炎性指標在糖尿病腎病早期診斷中的價值比較研究

【摘要】 背景 糖尿病腎病是糖尿病常見并發癥之一，已成為終末期腎病的主要病因。肝素結合蛋白（HBP）、C反應蛋白（CRP）、血清淀粉樣蛋白A（SAA）、降鈣素原（PCT）、白細胞計數（WBC）及中性粒細胞百分數均是臨床常見的炎性指標，但上述指標對糖尿病腎病早期診斷價值的比較研究較少。目的 檢測單純2型糖尿病及糖尿病腎病早期患者HBP、CRP、SAA、PCT、WBC及中性粒細胞百分數，比較上述炎性指標對糖尿病腎病早期的診斷價值。方法 選取2020年5—12月在南昌大學第一附屬醫院象湖院區就診的單純2型糖尿病患者32例（DM組）及糖尿病腎病早期患者35例（DKD早期組），選取同期在本院體檢健康、無器質性疾病者30例為對照組（Con組）。采集上述三組受試者空腹靜脈血，其中HBP、CRP、SAA、PCT采用免疫熒光干式定量法進行檢測，WBC及中性粒細胞百分數采用全自動模塊式血液體液分析儀進行檢測。繪制受試者工作特征（ROC）曲線評估HBP、CRP、SAA對糖尿病腎病早期的診斷價值。結果 三組PCT、WBC、中性粒細胞百分數比較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）。DM組HBP高于Con組，DKD早期組HBP、CRP、SAA均高于Con組和DM組（Plt;0.05）。HBP、CRP、SAA診斷糖尿病腎病早期的ROC曲線下面積分別為0.908〔95%CI（0.841，0.975）〕、0.760〔95%CI（0.644，0.875）〕、0.836〔95%CI（0.738，0.934）〕，靈敏度分別為71.4%、48.6%、74.3%，特異度分別為96.7%、96.7%、86.7%，約登指數分別為0.681、0.452、0.610。結論 HBP對糖尿病腎病具有較高診斷價值，適合作為糖尿病腎病早期的預測指標并在臨床推廣使用。

【關鍵詞】 糖尿病腎病；肝素結合蛋白；C反應蛋白質；血清淀粉樣蛋白A；早期診斷

【中圖分類號】 R 587.24 【文獻標識碼】 A DOI：10.12114/j.issn.1007-9572.2021.02.043

吳紅，王斌，李婷，等．炎性指標在糖尿病腎病早期診斷中的價值比較研究［J］．中國全科醫學，2021，24（33）：4206-4210. ［www.chinagp.net］

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Comparative Study of Inflammatory Markers in Early Diagnosis of Diabetic Kidney Disease WU Hong1，WANG Bin1，LI Ting2，NIE Yijun2*

1.Department of Laboratory Medicine，Jiangxi Health Vocational College，Nanchang 330052，China

2.Clinical Laboratory，the First Affiliated Hospital of Nanchang University，Nanchang 330006，China

*Corresponding author：NIE Yijun，Associate chief technician；E-mail：570496717@qq.com

【Abstract】 Background Diabetic kidney disease （DKD），a common diabetic complication，has become a major cause of end-stage renal disease. There are no comparative studies about the values of six inflammatory laboratory markers，heparin binding protein （HBP），C-reactive protein （CRP），serum amyloid A protein（SAA），procalcitonin （PCT），white blood cell count （WBC） and neutrophil percentage （N%），in early diagnosing DKD. Objective To assess the values of six inflammatory markers（HBP，CRP，SAA，PCT，WBC and N%） in early diagnosis of DKD via comparing the levels of them between type 2 diabetic patients and early DKD patients. Methods Participants were selected from Xianghu Branch，the First Affiliated Hospital of Nanchang University from May to December 2020，including 32 with simple type 2 diabetes，35 with early DKD patients and 30 physical examinees with normal examination results and without organic diseases. Fasting venous blood samples were collected for measuring HBP，CRP，SAA and PCT using quantitative immunofluorescence method，measuring WBC and N% using the automated hematology analyzer. ROC analysis was implemented to evaluate the value of HBP，CRP，and SAA in the early diagnosis of DKD. Results There were no significant differences in mean levels of PCT，WBC，and N% among three groups（Pgt;0.05）. The mean level of HBP was increased in simple diabetic patients compared with that of healthy controls. The mean levels of HBP，CRP，and SAA in early DKD patients were significantly higher than those of other two groups（Plt;0.05）. In predicting early DKD，the AUC of HBP was 0.908〔95%CI（0.841，0.975）〕 with 71.4% sensitivity，96.7% specificity and Youden index of 0.681；the AUC of CRP was 0.760〔95%CI（0.644，0.875）〕 with 48.6% sensitivity，96.7% specificity and Youden index of 0.452；the AUC of SAA was 0.836〔95%CI（0.738，0.934）〕 with 74.3% sensitivity，86.7% specificity and Youden index of 0.610. Conclusion HBP has proved to be more effective in diagnosing DKD，which could be promoted clinically as a predictor of DKD.

