濕熱質大鼠血液流變特性的研究

徐藝箏，鄒 明

(四川省骨科醫院，四川 成都 610041)

中醫體質較早見于《皇帝內經》，從陰陽、氣血、津液虛實盛衰，體質的能量虧虛、病理產物相關等不同方面強調不同體質與不同的環境因素有關，與疾病的發生、發展有密切關系。現今以王琦九種中醫體質分類最具代表性，其認為體質是一種客觀存在的生命現象，在先天遺傳和后天獲得的基礎上，表現出的形態結構、生理機能以及心理狀態等方面綜合的、相對穩定的特質[1]。濕熱質為常見偏頗體質之一，在人群中比例較高[2，3]。其形成因素主要有先天稟賦、久居濕地、嗜食肥甘、長期飲酒等[1]。隨著氣候、生活水平等變化，越來越多的人過食肥甘厚膩，嗜好煙酒，情緒緊張，出現形盛體實，濕熱蘊積，但目前對體質的評判主要依據主訴、四診等來收集信息，存在主觀、隨意的缺點[4]，尚未建立客觀有效指標。本文參考中醫體質的成因，以脾胃濕熱實驗動物造模方法進行造模[5～7]，觀察其血液流變學變化，以發現界定濕熱質方便快捷的實驗指標。

1 材料與方法

1.1 動物分組與造模于2014年12月至2016年9月選擇4周齡SPF級SD雄性大鼠16只，購于四川省達碩生物技術有限公司，許可證編號：SCXK(111)2013-24。采用隨機數字表法將其分為濕熱質組和對照組各8只，兩組基礎體重、體溫、腹圍、體長無差異，分籠飼養。對照組在自然環境下普通飼料喂養。濕熱質組大鼠參考中醫濕熱質成因，通過增加動物生活環境的溫度和濕度，制造“外濕”；過食肥甘的方法損傷脾胃，阻礙運化，制造“內濕”，復制濕熱質動物模型[7]。采用普通標準顆粒飼料中混入12%豬油，8%蜂蜜制作高脂高糖飼料，飼養10天后，放入人工氣候箱內，其濕熱環境為溫度(32±2)°，相對濕度(95±2)%，仍用高脂高糖飼料喂養每日飼養10 h，進行造模。鼠糧投放時間為每日早8：30至晚18：30。飲用水(本院純凈水)始終足量供應。造模干預時間為28 d，依據方肇勤的方法[6]判斷并成功造模。

1.2 方法造模完成后，用10%水合氯醛按0.15 ml/100 g對大鼠進行腹腔注射麻醉，心臟穿刺取血。乙二胺四乙酸二鉀(EDTA.2k)抗凝管采集2 ml全血，2小時內使用日本希森美康XN1000血細胞計數儀進行全血細胞計數測定，獲得紅細胞(RBC)、血紅蛋白(HGB)、平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均血紅蛋白量(MCH)、平均紅細胞體積(MCV)、紅細胞壓積(HCT)及紅細胞分布寬度(RDW-CV)。肝素抗凝管采集全血4 ml，4小時內使用北京賽科希德SA-6000血流變儀進行血液流變學指標測定，獲得切變率(1/s)為1(rt1)、5(rt5)、50(rt50)、100(rt100)、200(rt200)的全血粘度，血漿粘度(xjnd)、全血高切相對指數(gqxd)、全血低切相對指數(dqxd)、全血低切還原粘度(dqhy)、全血高切還原粘度(gqhy)、紅細胞聚集指數(hjj)、紅細胞剛性指數(hgx)、紅細胞變形指數(htk)。每7 d觀察1次大鼠體表特征，測量1次大鼠體重、攝食量、飲水量、抓力，體溫及抓力，于28天造模結束后比較兩組結果差異。體溫以測定大鼠肛溫表示，連續測2次，取平均值。抓力測試方法為將抓力測試儀水平放置，大鼠輕輕放在抓力板上，抓住鼠尾輕輕往后拉，帶大鼠抓牢抓力板后均勻用力后拉，直到大鼠松爪，記錄大鼠最大抓力，重復測量3次，每次間隔30秒，取3次平均值。每日測量剩余食/水量，食/水量均值=(投放量-剩余量)/大鼠只數。

1.3 統計學方法采用SPSS 17.0軟件進行數據統計分析。正態分布的計量資料以均數±標準差表示，組間數據比較采用獨立樣本t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組主要癥狀及體征比較濕熱質組大便有時稀溏、有時濕便有黏液；小便黃濁；毛色發暗雜亂、頸背部毛色發紅；外陰紅腫；尾巴肛門骯臟；舌質暗紅，舌苔厚膩；腹部脹滿；肛門周圍臟；應急排便。而對照組舌質粉紅；舌苔淡白；活躍；毛色白亮、整潔；反應靈敏；大小便正常。濕熱質組飲食、飲水量、抓力較對照組減少，體重及體重增幅較對照組高；兩組體溫、腹圍和體長比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組主要癥狀、體征變化比較

2.2 兩組血液流變指標變化濕熱質組低切全血粘度rt1、rt5、hjj、dqhy高于對照組(P<0.05)，hgx、htk較對照組明顯降低，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 濕熱質與對照組血液流變學指標比較

