Hp感染對(duì)過(guò)敏性紫癜患兒免疫應(yīng)答及腎功能的影響分析

河南省開(kāi)封市兒童醫(yī)院（475000）胡新房

過(guò)敏性紫癜（henoch-schonlein purpura，HSP）屬于風(fēng)濕免疫科的一種常見(jiàn)病，多見(jiàn)于學(xué)齡期兒童[1]。HSP病因尚未查明，目前認(rèn)為可能與感染、昆蟲叮咬、食品藥品過(guò)敏等誘因有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）感染和HSP患兒發(fā)病有一定關(guān)系[2]。Hp能夠引起兒童免疫應(yīng)答紊亂，使機(jī)體小血管出現(xiàn)損害，進(jìn)一步導(dǎo)致HSP。本研究分析Hp感染對(duì)HSP患兒免疫應(yīng)答及腎功能的影響，旨在為臨床治療提供合理依據(jù)。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院2017年2月～2020年2月診治的90例HSP患兒。納選標(biāo)準(zhǔn)：①符合HSP的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；②年齡4～12歲；③知情同意且符合倫理學(xué)要求（倫理委員會(huì)批準(zhǔn)）。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重肝、腎等緊要臟器病史，惡性腫瘤者；②有精神、智力障礙者；③臨床資料不全。按照是否感染Hp將患兒分為觀察組58例（感染Hp）與對(duì)照組32例（未感染Hp）。其中，觀察組男36例，女22例；年齡4～12（7.51±1.68）歲。對(duì)照組男18例，女14例；年齡4～12（7.64±1.57）歲。上述一般資料兩組相匹配（P＞0.05），有可比性。

1.2 方法 ①Hp感染的判斷方法。通過(guò)14C呼氣實(shí)驗(yàn)判斷HSP患兒是否感染Hp：首先患兒禁食12h，之后服用1粒14C尿素膠囊，待30min后使用呼氣卡采集患兒呼出氣，直至指示窗經(jīng)原本藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)榘咨珵橹埂２蓸咏Y(jié)束后將呼氣卡插入Hp檢測(cè)儀中開(kāi)始測(cè)定，感染Hp則測(cè)定結(jié)果≥200dpm，未感染Hp則測(cè)定結(jié)果＜200dpm。②免疫應(yīng)答相關(guān)指標(biāo)測(cè)定方法。在做14C呼氣實(shí)驗(yàn)前抽取患兒3mL空腹靜脈血，將其分為兩份，一份通過(guò)淋巴細(xì)胞分離液進(jìn)行分離以獲取外周血單個(gè)核細(xì)胞，然后提出RNA后使用熒光定量PCR試劑盒測(cè)定T細(xì)胞免疫球蛋白域黏蛋白域蛋白-1（Tim1）、細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)負(fù)調(diào)控因子1（SOCS1）的mRNA表達(dá)量；另一份使用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)患兒血清白介素-23（IL-23）、白介素-17（IL-17）、白介素-10（IL-10）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）水平。③腎功能相關(guān)指標(biāo)測(cè)定方法。在做14C呼氣實(shí)驗(yàn)前抽取患兒3mL空腹靜脈血，運(yùn)用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定患兒血清血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）水平，使用ELISA檢測(cè)患兒血清胱抑素C（CysC）、血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）、血管性假性血友病因子（vMF）、人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1（sVCAM-1）、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（CTGF）、基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9）水平。

附表1 兩組患兒免疫應(yīng)答相關(guān)指標(biāo)對(duì)比（±s）

附表1 兩組患兒免疫應(yīng)答相關(guān)指標(biāo)對(duì)比（±s）

組別 例數(shù) Tim1 SOCS1 IL-23 IL-17 IL-10 TGF-β1觀察組 58 1.90±0.31 2.34±0.41 60.78±9.05 30.13±5.64 45.21±6.43 52.30±7.26對(duì)照組 32 1.05±0.14 1.10±0.16 31.45±6.01 9.58±1.31 80.07±9.15 119.96±11.74 t 14.679 16.399 16.423 20.264 21.103 33.788 P 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

附表2 兩組患兒腎功能相關(guān)指標(biāo)對(duì)比（±s）

附表2 兩組患兒腎功能相關(guān)指標(biāo)對(duì)比（±s）

組別 例數(shù) CysC（mg/L） BUN（mmol/L） Scr（μmol/L）觀察組 58 3.67±0.46 10.98±2.14 140.12±16.89對(duì)照組 32 2.31±0.42 7.54±1.25 102.03±13.91 t 13.838 8.330 10.876 P 0.000 0.000 0.000