【Key words】 Diabetic kidney disease；Heparin binding protein；C-reactive protein；Serum amyloid A protein；Early diagnosis

糖尿病腎病（diabetic kidney disease，DKD）是糖尿病（diabetes mellitus，DM）常見并發癥之一，已成為終末期腎病的主要病因。DKD的發病機制是近年來研究的熱點，但其具體機制仍未闡明。炎癥學說認為炎性反應是DKD各階段進展的危險因素之一，DKD是一種炎性疾病［1-3］。同時DKD患者由于長期高血糖伴腎臟功能低下，在病程中也易發生感染（主要包括呼吸道感染、泌尿系統感染、皮膚感染等），在DKD早期明確診斷并進行適當的治療可逆轉蛋白尿及減少終末期腎病的發生［3-4］，因而DKD的早期診斷意義重大。

肝素結合蛋白（heparin binding protein，HBP）作為新型感染標志物近年來備受關注［5-8］。HBP是預先存在于中性粒細胞嗜苯胺藍顆粒和分泌顆粒中的一種蛋白，直接參與炎性反應的調控。C反應蛋白（C-reactive protein，CRP）及血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）均是由肝臟分泌的在機體感染或組織損傷時血漿中一些急劇上升的蛋白質，前者在細菌感染時顯著升高［9］，而后者與病毒感染的關聯更為密切［10］。降鈣素原（procalcitonin，PCT）是降鈣素的前體蛋白，是嚴重細菌感染早期診斷與治療監測指標［11］。白細胞計數（WBC）及中性粒細胞百分數均是常規實驗室檢查指標。雖然上述炎性指標對機體感染具有輔助診斷價值，但尚未見其對DKD早期診斷價值的比較研究，因此本研究通過檢測單純2型糖尿病及DKD早期患者HBP、CRP、SAA、PCT、WBC和中性粒細胞百分數而比較上述炎性指標對糖尿病腎病早期的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年5—12月在南昌大學第一附屬醫院象湖院區就診的單純2型糖尿病患者32例（DM組）及DKD早期患者35例（DKD早期組），選取同期在本院體檢健康、無器質性疾病者30例為對照組（Con組）。收集三組受試者一般資料，包括性別、年齡、體質指數（BMI）。本研究經南昌大學第一附屬醫院倫理委員會批準（批件號：2018016）。納入標準：（1）糖尿病的診斷參照《中國2型糖尿病防治指南（2017年版）》［12］；（2）DKD早期的診斷參照《糖尿病腎病防治專家共識（2014年版）》［13］；（3）受試者及其家屬知曉本研究，且簽署知情同意書；（4）病程lt;5年。排除標準：（1）因嚴重認知障礙和精神疾病無法配合完成檢查者；（2）合并免疫性疾病或嚴重傳染性疾病者；（3）伴嚴重器官功能衰竭者；（4）生命體征及病情不穩定者；（5）合并惡性腫瘤者；（6）合并嚴重感染性疾病者。

單純2型糖尿病是指無任何并發癥的2型糖尿病患者；DKD早期的界定以腎小球濾過率（GFR）為評判指標，30 ml/minlt;GFRlt;100 ml/min為DKD早期［13］。估算腎小球濾過率（eGFR）的計算采用CKD-EPI糖尿病（chronic kidney disease epidemiology collaboration，中國糖尿病CKD-EPI方程）法，計算公式見表1［14］。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器 Jet-iStar3000免疫分析儀（中翰盛泰生物技術股份有限公司），全自動模塊式血液體液分析儀（日本希森美康株式社會），全自動生化分析儀（日本日立7180）。