項目濕熱質組對照組tPgqxd3.59±0.623.99±0.28-1.6620.119dqxd31.48±10.0829.24±1.920.6150.549hjj8.13±0.907.35±0.372.2850.037dqhy(mPa.S)90.42±12.2980.05±5.192.1990.045gqhy(mPa.S)7.81±0.788.46±0.61-1.8530.085hgx6.31±1.357.57±0.79-2.2840.038htk0.97±0.111.07±0.06-2.3450.034

2.3 兩組血常規指標變化濕熱質組MCHC、MCH較對照組明顯下降(P<0.05)，RBC、HGB、HCT、MCV、RDWSD兩組比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 濕熱質組與對照組血液學指標比較

3 討論

濕熱質在偏頗體質中居于前三位[2，3]，約占正常人群的 9.88%[8]，濕熱之邪，不但可由外而感，且可自內而生。濕熱質大鼠，大便有時稀溏、有時濕便有粘液、毛色發暗雜亂、舌質暗紅、舌苔厚膩等體征與王琦等[2]對人體的研究一致。而呂冠華等通過給予實驗大鼠高脂高糖飲食，損傷大鼠脾胃，發現在短期內濕熱大鼠體重增加，飲食減少，精神萎靡，也與本研究一致。高脂高糖飲食過量攝入，干擾了機體正常的糖、脂代謝，使得大鼠體重明顯增加，出現肥胖之體，祖國醫學素有“肥人多濕”的觀點，而脂質代謝與氣血津液的運行和代謝過程密切相關[9]，肥胖者因為其機體聚集濁脂，影響臟腑經脈，妨礙氣血運行，甚至影響臟腑功能[10]。大鼠高脂高糖的飲食使得能量代謝異常，內生濕熱，而濕濁內生，郁而化熱，濕熱質與體重具有較強的關聯性，其濕熱內蘊[11，12]，多形體偏胖。脾胃虛弱為濕熱前提[5]，過食肥甘致脾胃損傷，使得水谷精微難以生成精血，氣血津液失于運化，致濕熱質大鼠乏力，抓力下降。而體溫、腹圍和體長等體征也與呂冠華等[5]研究一致。

濕熱質者血脂代謝紊亂的概率高[13]，為血脂異常的危險因素[9，14]。濕熱質大鼠攝入過多脂質，可使大鼠體內脂質增加，誘發脂質過氧化及生成自由基中間物，進而破壞內皮的完整性損傷血管內皮[15]，引起血管擴張功能減弱，血管可痙攣或狹窄，血流阻力增加而致全血粘度增加。濕熱質大鼠通過高脂飼料喂養，終使紅細胞膜的液態特性的脂質雙層受到影響，膜的力學性質改變，膜流動性下降，變形性(htk)下降，與熊延連等[16]發現脂質過氧化對紅細胞變形性的研究一致。而變形性好壞又決定了血液的流動性，變形性降低，血液流動性變小，可使紅細胞的微粘度增加，影響氧的彌散，又進一步降低紅細胞變形性。加之攝入過多脂質，使血液脂質濃度增加，增加了血液粘度。Htk受紅細胞內粘度影響非常大，而紅細胞內粘度受MCHC、MCH的影響[17]，濕熱質大鼠MCHC、MCH的降低，表明其紅細胞內粘度增加，變形性下降。Htk還受hgx的影響，hgx越大，紅細胞硬化程度越高，紅細胞變形性越差。但濕熱質大鼠hgx下降，與羅超等[18]對剛性指數與變形指數的研究不一致，可能與濕熱質大鼠對外濕環境的適應性改變有關。

濕熱質大鼠在濕度和溫度增加的外濕條件下生活，可通過對外界的適應性反應，代謝和激素水平等內環境發生相應改變。其紅細胞變形能力減低，血流變慢，流量減少，影響組織和器官的血液供應，使紅細胞在微血管易于瘀積。濕熱質大鼠hjj明顯增加，表明紅細胞聚集性增加，可使低切變率全血粘度增加，致紅細胞運送氧的能力受影響，紅細胞通過微循環障礙，進一步減小微循環血流灌注，造成組織缺血缺氧，使得紅細胞內粘度增高，影響變形性。而組織缺血缺氧可影響局部pH值的變化，使毛細血管通透性增加，血漿滲出，微血管中血液濃縮，可影響機體HCT，而HCT是影響血液粘度的主要決定因素，在濕熱質大鼠中，其HCT、RBC等均未有明顯改變，但濕熱質大鼠經HCT校正后的dqhy卻明顯增加，表明機體低切變率全血粘度明顯增加主要受到hjj、hgx、htk、MCHC、MCH對紅細胞變形性和聚集性的影響，與大鼠過食高脂高糖肥甘食物及在一定溫度和濕度的環境中生活的“內外濕”有關。濕熱質大鼠紅細胞變形性降低，聚集性增加又進一步使血液粘度增高，形成惡性循環，使得全身或局部血液循環和微循環受到影響，加重組織器官缺血缺氧，引起新陳代謝和生理功能障礙，致濕濁內停、血行滯澀，機體產生濕熱等病理物質而留滯不去，久而久之在人體內蓄積，血液濕性重濁黏滯，又與熱相合，則膠結難解影響機體健康。

綜上所述，祖國醫學在疾病治療中強調標本兼治，突出辨體論治，治人即“治體”，辨識體質在疾病診療中極為重要。濕熱質大鼠血液流變特性異常是在實驗室極易獲得的測試指標，可作為識別中醫濕熱體質定量、客觀判斷的早期輔助指標。但本課題研究是在動物模型中進行，尚需在大樣本的人群中觀察后進行臨床應用。