21 776例女性人乳頭瘤病毒感染情況及亞型分布與宮頸細胞病變的相關性分析

唐鳳祝，簡潔，梁開如，羅劉衡，石艷艷，余紹蘭，周琳琳，左鳳瓊，李婉宜*

宮頸癌是全球女性第四大常見癌癥[1]，2020年新發宮頸癌病例60萬(604 127)，其中近11萬例在中國(109 741)；2020年因宮頸癌死亡病例數34萬(341 831)，其中近6萬例在中國(59 060)[2-3]。人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)持續感染是造成宮頸癌的主要原因。研究發現，宮頸癌患者的HPV感染率可高達99.7%[4-5]。致癌亞型HPV16和HPV18約占全球宮頸癌病例的70%[6]。本研究通過對21 776例女性進行HPV分型檢測，并對其中3 540例患者進行宮頸液基細胞學檢查(thinprep cytologic test，TCT)，了解四川省婦幼保健院門診女性HPV感染率及亞型分布的變化，分析不同HPV亞型與宮頸細胞病變的關系，為降低高級別宮頸病變和宮頸癌的發生率提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選取2013年1月1日至2016年12月31日在四川省婦幼保健院婦科門診部進行HPV檢測的女性作為研究對象，共計21 776例，其中進一步行宮頸TCT檢查的患者3 540例。就診者年齡16～76歲，平均年齡為35.39歲，均有性生活史，所有就診者知情同意，本研究獲得四川省婦幼保健院倫理委員會的同意。

1.2 HPV檢測

刷取宮頸脫落細胞標本，保存于已加細胞保存液的試管中。從含有宮頸細胞的細胞保存液中通過細胞裂解液(Hybribio Ltd，Guangdong，China)提取細胞總DNA。用HPV核酸檢測試劑盒(Hybribio Ltd，Guangdong，China)對21種HPV亞型進行PCR測序以決定分型。擴增條件為：95℃預變性9 min，95℃變性20 s，55℃擴增30 s，72℃延伸30 s，72℃延伸5 min，共40個循環。同時設置陰性對照和陽性對照，以避免假陽性。雜交后，將擴增產物在95℃下加熱5 min，然后冰浴處理2 min。與HHM-2(Hybribio Ltd，Guangdong，China)進行快速分子轉移雜交后，共檢出15種高危HPV(high risk HPV，HR-HPV)(16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68)和6種低危HPV(low risk HPV，LR-HPV)(6、11、42、43、44和81)。

1.3 TCT檢測

用細胞刷收集宮頸脫落細胞，用ThinPrep Pap Test(Thermo Fisher Science，Shanghai，China)進行細胞學檢查?！?br>