1.2.2 試劑 檢測HBP、CRP、SAA、PCT所用試劑由中翰盛泰生物技術股份有限公司提供，試劑批號分別為HBP2012001F、CRP2007002F、SAA2009001F、PCT2011001F。全自動模塊式血液體液分析儀及全自動生化分析儀均采用相應配套試劑。

1.3 方法 采集三組受試者空腹靜脈血，其中WBC、中性粒細胞百分數、SAA、CRP采用EDTA-K2抗凝后的全血標本檢測；PCT、葡萄糖、果糖胺及血肌酐（Scr）采用不抗凝的血清標本檢測；HBP采用枸櫞酸鈉抗凝（稀釋比例1∶9）的血漿標本檢測。所有標本檢測在采集后4 h內完成，若不能完成檢測則應在6 h內完成血清或血漿分離（以4 000 r/min的速率離心5 min，離心半徑15 cm），立即置于-20 ℃冰箱保存并在3個月內完成檢測。

HBP、CRP、SAA、PCT均采用免疫熒光干式定量法進行檢測，所用儀器及試劑均來自中翰盛泰生物技術有限公司；WBC和中性粒細胞百分數采用全自動模塊式血液體液分析儀及配套試劑進行檢測；血清葡萄糖、果糖胺及Scr采用全自動生化分析儀進行檢測，操作過程均嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 統計學方法 采用SPSS 13.0軟件進行統計學分析，計量資料采用（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD法。計數資料以相對數表示，組間比較采用χ2檢驗。采用受試者工作特征（ROC）曲線評估HBP、CRP及SAA對DKD早期診斷的應用價值。以Plt;0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較 三組性別、年齡、BMI比較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05），見表2。

2.2 生化指標比較 三組葡萄糖、果糖胺、Scr、eGFR比較，差異均有統計學意義（Plt;0.001），其中DM組和DKD早期組葡萄糖、果糖胺均高于Con組，DKD早期組Scr均高于Con組和DM組，eGFR均低于Con組和DM組，差異均有統計學意義（Plt;0.05），見表3。

2.3 炎性指標比較 三組PCT、WBC、中性粒細胞百分數比較，差異均無統計學意義（Pgt;0.05）。三組HBP、CRP、SAA比較，差異均有統計學意義（Plt;0.001），其中DM組HBP高于Con組，DKD早期組HBP、CRP、SAA均高于Con組和DM組，差異均有統計學意義（Plt;0.05），見表4。

2.4 HBP、CRP及SAA對DKD早期診斷的價值分析 ROC曲線分析結果顯示：HBP診斷DKD早期的ROC曲線下面積（AUC）為0.908〔95%CI（0.841，0.975）〕，截斷值為10.275 μg/L，靈敏度為71.4%，特異度為96.7%，約登指數為0.681；CRP診斷DKD早期的AUC為0.760〔95%CI（0.644，0.875）〕，截斷值為2.105 mg/L，靈敏度為48.6%，特異度為96.7%，約登指數為0.452；SAA診斷DKD早期的AUC為0.836〔95%CI（0.738，0.934）〕，截斷值為5.350 mg/L，靈敏度為74.3%，特異度為86.7%，約登指數為0.610，見圖1。

3 討論

DKD是糖尿病患者常見且嚴重的并發癥之一，若發展為終末期腎病則是導致糖尿病患者死亡的主要原因［3-4］。DKD的病因和發病機制涉及諸多因素，但在細胞和分子水平上對其病因學進行深入探究后發現：炎性反應是其重要病理生理機制。炎性反應不僅是糖尿病引起的并發癥，也可促進其并發癥的發生發展，同時此炎性反應具有慢性、輕微等特征，有學者稱之為“微炎癥”狀態［1-3］。

