血清胃泌素釋放肽前體檢測對小細胞肺癌診斷及預后的臨床價值*

王瑩，連麗麗，許建成

(吉林大學第一醫院檢驗科，長春 130021)

小細胞肺癌(SCLC)是肺癌中侵襲性最強的亞型，約占肺癌的13%～17%[1]。由于早期癥狀不顯著，約70%～75%的肺癌患者確診時已處于晚期，其5年生存率僅為15%[2]。臨床指南推薦采用4～6個周期的化療或根據腫瘤分期聯合放療。然而，在接受有效治療的某些肺癌患者中，影像學觀察到其腫瘤體積變化并不顯著，同時由于輻射暴露及高昂費用，導致無法及時發現復發和/或轉移。因此，為優化疾病管理，臨床上需要更靈敏的血清腫瘤標志物以監測SCLC對治療的反應性并評估其預測價值。

神經元特異性烯醇化酶(NSE)被推薦為SCLC高度敏感和特異的腫瘤標志物[3]。胃泌素釋放肽前體(pro-GRP)作為一種新的腫瘤標志物，其單獨或聯合NSE檢測在SCLC診斷方面的作用引起學者們的廣泛關注。然而，血清pro-GRP對SCLC療效監測價值的研究報道少見。本研究擬探討血清pro-GRP對SCLC診斷及預后的臨床價值。

1 對象與方法

1.1研究對象 選取2018年1月至2021年1月吉林大學第一醫院經病理組織學確診為肺癌的2 584例患者，其中SCLC 132例，男77例，女55例，年齡38～80歲，中位年齡61歲；鱗癌患者1 323例，男609例，女714例，年齡20～79歲，中位年齡59歲；腺癌患者1 129例，男438例，女691例，年齡35～80歲，中位年齡61歲。SCLC納入標準[4]：(1)支氣管鏡活檢、CT引導下的針肺活檢或手術切除標本等均經病理組織學確診；(2)患者入院時未接受任何治療；(3)治療前檢測血清NSE和pro-GRP水平；(4)整個化療過程均在醫院進行，至少隨訪4個月；每例患者每個時間點采集1份血清樣本以分析NSE和pro-GRP水平。(5)腎功能相關指標肌酐、肌酐清除率、尿氮均在參考范圍內。根據實體瘤1.1版療效評價標準[5]，治療療效分為有效組、穩定組和進展患者。化療耐藥定義為SCLC患者一線治療后進展或復發。健康人對照組為同期在吉林大學第一醫院體檢健康者3 606例，男1 900例，女1 706例，年齡19～95歲，中位年齡51歲。肺良性病變組為經CT及臨床明確診斷的肺占位性非惡性病變患者4 174例，男2 120例，女2 054例，年齡19～95歲，中位年齡61歲。本研究經吉林大學第一醫院醫學倫理委員會審核批準(No. 2019-249),患者及家屬知情同意。

1.2儀器與試劑 血清pro-GRP、NSE、CEA、CYFAR21-1、SCC檢測試劑盒及Cobas e601全自動電化學發光分析儀均購自瑞士Roche公司。

1.3標本采集和處理 所有研究對象均于治療前采集空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min離心5 min，吸取上層血清進行檢測。實驗于2 h內完成。

1.4方法 血清pro-GRP、NSE、CEA、CYFAR21-1、SCC測定均采用電化學發光免疫分析法，按照Cobas e601全自動電化學發光分析儀及相應的檢測試劑盒說明書操作及結果判讀。參考區間：pro-GRP 28.3～65.7 pg/mL，NSE 0～18.3 ng/mL，CEA 0～5 ng/mL，CYFAR21-1 0～3.3 ng/mL，SCC 0～2.7 pg/mL。連續測量132例SCLC患者血清pro-GRP和NSE水平的變化，將第1個數據點設為基線水平，作為化療開始前測量基礎值。每個點對應1個化療周期(共檢測21 d)。

2 結果

2.1各組血清腫瘤標志物水平比較 與健康人對照組、肺良性病變組比較，肺癌組血清pro-GRP、NSE、CEA、CYFAR21-1、SCC水平均顯著升高(P<0.05)；此外，肺良性病變組血清pro-GRP、NSE、CEA、CYFAR21-1、SCC水平均顯著高于健康人對照組。見表1。

表1 各組血清腫瘤標志物比較[M(P25，P75)]

2.2不同類型肺癌患者血清腫瘤標志物水平比較 SCLC組與NSCLC組比較，除 CYFAR21-1外，其余各指標間比較差異均有統計學意義(P均<0.05)。腺癌組與鱗癌組血清NSE水平差異無統計學意義(P>0.05)。pro-GRP在SCLC組中的表達水平顯著高于NSCLC組(P<0.05)。見表2。

表2 不同類型肺癌患者血清腫瘤標志物水平比較[M(P25，P75)]

