不同品種山銀花花期有效成分含量研究

石前　庾韋花　蒙平　張向軍　潘穎南　樊永生

摘要 [目的]對(duì)4個(gè)廣西本地山銀花藥材的質(zhì)量及從河南引種的1個(gè)金銀花品種（對(duì)照）進(jìn)行品質(zhì)評(píng)價(jià)，研究不同品種山銀花不同采收期與有效成分含量的關(guān)系，為廣西山銀花資源合理開(kāi)發(fā)和綜合利用提供依據(jù)。[方法]采收4個(gè)品種山銀花白蕾期、銀花期、金花期的花器官進(jìn)行處理，采用高效液相色譜法，分別測(cè)定其木犀草苷、綠原酸、氨基酸總量等有效成分含量。[結(jié)果]對(duì)比4個(gè)品種山銀花不同花期的有效成分含量，其中木犀草苷含量和氨基酸總量最高的是紅-RD，分別達(dá)0.023%和13.000%，但低于對(duì)照品種;木犀草苷含量最低的是HX-RD，僅為0.001%;氨基酸總量最低的是MH-RD，為8.240%;綠原酸含量最高的是HN-RD，達(dá)6.587%;最低的是MH-RD，僅為2.400%;不同品種之間的有效成分含量呈現(xiàn)顯著差異。從不同采收期來(lái)看，白蕾期的氨基酸含量均最高，木犀草苷含量不同采收期差異不顯著，綠原酸不同采收期含量差異水平不一。[結(jié)論]作為廣西鄉(xiāng)土品種，紅-RD和HN-RD的有效成分含量高，有很好的培育價(jià)值;對(duì)照品種H-RD（河南引進(jìn)）是優(yōu)良的金銀花品種，適合在廣西栽培;山銀花最佳采收期為白蕾期，其有效成分含量最高，品質(zhì)最好。

關(guān)鍵詞 山銀花;花期;采收期;有效成分;含量測(cè)定

中圖分類號(hào) R284文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 0517-6611（2020）22-0170-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.22.044

Study on the Contents of Active Components of Different Varieties of Lonicera japonica Thunb. in the Flowering Stage

SHI Qian，YU Wei-hua，MENG Ping et al

（Institute of Biotechnology， Guangxi Academy of Agricultural Sciences， Nanning，Guangxi 530007）

Abstract [Objective]To study the relationship between different harvesting periods and the content of effective components of different varieties of Lonicera japonica by evaluate the quality of four Guangxi Lonicera japonica and one Lonicera japonica （CK） introduced from Henan， so as to provide the basis for the rational development and comprehensive utilization of Guangxi Lonicera japonica resources. [Method]The flower organs of four varieties were collected and treated in the different growing stage， HPLC was used to determine the contents of galuteolin， chlorogenic acid and total amino acid. [Results] By comparing the contents of active components in the four varieties of Lonicera japonica at different flowering stages， red-RD had the highest contents of galuteolin and the total amount of amino acid， but lower than the CK. The lowest contents of galuteolin was HX-RD of 0.001%， the lowest contents of amino acid was MH-RD of 8.240%， the highest contents of chlorogenic acid was HN-RD which up to 6.587%， the lowest was MH-RD which just at 2.400%.The contents of active components were significantly different among different varieties.From the perspective of different harvesting periods， the content of amino acids in the white bud stage was the highest， the content of luteolin was not significantly different at different harvesting stages， and the level of difference in the content of chlorogenic acid was different at different harvesting stages. [Conclusion]As native varieties in Guangxi， red-RD and HN-RD have high content of effective components and good breeding value. The H-RD （introduced from henan province） is suitable for cultivation in Guangxi. White bud period was the best harvest period for Lonicera japonica which has the highest content of active components and the best quality.

Key words Lonicera japonica Thunb.;Flowering stage;Harvest time;Active components;Content determination

基金項(xiàng)目 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)專項(xiàng)（桂農(nóng)科2020YM64）;廣西忻城金銀花試驗(yàn)站項(xiàng)目（桂TS201428）;廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院優(yōu)勢(shì)學(xué)科團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（2015YT56）。

作者簡(jiǎn)介 石前（1982—），女，湖南衡陽(yáng)人，高級(jí)工程師，碩士，從事藥用植物利用研究。*通信作者，副研究員，碩士，從事特色中藥材組織培養(yǎng)及品種選育研究。

