阿司匹林代謝相關基因PEAR1的多態性在河南人群中的分布研究

王米香 周建華 吳干斌南陽醫學高等?？茖W校第一附屬醫院臨床藥學科，河南 473000；鄭州大學第二附屬醫院藥學部，鄭州 45004

阿司匹林目前在臨床中廣泛用于心腦血管病的防治，尤其在經皮冠狀動脈介入治療（PCI）后，其與氯吡格雷聯用成為抗凝治療的基石［1-2］。但是，在實際的臨床實踐中，我們發現患者規律服用阿司匹林后仍不能達到預期的預防栓塞性疾病的目的，也就是所謂的“阿司匹林抵抗”［3］。隨著近年的研究發現，阿司匹林抵抗與血小板內皮聚集受體1（platelet endothelial aggregation receptor-1，PEAR1）的基因多態性具有相關性［4］，因此本課題組擬檢測河南地區人群中的PEAR1基因型，進而發現PEAR1各基因型的分布情況，明確基因型與阿司匹林療效之間的相關性，以期實現阿司匹林藥物使用的個體化，最終達到預期的預防栓塞性疾病的目的，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗儀器與耗材 本試驗中主要用到熒光檢測儀、高速離心機（離心半徑為16 mm）、醫用冰箱、DNA純化試劑盒、醫用乙醇等儀器及設備，除高速離心機為德國進口設備外，其余所用儀器及設備均為國產。

1.2 研究對象 本試驗中所涉及到的研究對象是健康體檢者，統計時間為2019年1月至12月。本試驗制定了嚴格的入選標準和剔除標準，力求入組研究對象身體健康，無慢性病。均為河南籍人員，均簽署知情同意書。入組研究對象共計115名，其中男性69名，女性46名，年齡（40.0±3.5）歲，身高（164.9±6.5）cm，體質量（62.3±3.4）kg。

1.3 基因型檢測過程 按照公司提供的SOP提取DNA，加入相應的試劑盒混勻并與涂片結合，混勻后通過標記寡核苷酸探針對涂片上的染色體進行染色標記，并進行熒光原位雜交檢測，進而分析染色體核型。通過熒光檢測儀檢測熒光信號，最終得出基因分型。

1.4 數據統計分析 進行了Hardy-Weinberg定律的吻合度測驗，對試驗數據采用SPSS 20.0進行統計學分析，計數資料以率表示，行χ2檢驗，正態分布的計量資料以（）表示，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 PEAR1基因分型及其在河南地區人群中的分布頻率 試驗發現PEAR1（rs12041331）共有3種基因型，即AA、GA和GG型，3種基因型及其在不同河南地區人群中的各自分布頻率見表1，等位基因頻率在性別間比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

表1 PEAR1 3種基因型在不同性別河南人群中的分布頻率[例（%）]

2.2 吻合度測驗 將試驗結果進行Hardy-Weinberg定律的吻合度測驗，通過計算檢測符合Hardy-Weinberg平衡定律（χ2=1.24，P=0.362）。

3 討 論

阿司匹林通過不可逆地抑制環氧合酶1（COX-1）和COX-2，從而減少血栓素A2的生成，進而對血小板聚集產生抑制作用。阿司匹林在臨床中應用范圍比較廣。但在臨床中發現有一部分患者即使規律服用阿司匹林，仍不能達到預期的臨床目的，有研究發現“阿司匹林抵抗”在人群中的發生率在5.5%～60.0%之間［3］。阿司匹林抵抗產生的原因很多，諸如患者的依從性差、患者自身的基礎疾病及其病理生理狀況、藥物的相互作用等［1］。隨著藥物基因組學的發展，研究發現阿司匹林抵抗與遺傳因素有很大的關聯性：COX-1、COX-2、ABCB1、PEAR1等基因的多態性與阿司匹林的個體差異有相關性［1，5-7］。

目前對COX-1、COX-2、ABCB1基因多態性的研究較多，因此我們課題組將PEAR1的基因多態性作為突破點，擬檢測河南地區人群中的PEAR1基因型，進而發現PEAR1各基因型的分布情況，明確基因型與阿司匹林療效之間的相關性，以期實現阿司匹林藥物使用的個體化的目的。PEAR1是表達在血小板和內皮細胞上的1型膜蛋白，其磷酸化后，最終會引起血小板之間不可逆的聚集［7］。國內外研究也表明PEAR1（rs12041331）的基因多態性與阿司匹林的療效具有相關性，發現具有突變位點的患者在服用阿司匹林藥物進行抗血小板治療時，達到臨床預期的實現率均大為降低［8-10］。PEAR1（rs12041331）的基因型有3種：AA、GA和GG型，其中AA型對阿司匹林的應答差，GA型對阿司匹林的應答不佳，GG型對阿司匹林的應答好［11］。

本試驗擬檢測河南地區人群中的PEAR1基因型，通過檢測健康人群中PEAR1（rs12041331）的基因型，進而得出各基因型的分布頻率，從而來指導阿司匹林的使用，最終達到個體化應用及降低不良心腦血管事件發生的概率。通過入組和剔除標準的制定，將入組人員的一般資料進行了篩查，在身高、體質量、年齡、性別等方面的差異均無統計學意義。通過試驗得出PEAR1（rs12041331）的3種基因型為AA、GA和GG型，其分布頻率分別為12.17%、46.09%和41.74%，且其在性別間比較，差異均無統計學意義。所得結果與國內文獻報道的12.00%、48.00%和40.00%基本相近［12］。本試驗由于時間緊迫，納入的研究對象數量較少，所研究的指標較少，研究結果有待進一步的確認。此次試驗所得出其在健康人群中的分布頻率后，下一步準備在心腦血管患者中進行試驗，并擴大樣本量，以多維度的觀察指標來研究二者之間的相關性，以期以PEAR1（rs12041331）基因型為導向，進而來指導患者阿司匹林的使用，達到個體化應用的目的。

利益沖突：作者已申明文章無相關利益沖突。