恒清Ⅱ號(hào)方聯(lián)合鹽酸多奈哌齊對(duì)阿爾茨海默病患者的療效及其作用機(jī)制

孟勝喜

上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院中醫(yī)科，上海 200233

阿爾茨海默病（AD）是一種進(jìn)行性神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病[1-2]，以記憶和認(rèn)知功能障礙、行為及人格異常改變?yōu)橹饕R床表現(xiàn)[3]。恒清Ⅱ號(hào)方是本課題組長(zhǎng)期臨床防治AD 療效確切的驗(yàn)方，在前期做過大量相關(guān)的臨床研究，已經(jīng)驗(yàn)證了恒清Ⅱ號(hào)方對(duì)于AD 具有顯著的療效[4]，且已申請(qǐng)專利（專利號(hào)：201910371018.5）。本研究旨在探討恒清Ⅱ號(hào)方對(duì)AD 患者的作用及其機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年1 月—2019 年1 月在上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）就診的AD患者為研究對(duì)象。診斷標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)2011 年美國(guó)國(guó)家衰老研究所和阿爾茨海默病學(xué)會(huì)發(fā)布的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]（即NIA-AA 診斷標(biāo)準(zhǔn)）進(jìn)行診斷。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合AD 診斷標(biāo)準(zhǔn)；年齡45～75 歲；知識(shí)水平可以配合完成量表，患者及監(jiān)護(hù)人同意參加研究并簽署知情同意書；近3 個(gè)月未參加其他治療方案。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重心、腦、腎等器質(zhì)性疾病或者精神障礙、抑郁癥等不能配合檢查；依從性、耐受性差，不配合治療；對(duì)本研究所采用藥物過敏。該研究已經(jīng)通過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。最終納入110 例AD 患者，采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分為治療組與對(duì)照組，每組55 例。其中治療組有1 例因未完成療程而退出，對(duì)照組有2 例因耐受性差而退出，故完成該研究共107 例。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），具有可比性。見表1。

1.2 方法

基礎(chǔ)治療：兩組均根據(jù)患者基礎(chǔ)病變給予相應(yīng)的降壓、控制血糖、降脂、抗血小板聚積等，同時(shí)指導(dǎo)讀書、看報(bào)等活動(dòng)，進(jìn)行適當(dāng)體育鍛煉，改善睡眠，調(diào)節(jié)情志和飲食等。

表1 兩組一般資料比較

對(duì)照組：在基礎(chǔ)治療的基礎(chǔ)上給予鹽酸多奈哌齊片商品名：安理申，衛(wèi)材（中國(guó)）藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20 050978；批號(hào)：1705080，規(guī)格：5 mg/片治療，起始劑量5 mg/d，晚上臨睡前口服，4 周后可增至最大劑量10 mg/d。

治療組：在基礎(chǔ)治療的基礎(chǔ)上給予恒清Ⅱ號(hào)方聯(lián)合鹽酸多奈哌齊治療，恒清Ⅱ號(hào)方組成：益智仁30 g、黃芪15 g、菟絲子10 g、川芎10 g、熟地黃15 g、桑寄生10 g、煅石決明10 g、杜仲10 g、地龍10 g、天麻10 g、鉤藤10 g。我院中藥房提供，水煎250 mL，（其中地龍研磨成粉，加入湯劑沖服），早晚分服，日1 劑；鹽酸多奈哌齊治療方法同對(duì)照組。兩組療程均為3 個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 AD 評(píng)定量表認(rèn)知部分（ADAS-cog）評(píng)分 由12 個(gè)條目組成，評(píng)分范圍0～75 分，評(píng)分越高，表明認(rèn)知受損越重[6]。ADAS-cog 總量表的Cronbach’s α 系數(shù)為0.90，各維度的Cronbach’s α 系數(shù)為0.75～0.91，總量表ICC 值為0.98，各維度的ICC 值也均在0.90 以上（P ＜0.01）。總量表平均內(nèi)容效度（S-CVI/AVe）為0.98，各條目?jī)?nèi)容效度指數(shù)（I-CVI）為0.80～1.00。日常生活功能量表（ADL）評(píng)定量表[7]：包括軀體生活自理量表（共6 項(xiàng)）和工具性日常生活能力量表（共8 項(xiàng)）。ADL 總量表的Cronbach’s α 系數(shù)為0.91，各維度的Cronbach’s α 系數(shù)為0.73～0.90，總量表ICC 值為0.97，各維度的ICC 值也均在0.90 以上（P ＜0.01）。S-CVI/AVe 為0.97，各條目I-CVI 為0.82～1.00。蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估量表（MoCA）[8]評(píng)分：包括8 個(gè)認(rèn)知領(lǐng)域的11 個(gè)檢查項(xiàng)目，總分30 分。MoCA 評(píng)分總量表的Cronbach’s α 系數(shù)為0.92，各維度的Cronbach’s α 系數(shù)為0.76～0.90，總量表ICC 值為0.97，各維度的ICC值也均在0.91 以上（P ＜0.01）。S-CVI/AVe 為0.97，各條目I-CVI 為0.81～1.00。神經(jīng)精神科問卷（NPI）[9]評(píng)分：NPI 量表對(duì)精神癥狀涉及面較廣，常被用于評(píng)價(jià)藥物對(duì)精神癥狀的療效。NPI 總量表的Cronbach’s α系數(shù)為0.91，各維度的Cronbach’s α 系數(shù)為0.76～0.90，總量表ICC 值為0.97，各維度的ICC 值也均在0.90 以上（P ＜0.01）。S-CVI/AVe 為0.96，各條目ICVI 為0.81～1.00。簡(jiǎn)易智能量表（MMSE）[10]評(píng)分：包括時(shí)間定向力、地點(diǎn)定向力、即刻記憶、注意力及計(jì)算力、延遲記憶、語(yǔ)言、視空間等7 個(gè)方面，共30 項(xiàng)題目。MMSE 總量表的Cronbach’s α 系數(shù)為0.90，各維度的Cronbach’s α 系數(shù)為0.75～0.90，總量表ICC 值為0.96，各維度的ICC 值也均在0.90 以上（P ＜0.01）。S-CVI/AVe 為0.96，各條目I-CVI 為0.83～1.00。以上量表均于治療前后由主治醫(yī)師以上的醫(yī)生分別記錄。

