腸道病毒核酸與抗體聯合檢測在手足口病診斷中的應用價值

高建民

（遼寧省朝陽市疾病預防控制中心微生物檢測所，遼寧 朝陽 122000）

手足口病是一種常見于兒童的傳染性疾病，患兒的主要癥狀為發熱、口腔及四肢皰疹等，具有自限性且患兒的預后較少，但也有部分患兒并發腦炎、肺水腫等并發癥，進展速度快且病死率高，對患兒的生命安全造成了較大的威脅[1]。該病一年四季均可發生，且在學校、托兒所等場所容易爆發。該病的病原體為腸道病毒，具有較高的傳染性，其主要是通過糞口傳播，傳播速度快且控制難度大，容易在短時間內出現大范圍流行的情況[2]。盡早治療對于改善手足口病患兒的預后情況具有重要的現實意義，但是從目前現狀來看，由于多數手足口病患兒的癥狀較輕且癥狀不典型，臨床診斷中存在較大的困難，因此通過實驗室檢查鑒別診斷手足口病具有重要的現實意義[3]。目前對于該病臨床實驗室診斷主要是通過腸道病毒核酸檢查以及抗體檢查實現，文章主要通過比較單獨腸道病毒核酸檢查以及單獨抗體檢查與這兩種方法的聯合檢查的結果，分析不同檢查方法的診斷價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2020年6月我院收治的200例手足口病患兒，入選患兒均符合衛生部門發布的《手足口病診療指南》中的診斷標準。200例患兒中，男性109例，女性91例，平均年齡（5.62±1.10）歲，臨床癥狀有發熱、皰疹、食欲缺乏。

1.2 方法 所有患兒均行腸道病毒核酸檢測以及抗體檢測。腸道病毒核酸檢測的具體方法：入院時采集患兒的糞便樣本，采集后放置于4 ℃冰箱中，并在48 h內送檢。本次研究使用北京中海生物科技有限公司生產的EV71-RNA檢測試劑盒以及CA16-RNA檢測試劑盒，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。抗體檢測的具體方法：清晨空腹采集3 mL肘靜脈血，以2500 r/min速率離心10 min，采集血清樣本并放置于-20 ℃冰箱中待檢。使用上海生物制品研究所生產的EV71-IgM抗體試劑盒以及CA16-IgM抗體試劑盒進行檢測，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.3 觀察指標 比較單獨腸道病毒核酸檢測、抗體檢測以及腸道病毒核酸聯合抗體檢測的結果。并對兩種檢測方法的檢測結果進行一致性分析，觀察腸道病毒核酸檢測與抗體檢測的吻合程度。

1.4 統計學方法 采用SPSS20.0統計學軟件對本文數據進行統計學分析，檢測陽性率等計數資料采用率（%）表示，組間比較行χ2檢驗；腸道病毒核酸與抗體檢測的一致性采用Kappa檢驗。以P＜0.05時為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三種檢測方法的檢測結果比較 200例患兒行腸道病毒核酸檢測的陽性率為73.0%，行抗體檢測的陽性率為72.0%，兩種檢測方法檢測陽性率比較差異無統計學意義（P＞0.05）；腸道病毒核酸聯合抗體檢測的陽性率為93.0%，明顯高于單獨腸道病毒核酸檢測以及單獨抗體檢測（P＜0.05）。見表1。

表1 三種方法的檢測結果比較

2.2 腸道病毒核酸與抗體檢測的一致性分析 通過腸道病毒核酸與抗體檢測的一致性分析，Kappa=0.935，P＜0.05，提示腸道病毒核酸與抗體檢測具有較高的吻合性。

3 討 論

手足口病是兒科常見的傳染病，臨床最常見的病原體為EV71、CA16，常見于5歲以下兒童，主要癥狀為手、足、口等部位出現丘疹，多數患兒的癥狀較輕，1周內可痊愈，但也有部分患兒并發腦炎、肺水腫等并發癥，導致患兒死亡，尤其是嬰幼兒，因此需要盡早給予診斷和治療，改善重癥手足口病患兒的預后情況[4]。

