術前血清TIMP-1、TIMP-2水平與肝切除術后肝功能延遲恢復的相關性研究*

陸 路，黎東明，吳曉勇，王學國，王太成，趙紅巖，李 鵬

海南醫學院第二附屬醫院肝膽胰腺外科，海南海口 570100

肝癌患者多合并慢性疾病，特別是肝切除術后患者易發生肝功能延遲恢復，增加圍術期病死率及術后復發風險，不利于預后[1-2]。基質金屬蛋白酶-1組織抑制因子(TIMP-1)、基質金屬蛋白酶-2組織抑制因子(TIMP-2)已被證實可影響細胞外基質降解，使細胞外基質在組織內過度沉積[3-4]。而細胞外基質的過度沉積是肝纖維化發生、發展的主要因素之一[5]。本研究主要觀察肝癌患者術前血清TIMP-1、TIMP-2水平與肝切除術后肝功能延遲恢復的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2019年12月在本院接受肝切除術治療的61例肝癌患者，全部患者及家屬對此次研究知情，并簽署同意書。(1)納入標準：①組織病理檢查結果確診為原發性肝癌；②意識清醒，可以很好地配合研究的展開；③預計生存時間>3個月。(2)排除標準：①合并心、腎衰竭；②合并其他惡性腫瘤；③合并嚴重傳染性疾病或感染性疾病；④合并免疫系統疾病。61例肝癌患者中男32例，女29例；年齡55～64歲，平均(59.32±2.03)歲；腫瘤最大徑2.1～7.2 cm，平均(5.38±0.42)cm。本研究經本院倫理委員會批準實施。

1.2方法

1.2.1手術方法 全部患者均接受肝切除術治療：全身麻醉后選擇合適切口，根據病變部位、腫瘤大小，充分游離肝周圍的韌帶，鈍性切開肝實質，縫合肝斷面后放置引流，縫合傷口。

1.2.2肝功能延遲恢復評估及分組方法 參照文獻[6]，將術后第1～5天內出現凝血酶原時間>20 s或血清膽紅素>50 μmol/L的患者納入延遲恢復組，其余患者納入正常恢復組。收集兩組患者的一般資料。

1.2.3術前實驗室指標檢測 (1)γ-谷氨酰轉移酶、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶、α-L-巖藻糖苷酶、甲胎蛋白：分別于兩組患者接受肝切除術當天早晨抽取空腹狀態下5 mL外周肘靜脈血，經全自動生化儀(武漢盛世達醫療設備有限公司，BS-450型)檢測；(2)中性粒細胞絕對值(NE)、淋巴細胞絕對值(LY)：分別于兩組患者接受肝切除術當天早晨抽取空腹狀態下4 mL外周肘靜脈血，經全自動血細胞分析儀(南京貝登醫療股份有限公司，BC-5000型)檢測；(3)TIMP-1、TIMP-2：分別于兩組患者接受肝切除術當天早晨抽取空腹狀態下5 mL外周肘靜脈血，經智能型高效離心機[貝克曼庫爾特商貿(中國)有限公司，Avanti JXN-30/26型]，以3 000 r/min的速度離心5 min后取血清，經酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測，試劑盒由合肥萊爾生物科技有限公司提供。

2 結 果

2.1肝功能延遲恢復發生情況 全部61例肝癌患者行肝切除術后，肝功能延遲恢復的患者有7例，延遲恢復率為11.48%(7/61)。

2.2延遲恢復組與正常恢復組一般資料、實驗室指標水平比較 延遲恢復組術前NE及血清TIMP-1、TIMP-2水平高于正常恢復組，LY低于正常恢復組，差異均有統計學意義(P<0.05)。兩組一般資料及其他實驗室指標水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 一般資料、實驗室指標在兩組間比較

2.3肝癌患者術前血清TIMP-1水平與TIMP-2的相關性分析 雙變量Pearson相關分析結果顯示，肝癌患者術前血清TIMP-1水平與TIMP-2水平呈正相關(r=0.308，P=0.016)。見圖1。

圖1 肝癌患者術前血清TIMP-1水平與TIMP-2水平相關性的散點圖

2.4影響肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的二元Logistic回歸分析結果 將肝癌患者術前NE、LY及血清TIMP-1、TIMP-2水平分別作為自變量，術后肝功能恢復情況作為因變量(1=延遲恢復，0=正常恢復)進行分析，結果提示術前NE、LY及血清TIMP-1、TIMP-2水平是肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的影響因素(P<0.05)。見表2。

表2 影響肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的二元Logistic回歸分析結果

2.5血清TIMP-1、TIMP-2檢測預測肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的效能 ROC曲線(圖2)分析結果顯示，術前血清TIMP-1、TIMP-2水平單獨及聯合檢測預測肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的AUC均>0.80，預測價值較理想，且以聯合預測效果最佳。各指標對應的最佳閾值、特異度、靈敏度及約登指數見表3。