1.3.2 血清Aβ 前體蛋白（APP）、β 淀粉樣蛋白1-42（Aβ1-42）、胱抑素C（Cys C）、同型半胱氨酸（Hcy）、白細(xì)胞介素-1（IL-1）、IL-6 和IL-10 水平測(cè)定 分別于治療前后采集患者晨起空腹靜脈血15 mL，4℃低速離心并取上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清APP、Aβ1-42水平，試劑盒購(gòu)于武漢博士德生物有限公司，APP 試劑盒批號(hào)：EH0110，Aβ1-42試劑盒批號(hào)：MB10425。采用免疫層析法檢測(cè)兩組患者Cys C水平，高效液相色譜法測(cè)定Hcy 水平，試劑盒由武漢明德生物科技股份有限公司提供，Cys C 試劑盒批號(hào)：CSB-E08384h，Hcy試劑盒批號(hào)：DG10150H。采 用ELISA 方法檢測(cè)患者血清中IL-1、IL-6 和IL-10 含量，其中ELISA 試劑盒購(gòu)自美國(guó)R&D 公司。IL-1 試劑盒批號(hào)：bs-4947P，IL-6 試劑盒批號(hào)：PR15098，和IL-10 試劑盒批號(hào)：MO15147。以上檢測(cè)均嚴(yán)格按照說明書規(guī)范進(jìn)行操作。

1.3.3 不良反應(yīng) 觀察兩組患者治療過程中不良反應(yīng)發(fā)生情況，比較其不良反應(yīng)發(fā)生率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分率表示，組間比較采用χ2或連續(xù)性校正χ2檢驗(yàn)；應(yīng)用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)進(jìn)行條目間的區(qū)分度檢測(cè)。信度檢驗(yàn)：運(yùn)用Cronbach’s α 系數(shù)分析內(nèi)部一致性，ICC 值分析重測(cè)信度；效度檢驗(yàn)：采用CVI 評(píng)價(jià)其內(nèi)容效度。以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后ADAS-cog、ADL、MoCA 評(píng)分比較

治療后兩組ADAS-cog 評(píng)分均低于治療前，ADL、MoCA 評(píng)分高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05 或P ＜0.01）；治療后，治療組的ADAS-cog 評(píng)分均低于對(duì)照組，ADL、MoCA 評(píng)分高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05）。見表2。

表2 兩組治療前后ADAS-cog、ADL、MoCA 評(píng)分比較（分，±s）

表2 兩組治療前后ADAS-cog、ADL、MoCA 評(píng)分比較（分，±s）

注：與本組治療前比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01。ADAS-cog：阿爾茨海默病評(píng)定量表認(rèn)知部分；ADL：日常生活功能量表；MoCA：蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估量表

2.2 兩組治療前后NPI、MMSE 評(píng)分比較

治療后兩組NPI 評(píng)分下降、MMSE 評(píng)分升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05 或P ＜0.01）；治療后，治療組NPI 評(píng)分低于對(duì)照組、MMSE 評(píng)分高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05）。見表3。

2.3 兩組治療前后血清APP、Aβ1-42水平比較

治療后兩組APP、Aβ1-42水平均低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05 或P ＜0.01）；治療后，治療組的APP、Aβ1-42水平均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05）。見表4。

表3 兩組治療前后NPI、MMSE 評(píng)分比較（分，±s）

表3 兩組治療前后NPI、MMSE 評(píng)分比較（分，±s）

注：與本組治療前比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01。NPI：神經(jīng)精神科問卷；MMSE：簡(jiǎn)易智能量表

2.4 兩組治療前后血清Cys C、Hcy 水平比較

治療后兩組Cys C、Hcy 水平均低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05 或P ＜0.01）；治療后，治療組Cys C、Hcy 水平均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05）。見表5。