收稿日期 2020-02-10

金銀花（Flos lonicerae），又名忍冬花、銀花、對(duì)花、雙花，為忍冬科忍冬屬忍冬（Lonicera japonica Thunb.）半常綠多年生藤本灌木，其干燥花蕾是我國(guó)大宗常用藥材，具有清熱解毒、疏散風(fēng)熱的作用，用于治療外感風(fēng)熱或溫病初起、熱毒下痢、肺熱咳嗽等[1-2]。有關(guān)金銀花化學(xué)成分以及藥效藥理研究已探明，金銀花含有揮發(fā)油、黃酮類、有機(jī)酸、萜類、多酚類、氨基酸和維生素等多種成分，并且金銀花有效成分會(huì)受到品種、產(chǎn)地、部位及加工方式的影響[3-8]。近年來(lái)，大量研究集中在金銀花有效成分測(cè)定方面，研究表明，金銀花的抑菌、抗病毒的活性成分是其有機(jī)酸類和黃酮類[9-11]。2010年版《中華人民共和國(guó)藥典》（以下簡(jiǎn)稱《藥典》）規(guī)定以其綠原酸和木犀草苷含量作為判斷金銀花品種品質(zhì)優(yōu)劣的指標(biāo)[1]。

我國(guó)主要金銀花種質(zhì)資源有忍冬屬植物98種、5亞種、18變種，可供藥用的達(dá)49種，作為中藥金銀花流通及使用的品種非常復(fù)雜[2-3]。自2005年版和2010年版《藥典》中將金銀花和山銀花作為2個(gè)品種[1-2]分別收載后，金銀花的主產(chǎn)區(qū)變?yōu)樯綎|、河南和河北巨鹿，這一變動(dòng)使得以栽培山銀花為主的我國(guó)西南地區(qū)面臨著巨大的市場(chǎng)挑戰(zhàn)。在保護(hù)好地方品種的同時(shí)，如何篩選和培育本土優(yōu)質(zhì)山銀花品種對(duì)包括廣西在內(nèi)的西南地區(qū)勢(shì)在必行。該試驗(yàn)通過(guò)對(duì)廣西本地栽培的不同品種山銀花和區(qū)外引進(jìn)的金銀花不同花期的有效成分含量進(jìn)行對(duì)比分析，為篩選出廣西本地優(yōu)質(zhì)栽培品種以及山銀花資源合理開(kāi)發(fā)和綜合利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

從廣西區(qū)內(nèi)外收集并種植于廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物所種質(zhì)資源圃內(nèi)的5個(gè)山銀花品種，包括H-RD、HN-RD、HX-RD、紅-RD和MH-RD。試驗(yàn)材料來(lái)源見(jiàn)表1。

1.2 試驗(yàn)方法

對(duì)HN-RD、HX-RD、紅-RD和MH-RD這4個(gè)山銀花品種及H-RD（對(duì)照）在不同花期（白蕾期、銀花期、金花期）分別進(jìn)行花器官采摘、殺青烘干處理，樣品送廣西測(cè)試中心進(jìn)行木犀草苷、綠原酸、氨基酸總量的測(cè)定。氨基酸總量采用茚三酮比色法進(jìn)行測(cè)定;綠原酸、木犀草苷含量采用高效液相色譜法測(cè)定，參照《藥典》2005年版一部所收載山銀花的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下的含量測(cè)定方法。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用DPS統(tǒng)計(jì)軟件和Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種不同花期山銀花含量測(cè)定

從表2可以看出，木犀草苷含量最高的是H-RD（對(duì)照），最高達(dá)0.034%，其次是紅-RD（10～12號(hào)），最低的是HX-RD（7～9號(hào)），僅為0.001%;綠原酸含量最高的是HN-RD（4～6號(hào)），最高達(dá)6.587%，其次是H-RD（對(duì)照），最低的是MH-RD（13～15號(hào)），僅為2.400%;氨基酸總量最高的是H-RD（對(duì)照），最高達(dá)13.747%，最低的是MH-RD，僅為8.240%。從不同采收期來(lái)看，木犀草苷、綠原酸、氨基酸含量最高值均出現(xiàn)在白蕾期。

2.2 不同品種不同花期山銀花綠原酸含量差異性比較

從多重比較結(jié)果（表2）可以看出，HN-RD（4～6號(hào)）、HX-RD（7～9號(hào)）、紅-RD（10～12號(hào)）、MH-RD（13～15號(hào)）這4個(gè)山銀花品種之間的綠原酸含量達(dá)到顯著差異水平。HN-RD的綠原酸含量最高，MH-RD的綠原酸含量最低。