圖2 血清TIMP-1、TIMP-2水平單獨或聯合檢測預測肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的ROC曲線

表3 血清TIMP-1、TIMP-2水平單獨或聯合檢測預測肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的效能分析

3 討 論

研究指出，80%～90%肝癌患者合并不同程度的肝硬化，肝硬化可降低患者肝組織的再生能力，進而增加肝切除術后肝功能延遲恢復的風險[7]。還有研究指出，肝切除術后肝功能延遲恢復的患者具有較高的腫瘤復發風險，且術后生存時間顯著縮短，增加術后病死風險，不利于預后[8-9]。為提高患者生存率，臨床應早期評估肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的風險，并給出針對性的建議，指導治療方案的擬定。

張軍等[10]研究指出，肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復發生率為10%～13%，嚴重影響患者預后。本研究納入61例肝癌患者，經肝切除術后發生肝功能延遲恢復的患者有7例，發生率為11.48%，與上述研究結果相近。這表明肝癌患者經肝切除術后存在肝功能延遲恢復的風險，故分析肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的影響因素及可能的風險預測因子，對改善預后意義重大。肝癌的發生、發展與全身或局部炎性反應密切相關，炎性反應的發生可使大量新血管生成，損壞脫氧核糖核酸(DNA)，進而促進肝臟癌變程度進一步發展[11]。NE、LY是常見炎性反應標志物，二者對肝癌肝切除術后肝功能恢復的影響也被本研究證實，簡單分析原因：中性粒細胞可引發炎性反應及疼痛，影響肝組織的凝血功能[12]。淋巴細胞作為體積最小的白細胞，是發揮免疫應答功能的重要細胞，可主導淋巴系統內的大部分免疫功能，通過影響免疫功能，繼而影響肝功能的恢復[13]。但需注意的是，NE、LY具有不穩定性，進而影響研究的可靠性及準確性，故單獨使用二者來評估術后肝功能延遲恢復的發生風險局限性大。

有研究指出，細胞外基質的合成及降解與肝功能密切相關，而在細胞外基質降解過程中起關鍵作用的是基質金屬蛋白酶(MMPs)[14]。作為鋅離子依賴酶，MMPs能夠明顯降低膠原的穩定性，進而為其他蛋白酶的降解創造條件[15]。TIMP-1、TIMP-2已被諸多研究證實是一組能夠明顯降低MMPs活性的多肽，不僅能夠與MMPs非共價結合，降低MMPs活性，還可結合酶原，不利于MMPs活化以及細胞外基質降解，繼而影響肝功能[16-17]。本研究對比延遲恢復組與正常恢復組患者的血清TIMP-1、TIMP-2水平并進行Logistic回歸分析，結果顯示，術前血清TIMP-1、TIMP-2水平是肝癌患者肝切除術后發生肝功能延遲恢復的影響因素，初步提示術前血清TIMP-1、TIMP-2水平與肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復有關。究其原因：正常情況下，基質金屬蛋白酶組織抑制因子(TIMPs)與MMPs共同維護機體穩態[18]。當體內細胞外基質大量生成時，MMPs可通過降解細胞外基質，避免肝組織內細胞外基質過度沉積，降低肝纖維化的發生風險，繼而促進肝功能的恢復[19]。但當體內血清TIMP-1、TIMP-2過表達時，可顯著降低MMPs活性，進而影響細胞外基質的降解過程，加重器官、組織的受損程度，繼而不利于器官功能的恢復[20]。此外，有報道顯示，TIMP-1、TIMP-2還可促進成纖維細胞、內皮細胞等多種細胞增殖，進而為心肌纖維化的發生、發展創造有利條件，不利于預后[21]。

為了進一步明確術前血清TIMP-1、TIMP-2水平與肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的關系，本研究繪制ROC曲線發現，術前血清TIMP-1、TIMP-2單獨及聯合檢測預測肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復的AUC均>0.80，預測價值較理想，且以聯合預測效果最佳。上述結果均證實，術前血清TIMP-1、TIMP-2水平與肝癌患者肝切除術后肝功能延遲恢復有關，可作為肝功能延遲恢復風險的預測指標。此外，本研究還對這兩個血清指標的水平進行變量間的相關性分析，結果顯示，肝癌患者術前血清TIMP-1水平與TIMP-2呈正相關，提示肝癌患者術前血清TIMP-1與TIMP-2可相互影響、相互作用，共同參與了肝癌患者肝切除術后肝功能的延遲恢復，但具體機制尚未明確，且相關研究較少，仍需要在未來進一步開展大樣本、長時間的研究加以驗證分析。

綜上所述，肝癌患者肝切除術后仍有肝功能延遲恢復的風險，可能與患者肝切除術前血清TIMP-1、TIMP-2水平異常有關，臨床可考慮通過術前檢測患者血清TIMP-1、TIMP-2水平來預測患者術后肝功能延遲恢復的發生風險，以指導早期干預，改善患者預后。