小型豬骨膜干細胞的分離與鑒定

王安鴻 史尉利 余慧鐳 傅欣 段小寧 胡曉青 郭秦煒

北京大學第三醫院運動醫學科，北京大學運動醫學研究所，運動醫學關節傷病北京市重點實驗室（北京100191）

關節軟骨是關節重要的組成部分，能承受和平衡應力負荷，在關節活動中起著重要作用，關節軟骨損傷后會造成疼痛等癥狀，影響關節活動，造成功能障礙，若得不到良好的治療，會逐漸進展為骨關節炎，甚至導致殘疾[1]。但軟骨缺乏血管、神經、淋巴等組織，無法有效地進行自我修復，臨床上的傳統手術如微骨折術等又無法再生關節軟骨[2，3]。自體軟骨細胞移植需二次手術，操作復雜、耗時長，易造成移植物的增生肥大，且軟骨細胞體外擴增時經常出現去分化和軟骨細胞的表型無法維持穩定等問題[4-6]。因此，國內外開展了眾多以多向潛能間充質干細胞為基礎的組織工程技術用于修復關節軟骨損傷，應用較多的主要有骨髓、滑膜和脂肪起源的干細胞[7]，但現有的研究表明這些干細胞修復效果不佳[8-10]。因此，尋找更為有效的種子細胞是目前組織工程的一項重要任務。Reinholz 等將兔脛骨近端內側骨膜經轉化生長因子β（transforming growth fac?tor，TGF-β）和胰島素樣生長因子（insulin-like growth factor，IGF）處理后體外培養，結果顯示骨膜生發層的厚度和細胞數都顯著增加，成軟骨的能力也增加了近12 倍[11]。在他們的后續實驗中，將兔骨膜經TGF-β預處理后，再將骨膜移植物移植到骨軟骨缺損區，能促進缺損區的組織更新修復[12]。而在我們的前期研究中，在脛骨近端內側骨膜下注射TGF-β后，骨膜的生發層可出現明顯的增殖反應[13]。……