1991年FLODGAARD等分別從人和豬的多形核白細胞顆粒中分離出具有極強肝素結合能力的蛋白，并將其命名為HBP［5］。HBP是預先存在于中性粒細胞嗜苯胺藍顆粒和分泌顆粒中的一種蛋白。一旦機體發生感染，菌體本身或細菌釋放的毒素進入血液循環會刺激體內中性粒細胞釋放HBP［6-8］。小鼠體內研究證實HBP可通過增加上皮細胞通透性導致小鼠肺損傷及腎臟血管出血；隨著HBP的升高其腎臟細胞的通透性逐步增加并導致腎組織水腫，進而改變腎小球的濾過及腎小管的功能［15-16］，抑制HBP的表達又可減輕急性腎損傷的嚴重性。以上研究結果表明HBP的分泌不僅與機體炎性反應存在關聯，而且可能還與腎臟功能的損傷存在一定的關聯。本研究發現：HBP在DM組中較Con組升高，在DKD早期患者中又較DM患者明顯升高，表明HBP對DM及DKD早期診斷具有特異且敏感的特征，與以上文獻報道相符。DM及DKD均具有慢性低度炎癥特點，因此中性粒細胞可能通過分泌或釋放HBP參與這些微炎癥，同時HBP升高還可能改變上皮細胞通透性，從而加劇腎臟損傷，呈現GFR降低的同時HBP也逐漸升高。

CRP是由肝臟分泌的一種非特異性炎性標志物，可直接參與炎癥、動脈粥樣硬化等心血管疾病，近年研究發現CRP與糖尿病及其大血管并發癥的發生和發展相關［9］，同時還可預測糖尿病未來發生風險及評估臨床治療效果［17］。SAA是一種由肝細胞產生后被分泌到血清中的一種急性時相蛋白，主要參與脂質代謝、炎癥防御及免疫應答。研究發現SAA在DKD發病過程中發揮著重要作用。DKD患者和大鼠模型腎臟組織免疫組化染色可見SAA在腎小球和小管間質中廣泛沉積［18］，同時SAA不僅與晚期DKD患者死亡密切相關，還可預測早期DKD患者進展至終末期腎病的風險［19］。PCT是由甲狀腺濾泡旁細胞（C細胞）以及肺和小腸的神經內分泌細胞分泌的一種生物標志物，血清PCT水平與感染性疾病密切相關，可作為人體細菌性感染的生物標志物，在判斷細菌性感染嚴重程度及預后、評價抗感染療效、指導抗菌藥物應用等方面均有較高的臨床價值［20］。WBC及中性粒細胞百分數是臨床常規檢測指標，雖然可為臨床診斷感染提供參考依據，但由于其易受個體差異、情緒、運動、氣候及外界環境等因素的影響，同時其參考范圍較為寬泛，致使部分感染患者早期變化并不明顯，且缺乏特異性，因此其對臨床醫生提供準確的預測信息價值較為有限。本研究發現：DKD早期患者CRP與SAA高于DM患者和健康對照者，表明CRP與SAA可能參與了DKD的發病過程；PCT、WBC及中性粒細胞百分數在三組受試者中無明顯差異，可能是由于糖尿病處于低度慢性炎癥狀態，而DKD處于“微炎癥”狀態，所以PCT、WBC及中性粒細胞百分數這些炎性指標未出現明顯差異，在DKD早期診斷中無臨床應用價值。

本研究還進一步通過ROC曲線對HBP、CRP及SAA對DKD早期的診斷價值進行了比較，發現上述三種指標的AUC分別為0.908、0.760、0.836，靈敏度分別為71.4%、48.6%、74.3%，特異度分別為96.7%、96.7%、86.7%，約登指數分別為0.681、0.452、0.610。由此可見HBP較CRP及SAA具有更優的綜合診斷價值。因此認為HBP對DKD具有較高的早期診斷價值，適合作為早期預測指標并在臨床推廣使用。

本研究尚存在一定局限性：樣本為單中心來源，且樣本量較小，可能造成研究結果存在一定的偏倚。HBP、CRP、SAA與DKD患者早期診斷及預后的關系有待多中心及大樣本量研究進一步證實。

作者貢獻：吳紅、聶益軍進行文章的構思與研究的設計，研究的實施與可行性分析；李婷進行數據收集；王斌進行數據整理，統計學處理；吳紅進行結果的分析與解釋，撰寫論文；聶益軍進行論文的修訂，負責文章的質量控制及審校，對文章整體負責，監督管理。

本文無利益沖突。

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（收稿日期：2021-06-15；修回日期：2021-08-03）

（本文編輯：賈萌萌）