丹皮酚對強直性脊柱炎小鼠跟腱滑膜的影響

鄭家春，熊正罡*，趙洋洋，蔣緒峰

（1.山東大學第二醫(yī)院創(chuàng)傷骨科，山東濟南250033；2.山東大學臨床醫(yī)學院，山東濟南250033）

強直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）是一種慢性的、由免疫介導的炎癥性疾病。AS患者最終殘疾的原因與病理性新骨形成機制密切相關(guān)，韌帶、滑膜骨化以及附近組織纖維化是主要的病理基礎(chǔ)［1］。研究顯示骨化過程受到多種途徑的調(diào)節(jié)，p38MAPK通路不但調(diào)節(jié)細胞的增殖和凋亡，也參與免疫炎性反應(yīng)的調(diào)控［2］，研究顯示p38MAPK會引起腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α為代表的炎性因子的大量表達，最終參與AS［3］。丹皮酚（paeonol,Pae）是在中藥牡丹皮的根皮中鑒定出的藥理活性化合物，最新的研究顯示Pae可以有效的緩解AS模型小鼠的炎性反應(yīng)，并緩解滑膜細胞損傷［4］，但是其具體功效和作用機制尚不清楚。本文主要分析Pae對AS小鼠模型跟腱組織及滑膜組織病理學變化的影響，并通過分析其對p38MAPK信號通路的影響探究作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與分組

48只BALB/c小鼠，雄性，清潔級，（16.2±3.2）周齡，體重（20.3±3.2）g。隨機分為4組，每組12只，分別為正常組、AS組、AS+陽性藥組和AS+Pae組。

1.2 AS模型建立

根據(jù)參考文獻方法建立AS模型［5］，建模方法簡述如下：將100 μl的CFA和100 μl的PG混合，腹腔注射，分別在實驗開始第0、3、6周進行注射，正常組腹腔注射等量的溶劑。

1.3 藥物干預

AS+陽性藥組在第7周使用柳氮磺吡啶（濃度為0.9 mg/ml）灌胃，劑量為 9 mg/（kg· d）。AS+Pae組使用Pae（濃度為0.3 mg/ml）灌胃，劑量為3 mg/（kg·d）。正常組使用溶劑（無菌水）灌胃，每日1次，連續(xù)干預3周。

1.4 檢測指標與方法

1.4.1 ELISA檢測

通過尾靜脈采集血液樣本，將血液樣本2 000 rpm下離心20 min收集上層血清，按照ELISA說明書加入試劑，通過酶標儀檢測吸光度，然后根據(jù)標準曲線計算TNF-α的濃度。……