臨床研究指出重型手足口病常見于3歲以下兒童，本次研究中200例患兒中僅有22例重癥患兒，年齡為6個月～4歲，平均年齡為（2.01±0.42）歲，所占比例為11.00%，由此可見重型手足口病患兒常見于嬰幼兒，可能是由于嬰幼兒免疫功能發育不成熟，是手足口病的高風險人群，因此需要加強嬰幼兒的衛生管理，尤其是托兒所、幼兒園的衛生管理[5]。本次研究中200例患兒均出現不同程度的皮疹，由此可見皮疹是該病的常見癥狀。在臨床診斷過程中，需要仔細查看患兒的臨床癥狀，做好其他疾病引起皮疹的鑒別診斷。臨床有研究指出，部分手足口病患兒無皮疹或皮疹在疾病中后期階段發生，因此容易出現誤診漏診的情況[6]。因此，在臨床診斷中需要仔細分析患兒的病情狀況，盡早進行病原體檢測，從而診斷患兒的疾病，盡早治療。

引起手足口病的腸道病毒有很多，其中以EV71與CA16型在臨床中的檢出率最高，兩種病原體均為腸道病毒屬成員，其中EV71型感染容易引起重癥手足口病，也是造成患兒死亡的重要原因[7]。腸道病毒可通過多種途徑傳播，且具有較高的傳染性。但是臨床診斷中需要注意的是，雖然手足口病的臨床癥狀相似，但是引發手足口病的病原體不同，治療方法也存在著一定的差異，因此通過實驗室檢查確定病原體對于臨床診斷與治療具有重要的現實意義[8]。

傳統病原學檢查采用的是病毒培養分離鑒定的方法，也是臨床診斷的金標準，但是該方法耗時長且對實驗室環境以及檢測技術要求較高，無法在基層推廣使用。目前臨床診斷手足口病常用的實驗室方法為腸道病毒核酸檢測、抗體檢測、免疫組化檢測等方法，其中以腸道病毒核酸檢測、抗體檢測在臨床中的應用范圍較廣，具有操作簡單、經濟實惠的優勢。

腸道病毒核酸檢測是一種通過檢測采集樣本中是否存在外來病毒核酸從而確定是否存在病毒感染的檢測方法。若檢測結果為陽性，則可以證明患者存在病毒感染[9]。本次研究中病毒核酸檢測使用的是逆轉錄聚合酶鏈式反應法，樣本的采集、保存及轉運、樣本核酸的提取和檢測、結果的判讀均須嚴格按照試劑盒說明書要求進行，能夠獲得比較合理的檢測結果。抗體檢測主要是觀察人體免疫應答狀況，也是臨床診斷的常用方法，如一些自體免疫性疾病，其發生與自身免疫相關，可以檢測到自身抗體的升高；同時，在免疫缺陷病、免疫增生病以及病毒感染等疾病診斷中具有較好的應用效果。雷錦輝和況群芳[10]通過研究發現，腸道病毒核酸檢測與抗體檢測的診斷符合率比較差異無統計學意義（P＞0.05），但聯合檢測的診斷符合率明顯高于腸道病毒核酸檢測與抗體檢測（P＜0.05），由此可見腸道病毒核酸檢測與抗體檢測聯合檢測在手足口病患者病原學快速診斷方法中的應用效果優于腸道病毒核酸檢測與抗體檢測，這與本次研究結果存在一致性。本次研究中200例患兒行腸道病毒核酸檢測的陽性率為73.00%，行抗體檢測的陽性率為72.00%，兩種檢測方法的陽性率比較差異無統計學意義（P＞0.05），這說明腸道病毒核酸與抗體檢測在手足口病臨床診斷中的檢出率相當，均有相似的診斷價值；而本次研究中的腸道病毒核酸與抗體檢測聯合檢測的陽性率為93.00%，明顯高于單獨腸道病毒核酸檢測以及單獨抗體檢測（P＜0.05），由此可見腸道病毒核酸與抗體檢測的聯合檢測相比于單獨腸道病毒核酸與單獨抗體檢測來說，能夠進一步提升手足口病的臨床檢出率，從而盡早發現和治療。本次研究通過腸道病毒核酸與抗體檢測的一致性分析，Kappa=0.935，P＜0.05，提示腸道病毒核酸與抗體檢測具有較高的吻合性，由此可見腸道病毒核酸與抗體檢測能夠聯合檢測，不會影響檢測結果的準確性。

綜上所述，手足口病是一種常見的傳染病，多發于兒童，傳播途徑復雜，傳播性較強，屬于丙類傳染病，若出現大范圍流行可導致患兒的身體健康受到影響，為了進一步降低該病的發生率和病死率，需要盡早診斷和治療。病原學檢查在該病臨床診斷中具有重要的作用，本次研究通過觀察發現，腸道病毒核酸與抗體檢測在手足口病臨床診斷中均有著較好的應用效果，通過聯合檢測的方式能夠進一步提高手足口病的檢出率，從而減少漏診情況。