附表3 兩組患兒紫癜性腎炎標(biāo)志物對(duì)比（±s）

附表3 兩組患兒紫癜性腎炎標(biāo)志物對(duì)比（±s）

組別 例數(shù) sVCAM-1（ng/L） vMF（ng/L） TM（mg/L） MMP9（mg/L） CTGF（ng/L）觀察組 58 110.52±14.83 140.68±18.35 158.87±20.05 43.15±7.08 64.01±8.64對(duì)照組 32 70.14±9.52 91.26±10.28 115.12±15.06 30.02±5.21 43.56±7.13 t 13.886 14.045 10.770 9.197 11.409 P 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以±s表示、行t檢驗(yàn)；檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 兩組免疫應(yīng)答相關(guān)指標(biāo)比較 觀察組Tim1、SOCS1、IL-23、IL-17均明顯高于對(duì)照組，IL-10、TGF-β1均明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)附表1。

2.2 兩組腎功能相關(guān)指標(biāo)比較 觀察組血清CysC、BUN、Scr水平明顯比對(duì)照組高（P＜0.05）。見(jiàn)附表2。

2.3 兩組紫癜性腎炎標(biāo)志物比較 與對(duì)照組相比，觀察組血清sVCAM-1、vMF、TM、MMP9、CTGF水平均明顯升高（P＜0.05）。見(jiàn)附表3。

3 討論

隨著時(shí)代的發(fā)展，人民生活習(xí)慣的改變，兒童HSP的發(fā)病率日益增長(zhǎng)。HSP患兒會(huì)出現(xiàn)皮膚紫癜、關(guān)節(jié)及腹部疼痛、腎臟功能異常等臨床表現(xiàn)，若無(wú)有效治療措施，則對(duì)患兒生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響。有研究表明，Hp感染是兒童患HSP的誘因之一[4]。因此，分析Hp感染對(duì)HSP患兒免疫應(yīng)答及腎功能的影響有利于為根治Hp感染提供參考，從而改善患兒免疫功能與腎功能，加速其恢復(fù)速度。

兒童自身免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善，發(fā)生HSP時(shí)機(jī)體免疫應(yīng)答出現(xiàn)紊亂，而Hp感染又會(huì)減少免疫細(xì)胞的合成，影響免疫應(yīng)答進(jìn)程。Tim1與SOCS1均是調(diào)節(jié)CD4+輔助性T細(xì)胞的重要分子，Tim1可以促使Th2、Treg等免疫細(xì)胞分化成熟，SOCS1可以調(diào)節(jié)Th1、Th17等炎癥細(xì)胞分化成熟[5]。而Treg與Th17的平衡在機(jī)體免疫應(yīng)答系統(tǒng)中顯得尤為重要。IL-10與TGF-β1均由Treg細(xì)胞產(chǎn)生，二者抑制效應(yīng)明顯，可以拮抗免疫應(yīng)答與炎性反應(yīng)。IL-23與IL-17均由TH17細(xì)胞產(chǎn)生，二者促進(jìn)炎癥作用明顯，可以使組織受損程度加重[6]。本研究中，觀察組Tim1、SOCS1、IL-23、IL-17均明顯高于對(duì)照組，IL-10、TGF-β1均明顯低于對(duì)照組，提示Hp感染可以使HSP患兒的Tim1與SOCS1表達(dá)增加，進(jìn)一步使機(jī)體Treg與Th17的平衡出現(xiàn)異常，拮抗抑制性細(xì)胞分泌，加大促炎細(xì)胞分泌，從而使機(jī)體免疫應(yīng)答出現(xiàn)紊亂。

BUN和Scr是臨床上檢測(cè)腎功能的重要指標(biāo)，CysC則是一種新發(fā)現(xiàn)的檢測(cè)腎小球?yàn)V過(guò)功能的內(nèi)源性標(biāo)志分子[7]。本研究結(jié)果顯示，觀察組血清CysC、BUN、Scr水平明顯比對(duì)照組高，提示Hp感染會(huì)造成HSP患兒腎損傷加重。sVCAM-1、vMF、TM均是和HSP患兒內(nèi)皮受損有關(guān)的細(xì)胞因子，sVCAM-1可以通過(guò)介導(dǎo)各種炎性因子與內(nèi)皮細(xì)胞粘附來(lái)導(dǎo)致內(nèi)皮受損，而vMF與TM均是一種糖基化蛋白，可以在內(nèi)皮受損時(shí)加入血液循環(huán)[8]。MMP9與CTGF均是和HSP患兒腎纖維化有關(guān)的細(xì)胞因子，MMP9可以通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)以引起腎纖維化，CTGF可以通過(guò)增殖成纖維細(xì)胞以引起腎纖維化[9]。本研究中，與對(duì)照組相比，觀察組血清sVCAM-1、vMF、TM、MMP9、CTGF水平均明顯升高，提示Hp感染會(huì)使HSP患兒內(nèi)皮受損、腎纖維化，從而進(jìn)一步加重腎受損程度。

綜上所述，Hp感染對(duì)過(guò)敏性紫癜患兒免疫應(yīng)答及腎功能的影響較大，會(huì)使患兒免疫應(yīng)答出現(xiàn)紊亂，加重腎受損程度。但本研究樣本量較少，具有一定的局限性，還有待繼續(xù)研究。