從不同采收期來(lái)看，同一品種不同采收期綠原酸差異水平不一，其中，HN-RD的3個(gè)不同采收期的綠原酸含量差異顯著;HX-RD金花期與銀花期含量差異顯著，銀花期與白蕾期含量差異顯著;紅-RD金花期與銀花期含量差異顯著;MH-RD與H-RD（對(duì)照）不同采收期的綠原酸含量差異不顯著。4個(gè)山銀花品種中，HN-RD白蕾期的綠原酸含量最高;隨著山銀花開(kāi)放，綠原酸含量逐漸降低;HX-RD為銀花期綠原酸含量最高;紅-RD則是金花期綠原酸含量最高;MH-RD的3個(gè)時(shí)期綠原酸含量不變。

2.3 不同品種不同花期山銀花木犀草苷含量差異性比較

從多重比較結(jié)果（表2）可以看出，4個(gè)山銀花品種之間的木犀草苷含量差異水平表現(xiàn)不一，木犀草苷含量較高的紅-RD（10～12號(hào)）和H-RD（對(duì)照1～3號(hào)），兩者差異不顯著，HN-RD（4～6號(hào)）和MH-RD（13～15號(hào)）差異不顯著，其余品種之間木犀草苷含量差異達(dá)到顯著水平。

從不同采收期來(lái)看，4個(gè)品種的不同采收期木犀草苷含量差異均不大，基本都呈現(xiàn)不顯著差異;4個(gè)山銀花品種中，HN-RD、紅-RD、MH-RD 3個(gè)品種均是金花期的木犀草苷含量最高;HX-RD品種為銀花期木犀草苷含量最高。木犀草苷含量隨著山銀花開(kāi)放，含量逐漸升高，在金花期和銀花期達(dá)到最高。

2.4 不同品種不同花期山銀花氨基酸總量差異性比較

從多重比較結(jié)果（表2）可以看出，氨基酸總量較高的是H-RD（對(duì)照）和紅-RD（10～12號(hào)），4個(gè)品種的氨基酸總量與對(duì)照差異均達(dá)顯著水平，紅-RD和MH-RD（13～15號(hào)）之間的氨基酸總量也呈現(xiàn)顯著差異，其余品種之間氨基酸總量差異不明顯。

從不同采收期來(lái)看，4個(gè)品種不同采收期氨基酸總量差異不大，只有紅-RD不同花期氨基酸總量差異顯著，其余品種不同花期氨基酸總量差異均不顯著。從總體上來(lái)看，4個(gè)品種均是白蕾期的氨基酸總量最高，銀花期最低。

3 結(jié)論與討論

對(duì)HN-RD、HX-RD、紅-RD和MH-RD這4個(gè)山銀花品種及H-RD（對(duì)照）不同花期的有效成分含量進(jìn)行對(duì)比分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，木犀草苷含量和氨基酸總量最高的是紅-RD，但低于對(duì)照品種，木犀草苷含量最低的是HX-RD，氨基酸總量最低的是MH-RD;綠原酸含量最高的是HN-RD，最低的是MH-RD;HX-RD的3種有效成分均較低。4個(gè)品種之間的有效成分含量達(dá)顯著差異水平。總的來(lái)說(shuō)，作為廣西鄉(xiāng)土山銀花品種，紅-RD和HN-RD的有效成分含量高，有很好的培育價(jià)值，對(duì)照品種H-RD（河南引進(jìn)）是優(yōu)良的金銀花品種，適合在廣西栽培。

從4個(gè)山銀花品種不同采收期來(lái)看，氨基酸總量在白蕾期均最高，隨著山銀花開(kāi)放，氨基酸總量逐漸降低，銀花期最低，到金花期又呈現(xiàn)上升趨勢(shì);木犀草苷含量則隨著山銀花開(kāi)放，含量逐漸升高，在金花期和銀花期達(dá)到最高;而綠原酸含量不同品種不同采收期差異水平不一。綜合以上不同采收期有效成分對(duì)比結(jié)果，山銀花最佳采收期選擇白蕾期為宜，其有效成分氨基酸總量均最高，木犀草苷含量不同采收期差異不顯著，綠原酸含量不同采收期含量差異水平不一。

中藥材栽培過(guò)程中既要努力達(dá)到產(chǎn)量最高，又要努力實(shí)現(xiàn)有效成分的最優(yōu)。由于山銀花以花為藥用部位，花期集中，造成了采摘不及時(shí)、藥材質(zhì)量參差不齊等一系列問(wèn)題。 因此，山銀花的適宜采收期是備受關(guān)注的重點(diǎn)。劉志陽(yáng)[12]和張燕等[13]分別在不同時(shí)間對(duì)不同產(chǎn)區(qū)金銀花的最佳采收期進(jìn)行了研究，均認(rèn)為金銀花最佳的采收期為“二白”至“大白”期，這與該研究結(jié)果一致。山銀花優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)研究需多因素、多角度進(jìn)一步深入研究，并制定穩(wěn)定可控的標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程來(lái)實(shí)現(xiàn)。

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