表4 兩組治療前后血清APP、Aβ1-42水平比較（pg/mL，±s）

表4 兩組治療前后血清APP、Aβ1-42水平比較（pg/mL，±s）

注：與本組治療前比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01。APP：血清Aβ 前體蛋白；Aβ1-42：β 淀粉樣蛋白1-42

表5 兩組治療前后血清Cys C、Hcy 水平比較（±s）

表5 兩組治療前后血清Cys C、Hcy 水平比較（±s）

注：與本組治療前比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01。Cys C：胱抑素；Hcy：同型半胱氨酸

2.5 兩組治療前后炎癥細(xì)胞因子水平比較

治療后兩組IL-1、IL-6 及IL-10 水平均低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05 或P ＜0.01）；治療后，治療組IL-1、IL-6 及IL-10 水平均低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05）。見表6。

2.6 兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較

對(duì)照組出現(xiàn)頭暈1 例，頭痛1 例，惡心1 例，總不良反應(yīng)率為5.66%；治療組出現(xiàn)頭暈1 例、頭痛1 例，總不良反應(yīng)率為3.70%；兩組總不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.357，P=0.236）。

3 討論

AD 在中醫(yī)學(xué)中屬“呆病”“善忘”等范疇。腎虛血瘀是本病的病機(jī)特點(diǎn)，腎虛為本，血瘀為標(biāo)，本虛標(biāo)實(shí)。恒清Ⅱ號(hào)方由益智仁、黃芪、菟絲子、川芎、熟地黃、桑寄生、石決明、杜仲、地龍、天麻、鉤藤等11 味藥物組成。全方共起著補(bǔ)腎益氣、固精生髓的作用。髓海得以充養(yǎng)，神智得以恢復(fù)，從而治療AD。現(xiàn)代藥理研究，恒清Ⅱ號(hào)方的組成藥物對(duì)學(xué)習(xí)記憶能力、神經(jīng)細(xì)胞損傷等方面具有改善作用[11-22]。

表6 兩組治療前后炎癥細(xì)胞因子水平比較（ng/L，±s）

表6 兩組治療前后炎癥細(xì)胞因子水平比較（ng/L，±s）

注：與本組治療前比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01。IL：白細(xì)胞介素

AD 患者大腦內(nèi)的一個(gè)主要病理學(xué)特征就是神經(jīng)元外淀粉樣斑沉積，而淀粉樣斑的主要組成成分就是β 淀粉樣蛋白（Aβ）[23-25]。Aβ 由APP 通過β-分泌酶和γ-分泌酶切割產(chǎn)生[26]。Aβ 異常堆積形成的老年斑（SP）是AD 的主要病理。Aβ1-42具有很強(qiáng)的聚集能力，神經(jīng)毒性大，是SP 的主要成份。Cys C 與AD 有關(guān)，是血管性認(rèn)知功能障礙的危險(xiǎn)因素[27]。高血漿Hcy 濃度可能會(huì)引起AD 的發(fā)生[28]。炎癥反應(yīng)在AD 的發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用，AD 患者腦內(nèi)Aβ 沉積，Aβ 斑塊周圍有炎癥細(xì)胞表達(dá)和膠質(zhì)細(xì)胞激活，后者可介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，誘導(dǎo)Aβ 產(chǎn)生，進(jìn)一步促進(jìn)AD 發(fā)生發(fā)展。IL-1在炎癥反應(yīng)中是主要的早期致炎細(xì)胞因子；IL-6 是一種多功能炎癥因子，可以調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，作為炎癥因子參與炎癥反應(yīng)；IL-10 是一種多效性細(xì)胞因子，可以在多種類型細(xì)胞中發(fā)揮免疫抑制或免疫刺激的作用。

本研究結(jié)果顯示，治療前兩組ADAS-cog、ADL、NPI、MoCA、MMSE 評(píng)分，血清APP、Aβ1-42、Cys C、Hcy、IL-1、IL-6 及IL-10 水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＞0.05）。與治療前比較，兩組治療后的ADAS-cog、ADL、NPI 評(píng)分均下降，MoCA、MMSE 評(píng)分均升高，血清APP、Aβ1-42、Cys C、Hcy、IL-1、IL-6 及IL-10水平均下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05 或P ＜0.01）。治療后，與對(duì)照組比較，治療組的ADAS-cog、ADL、NPI 評(píng) 分 均 下 降，MoCA、MMSE 評(píng) 分 均 升 高，APP、Aβ1-42、Cys C、Hcy、IL-1、IL-6 及IL-10 水平均下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P ＜0.05）。對(duì)照組的總不良反應(yīng)率為5.66%，治療組的總不良反應(yīng)率為3.70%，兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。

綜上所述，恒清Ⅱ號(hào)方聯(lián)合鹽酸多奈哌齊可以顯著改善AD 患者的認(rèn)知功能，其可能通過降低AD 患者血 清APP、Aβ1-42、Cys C、Hcy、IL-1、IL-6 及IL-10水平從而起到治療AD 的作用。