICB蛋白水解后形成的可溶性MICB水平就會降低，這可能是抑郁癥患者血清sMICB水平總體低于正常人的原因之一。但是雙相組與正常組在sMICB水平上差異無統(tǒng)計學意義，這可能是因為sMICB在雙相障礙發(fā)病機制中的作用較小，但仍需要進一步研究。

臨床上常用量表來診斷抑郁癥，診斷結果過于主觀，缺少可靠的量化指標。本研究利用ROC分析sMICB診斷抑郁癥風險的價值，發(fā)現AUC為0.733，最佳截斷值為115.90 pg/ml,提示sMICB用于診斷抑郁癥具有可行性。當sMICB濃度低于115.90 pg/ml時，抑郁癥風險顯著增加；而對于sMICB濃度高于115.90 pg/ml，sMICB濃度可能與抑郁癥的發(fā)生無明顯關系。除此之外，使用sMICB水平診斷抑郁癥還具有操作簡便、無創(chuàng)等優(yōu)點，sMICB水平可作為臨床上診斷抑郁癥的指標之一。首次發(fā)作或反復發(fā)作的抑郁癥患者存在很多異質性，極有可能是軟雙相障礙患者。抑郁癥和雙相障礙在疾病診斷過程中有很高的誤診率[17-18]，我們的ROC結果顯示sMICB水平可以很好的區(qū)分抑郁癥和雙相障礙，其中ROC曲線下面積為0.694，靈敏度和特異度分別為0.645和0.737，sMICB水平可作為輔助鑒別抑郁癥和雙相障礙方法之一。

本研究局限性在于樣本量較小，這可能會導致一些偏差，未來可以在更大樣本中驗證這個觀點。除此之外，在未來的研究中可以對同一批患者在治療前后進行對照研究，探討sMICB水平的變化，所得結果可能會支持我們的研究結果。綜上所述，本研究是首次在中國人群中對抑郁癥和雙相障礙患者與正常人之間的sMICB水平差異進行研究。我們的研究表明，sMICB可能是一種潛在的抑郁癥診斷生物標志物。