氣相色譜-燃燒-同位素比質譜在檢測尿樣中外源性睪酮及其代謝物中的應用

溫超 王靜竹 朱天碩 劉欣 王杉 張亦農

國家體育總局反興奮劑中心（北京100029）

1 引言

睪酮（testosterone，T）是人體內主要的固醇激素之一，可以促進機體的合成代謝，促進肌肉和力量的增長[1-3]，因此被某些運動員作為興奮劑使用。由于體內自身合成的睪酮和睪酮制劑中的睪酮的分子結構完全一致，常規的質譜儀難以區分體內自身合成的睪酮和外源攝入的睪酮。同時，由于個體差異、不同的生理狀況，尿樣中的睪酮濃度變化范圍較大，因此，尿樣中外源性的睪酮確證，一直以來都是興奮劑檢測領域的重點和難點[4-6]。按照世界反興奮劑機構（WADA）的規定[7，8]，當體內睪酮、表睪酮及其代謝物的濃度或者比例發生異常變化時，如睪酮和表睪酮濃度比例大于4，或者在男性尿樣中睪酮含量大于200 ng/mL 時，需要對尿樣中的睪酮以及其主要代謝物進行氣相色譜-燃燒-同位素比質譜（GC-C-IRMS）確證[7-12]，區分被分析物是否為外源性類固醇激素。

GC-C-IRMS 檢測技術在興奮劑檢測領域已經有20年左右的應用[13-21]。通過對樣品待測物中13C/12C 的比例與內源性激素參照物中13C/12C 比例進行比較，可以判斷樣品中待測物是否為內源產生或外源攝入。通常13C/12C 的比例表示為δ13C 值，使用維也納Pee Dee 箭石標準（Vienna Pee Dee Belemnite，VPDB）作為國際單位進行校準[22]。

目前，大多數人工合成的類固醇激素均來自于植物基質，相對于人體自身合成的類固醇激素，人工合成的類固醇激素具有更貧乏的δ13C值[7，17，22-24]。當人體攝入外源性睪酮，其體內睪酮及其代謝物的δ13C值將隨之變化，而與睪酮代謝無關的其他類固醇激素則不受影響。……