免疫學檢驗技術的研究進展

天津市第五中心醫院（300450）戴隨

伴隨科技不斷進步，免疫檢驗技術也隨之迅速發展，從單一免疫診斷技術不斷向著微量化、多基因、單細胞等方面發展。現階段生物及相關科學快速進步，醫療技術不斷發展，為免疫學檢驗提供了發展的堅實基礎，在醫學方面大大促進了免疫檢驗技術的發展[1]。本文就免疫學檢驗研究進展作一綜述，并結合臨床經驗，以期為免疫學檢驗技術的臨床研究與進展提供具有指導性的意見。

1 傳統免疫學檢驗技術

傳統免疫學檢驗技術又被稱為血清學試驗，主要是通過對沉淀物的形成、聚集、擴散以及溶血等現象進行觀察，根據觀察結果對樣本中是否含有抗體或抗原等進行檢驗，結合樣本進行中和、溶血、凝聚、沉淀等反應，上述各項方法均為人工操作，用時相對較長，操作步驟繁多復雜，其中梅毒快速診斷試驗為最具有代表性的傳統檢驗技術[2]。

1.1 甲胺苯紅不加熱血清反應素試驗（TRUSR） TRUSR主要以甲苯胺紅燃料顆粒為主，檢驗結果較為準確、穩定性較高、試驗速度較快，但該檢驗方式易受到抗心磷脂抗體、高血脂等干擾，檢驗結果可能出現假陽性情況。

1.2 快速血漿反應素環狀卡片試驗（RPR） RPR是檢驗血清非特異性抗體的常用反應素，主要以牛心肌脂抗原作為主要抗原，在其中加入活性坦顆粒，檢測過程中需充分混勻檢驗試劑以及血清或血漿，且在8min后檢查結果，該實驗操作相對便捷、試驗結果準確、檢查速度較快。RPR是明確有無感染風險、是否復發、臨床診斷等的重要標準。但RPR在為類風濕性關節炎、乙肝、瘧疾、孕婦等進行檢驗時，可能出現檢驗結果假陽性的情況[3]。

2 膠體金免疫學檢驗技術

在臨床中，膠體金是一種應用較為廣泛的標記技術，主要原理為根據氯金酸在還原劑作用后形成金顆粒，通過靜電作用促進金顆粒形成穩定膠體狀態，將其稱為膠體金。膠體金標記能夠通過還原法將膠體金制作成為顏色不同、形狀各異的膠體金顆粒，對蛋白質發揮吸附作用，同時非共價結合抗生素、酶、毒素、免疫球蛋白等，是臨床有效的檢驗工具，膠體金免疫學檢驗技術主要分為斑點免疫滲濾試驗、免疫層析試驗兩種[4]。

2.1 斑點免疫滲濾試驗 斑點免疫滲濾試驗主要包括間接法測抗體和夾心法測抗原，前者主要是將SPA顯色/金標記抗體、抗體、抗原于膜上固定，后者則將特異性單克隆抗體、抗原、抗體于膜上固定。斑點免疫滲濾試驗在結核分枝桿菌等抗體或抗原檢測中應用較為廣泛[5]。

2.2 免疫層析試驗 快速免疫層析試驗主要是通過將抗體固定在硝酸纖維素膜中，隨后在其干燥部位浸入樣本，由于毛細管不斷作用，能夠促進樣品向前移動，在移動至抗體部位時，樣品中抗體與抗原能夠進行特異性結合，通過免疫沒染色或免疫膠體金能夠促進其顏色的改變，進而取得試驗結果[6]。

3 化學發光分析技術

CLTA（化學發光免疫分析技術）主要是指免疫反應結合化學發光測定技術，用以檢測抗體或抗原的分析技術，現階段CLTA屬于較為成熟的超微量活性物質檢測技術，具有檢測速度快、限行范圍寬、特異性強、靈活度高等特點，但在我國該分析技術的可靠程度以及靈敏度仍存在一定不足[7]。

ECLIA（電化學發光免疫分析技術）主要是將免疫檢測技術結合電化學發光技術，具有速度快、穩定性高、干擾因素少、成本低、無需催化劑等特點，能夠有效簡化試驗步驟，顯著提升試驗速度，但ECLTA相關試劑價格過高，在臨床較難廣泛推廣使用。ECLTA技術試驗原理相對簡單、檢驗速度較快，干擾素較少、結果相對準確，對于體內藥物濃度、維生素、血漿以及分泌激素等具有顯著的檢驗作用[8]。

4 標記免疫學檢驗技術

4.1 元素標記免疫學技術 釕元素、鑭系元素均為元素標記免疫檢驗技術中常見的標記元素，分別通過電化學發光免疫分析技術、分辨熒光免疫分析技術進行檢驗，前者主要通過電場作用被反復刺激從而放大信號，而分辨熒光免疫分析技術能夠應用于兩種指標的同時測定中。

4.2 量子點標記免疫學技術 量子尺寸相對較小，因其能夠連續能帶變成分立能級結構，接受激發而產生熒光，故其實質上屬于探針的一種。現階段，Ⅲ～V族或Ⅱ～Ⅵ族元素所組成的納米微粒是應用最多的量子點標記類型，在生物多組分、免疫示蹤定位、疾病早期診斷以及細胞成像中具有較為顯著的推廣應用價值。

4.3 核酸標記免疫學技術 核酸標記檢驗技術主要是將核酸的轉錄翻譯或擴增作為設計原理，核酸轉錄翻譯主要是通過標記的抗體DNA與抗原發生反應后進行胞外轉錄翻譯成酶后進行測定，而核酸擴增主要是DNA通過聚合酶鏈反應在短期內根據幾何級數不斷擴增而達到數百萬倍。核酸的轉錄翻譯與擴增均具有較高的靈敏度。

5 生物傳感器免疫學檢驗技術

5.1 生物傳感器 生物傳感器是能夠在規定范圍進行感應與測量，根據測量結果規律將其轉變為有效的信號輸出裝置，主要是由識別元件感受器、存在光學或電化學檢測元件組成的信號轉換器兩部分組成，是由醫學、電子學、化學、生物學等多種學科組合而成，主要優勢在于檢驗速度快、成本低、靈活度高、選擇性好等，能夠實現在線持續監測，伴隨近年來生物傳感器技術的不斷發展，使得該檢驗技術得到醫學方面的支持和廣泛推廣。

5.2 生物芯片技術 生物芯片又被稱為微陣列，屬于一種高新技術，在生命科學領域中生物芯片發展較為快速，主要是指微電子技術或微加工技術于固相載體芯片上形成微型生物化學分析系統，能夠實現對細胞、組織及蛋白質的有效檢測，生物芯片包括芯片實驗室、蛋白芯片以及基因芯片三部分，生物因子速度相對較快，能夠獲取較為準確的生物信息，具有較高的監測效率，對于醫學檢驗技術的發展具有重要影響意義。

6 總結與展望

伴隨醫學技術的不斷發展，要求免疫學檢驗技術能精準地分析特定部位取得的微量樣本，隨著微納電子學、分子生物學等科研技術的不斷進步，在此趨勢下，免疫學檢驗更多新興、更加敏感的檢驗方式也隨之不斷被應用，免疫學檢驗技術正朝著更新、更高的方向發展。