2.3血清pro-GRP和NSE與SCLC患者臨床病理參數關系 隨臨床分期進展，pro-GRP和NSE的表達水平均顯著升高，且廣泛期SCLC中pro-GRP和NSE的表達水平明顯高于局限期(P<0.05)。吸煙者pro-GRP和NSE的表達水平顯著高于非吸煙者(P<0.05)。體重指數(BMI)>26組pro-GRP的表達水平均高于其他組(P<0.05)。pro-GRP和NSE水平在年齡、性別、腫瘤部位間的差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 血清pro-GRP、NSE與SCLC患者臨床病理參數關系[M(P25，P75)]

2.4ROC曲線評估各血清腫瘤標志物對SCLC的診斷價值 以NSCLC患者為對照組，SCLC患者為疾病組，ROC曲線分析結果表明，pro-GRP診斷SCLC的AUCROC(0.976)、敏感性(76.60%)及特異性(99.70%)均高于其他血清腫瘤標志物，5項腫瘤標志物聯合檢測診斷SCLC的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值、總有效率均明顯升高。見圖1及表4。

圖1 5項腫瘤標志物聯合診斷SCLC的ROC曲線

表4 各指標單獨及聯合診斷SCLC的結果

2.5SCLC組血清pro-GRP和NSE水平與預后的符合度分析 連續測量SCLC患者血清pro-GRP和NSE水平的變化，對化療有反應者，在化療第2個周期后血清pro-GRP水平顯著低于基線水平(Z=-8.607,P<0.001)。對于穩定的患者，未觀察到腫瘤標志物顯著波動(Z=-0.221,P>0.05)。在耐藥復發或進展的患者中，疾病進展伴隨pro-GRP和NSE水平升高。對于治療有反應者中，SCLC患者的pro-GRP水平下降幅度更為明顯，對于耐藥復發或進展的患者，pro-GRP水平升高時間比NSE明顯提前。見圖2。

注：A、D對治療有反應的患者(n=68)；B、E疾病穩定的患者(n=14)；C、F病進展的患者(n=50)。

3 討論

SCLC呈異質性，且侵襲性強。目前臨床上多應用中華醫學會肺癌臨床診療指南(2019 版)推薦的檢測肺癌的5種血清標志物——pro-GRP、NSE、CEA、CYFAR21-1、SCC。本研究中SCLC組血清pro-GRP、NSE的表達水平顯著升高，分析原因可能因為SCLC的主要特征是神經內分泌表型，具有胺前體攝取和脫羧系統的特性，可捕獲脫羧兒茶酚胺及前體的羧基，從而促進抗利尿激素和促腎上腺皮質激素的合成，導致許多神經肽表達量增加[6-7]。本研究結果顯示，NSCLC組中CYFAR21-1的表達水平升高，SCLC組和肺腺癌組中CEA的表達水平亦明顯升高。此外，多項研究[8-9]證實，SCC在肺鱗狀細胞癌患者血清中的表達水平升高，且對肺癌具有鑒別診斷作用，在臨床上可輔助病理組織學診斷。

研究表明，肺癌患者的腫瘤分期為SCLC的獨立預后因素[10]。本研究發現pro-GRP和NSE水平隨臨床分期的進展而表達水平升高。廣泛期SCLC患者中pro-GRP和NSE的表達水平明顯高于局限期(P<0.05)。有學者證實，pro-GRP參與肺神經內分泌腫瘤細胞的快速生長，可抑制癌細胞增殖并促進細胞凋亡[11-12]，并可引起不同臨床分期患者中pro-GRP表達水平的差異[13]。NSE作為糖酵解烯醇酶同工酶的一種，主要在神經元和神經內分泌細胞的細胞質中表達，尤其是在胺前體攝取和脫羧中(如垂體、甲狀腺、胰腺、腸和肺)[14]。吸煙為SCLC的主要誘發因素，本研究發現吸煙者pro-GRP和NSE水平顯著高于非吸煙者，與Chen等[15]和Tammem?gi等[16]的研究結果相一致。

此外，本研究還發現，pro-GRP診斷SCLC的敏感性較高，5項腫瘤標志物聯合檢測可明顯提高SCLC診斷的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值和總有效率。一項薈萃分析[17]結果證實，在7 268例SCLC患者中，血清ProGRP的診斷敏感性和特異性分別為75.4%和94.5%，AUCROC為0.910，均與本研究結果相類似。

研究表明，NSE水平可用于評估SCLC患者的預后[18]。pro-GRP作為SCLC潛在靶標[19]，其動態監測可用于評估治療效果。本研究擬驗證pro-GRP水平變化是否可以評估SCLC化療療效，筆者通過連續測定132例SCLC患者的血清pro-GRP和NSE水平的變化，結果發現在對化療有反應者中，血清pro-GRP和NSE水平明顯下降。而對于耐藥復發或進展的患者，pro-GRP水平升高時間比NSE水平變化提前，進一步證實了抑制pro-GRP可抑制細胞增殖，阻止細胞周期進程。

值得注意的是，本研究還發現少部分肺癌患者初診時pro-GRP水平低于25 pg/mL，其他指標水平均在參考區間內，化療后pro-GRP水平的變化較小，且多為微浸潤性腺癌。然而，低表達pro-GRP水平是否與腺癌相關，仍需要進一步研究證實。