臨床標本差異性對微生物檢驗陽性檢出結果的影響

王茜

在臨床當中,微生物檢驗實為其中的關鍵檢驗項目,用途多樣,不僅用作診斷感染性疾病,而且還用于病情評估,能夠為感染類疾病病情評估、疾病診斷及預后預測等,提供準確且可靠依據,但需要指出的是,因微生物有著比較多的種類,以及比較復雜的檢驗步驟,當前所用到的微生物檢驗技術的質量已經難以滿足現實需要,特別是臨床微生物檢驗過程中取樣檢測標本時,仍未能得到規范化,臨床微生物檢驗過程中,通常需要檢驗多種臨床樣本,而臨床樣本不同,其在具體的微生物檢驗結果上,也會存在著比較大的差異［1］。因此,采取切實措施,強化病原微生物檢測工作,提高陽性檢出率,已經成為臨床微生物檢驗工作當中的核心任務。本文圍繞以2018 年8 月～2020 年9 月為時間節點,選取臨床標本,測定其微生物陽性率,然后進行比較,從中剖析陽性檢出率出現差異的主要原因,探討臨床微生物檢驗工作當中所存在的突出問題,以期為感染性疾病控制提供幫助,現就此探討如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年8 月～2019 年8 月在本院進行檢驗的臨床標本7850 份,2019 年9 月～2020 年9 月在本院進行檢驗的臨床標本10609 份。在所有臨床標本當中,9578 份為呼吸道標本,3529 份為腦脊液、胸腹水與血液樣本,954 份為大便標本,4398 份其他非呼吸道標本,包含中段尿、傷口分泌物、穿刺液等。所選取標本在檢測前,均未被污染。

1.2 方法 如痰液樣本,在采集時,需要在清晨完成,叮囑患者把痰液吐在帶蓋容器當中(干燥無菌),采集量≥1 ml；如果是尿液樣本,需要在清晨進行采集,對中段尿液進行采集,采集量為5 ml。在采集血液樣本前,患者需要在采集前一天禁食(6 h),采集清晨采血(肘靜脈血),采集血量為5～10 ml。

把細菌培養標本接種到瓊脂培養基當中,于特定溫度(35℃)下孵育,平板靜置72 h,接種普通肉湯管增菌,于孵育箱(35℃)中靜置48 h,如果沒有細菌生長,便為陰性；若發現存在細菌生長,即陽性。依據《全國臨床檢驗操作規范》,采用VITEK 2 Compact 型全自動細菌鑒定及藥敏分析儀(法國梅里埃公司),依據標準化流程開展各項操作,嚴格控制質量。質控菌株選用銅綠假單胞菌ATCC27853、大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923。

1.3 觀察指標 比較兩個時間段呼吸道、血培養、其他非呼吸道、大便微生物標本陽性率。

1.4 統計學方法 采用SPSS21.0 統計學軟件處理數據。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2018 年8 月～2019 年8 月呼吸 道、血培養、其他非呼吸道標本以及合計樣本陽性率均高于2019 年9月～2020 年9月,血培養標本陽性率低于2019 年9月～2020 年9 月,差異均具有統計學意義(P<0.05)。兩個時間段大便標本比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩個時間段微生物標本陽性率比較［n,n(%)］

3 討論

伴隨信息技術的持續推新與完善,醫學微生物學檢驗技術在此背景下,正在變得越發具有微量化、微機化、自動化,而且還朝向分子生物學領域不斷發展,已經成為當前臨床中診治感染性疾病的重要支撐,特別是傳染性疾病,其應用價值更為凸顯。但需要指出的是,針對微生物檢驗而言,其仍然無法從根本上滿足當前臨床檢驗的各種需求,而在各種原因當中,最主要原因是臨床標本檢驗有著比較低的陽性率。本文分兩個時間段對臨床標本的微生物檢驗陽性率進行比較,從中得知,在這兩個時間段內所收集的臨床標本,有著不同的微生物檢驗陽性率,究其原因,可能與如下因素相關：①采集微生物標本存在不規范情況。有報道［2］指出,之所以會出現實驗結果不符合于臨床診斷的情況,有75%由分析前原因所致,其中,針對分析前原因而言,其主要包含標本運輸、患者準備、檢驗申請及標本采集等,當存在比較多的潛在因素,以及環節比較復雜時,容易出現各種問題。要想從根本上確保分析前質量,需要由醫療機構統一組織、執行。對于臨床科室內工作的醫務人員來講,其無論是對采集標本的基本要求上,還是在所需注意事項上,均存在了解不足的情況,或者是未能嚴格遵照采集標本的基本要求來操作,其最終結果可能會引發標本不合格情況,降低病原微生物的檢測率,或者所檢測對象并非是致病微生物,如此一來,除了難以提供準確的病原信息之外,還會對臨床醫生診治造成誤導。比如大便培養、中段尿培養等,通常情況下,由患者本人對標本自行留取,若護理人員存在解釋不足,或者是宣傳不到位的情況,那么會降低患者正確留取標本的意識,非常容易出現未取到異常標本以及標本量不足等情況,從而降低微生物陽性檢出率。針對微生物檢驗標本來分析,需要在用藥開始前進行采集［3,4］。而對于痰標本,在進行分離、培養操作時,可用綿纖接種方法行此操作。在開展厭氧培養過程中,痰標本需采用標本的氣管穿刺法來進行各項操作；針對尿標本來講,需要通過膀胱穿刺操作來得到；對于大便樣本,盡可能避免與空氣接觸。通過血培養對病原微生物進行檢測,乃是對諸如敗血癥、菌血癥等血液病進行診斷的關鍵依據,但在當前臨床中,在采集血培養標本時,存在采血量少及采血時機不當等情況,比如成年人,其在具體的采血量上,需要在8～10 ml 之間,選擇在發熱高峰前,或者是發病初期進行采集最為合宜［5-7］。②保存、運送微生物標本存在不規范情況。在保存、運送微生物標本時,其基本原則就是對可能被非致病微生物污染的情況進行預防、使病原微生物保持良好的活力等［8,9］。需要強調的是,在檢測微生物標本時,如果其檢測目的不同,那么需要采用與之相匹配的運送、保存方法。比如用厭氧菌進行培養所得到的標本,需運送方法便比較特殊,即需做到即刻送檢,不能與空氣接觸,不然會造成厭氧菌的大量死亡,從而降低陽性率。③檢驗人員缺乏相關經驗。針對臨床微生物檢驗而言,其多需要借助生理學、形態學的生化反應來進行,各步驟均需要有良好的判斷力。所以,工作人員不斷積累個人經驗,豐富基礎知識,尤為重要［10］。可以根據實驗室需要,依據自身實驗條件,編寫詳細且實用的標準操作程序手冊,為全體工作人員工作提供指導。

在本次研究當中,2018 年8 月～2019 年8 月的總陽性率高于2019 年9 月～2020 年9 月,差異具有統計學意義(P<0.05)。但需要指出的是,本次研究未包含人型支原體、真菌學等的陽性報告,一年前,此些項目的陽性率起伏情況對本研究是否會有影響,仍需深究。

綜上所述,檢驗人員需要做好與臨床醫生之間的溝通與聯系,不斷學習新知,豐富自己的專業知識,強化操作技能,促進個人理論水平的提升；此外,還需要不斷改進操作技術,促進微生物檢驗質量的提升,最終達到提升臨床微生物檢驗陽性率的目的,為臨床疾病診治提供可靠依據。