TBX3通過Wnt/β-catenin信號通路影響胃癌細胞增殖、侵襲和遷移①

王紅山 解寒冰 余江濤

(鄭州人民醫院普通外科,鄭州 450000)

隨著生活水平的提高，胃癌發病率呈上升趨勢，雖然醫療水平不斷提高，但胃癌的死亡率仍居高不下，對患者的健康造成嚴重威脅。除手術治療、放化療等傳統療法外，分子靶向治療逐漸受到重視。胃癌的發生機制復雜，發病過程中伴隨癌基因的激活或抑癌基因的失活，以及各組信號通路的紊亂。TBX3是T-box轉錄因子家族成員，在胚胎發育中發揮重要作用，可通過Wnt等信號通路發揮作用[1]。TBX3在惡性腫瘤的發生發展中也發揮重要作用，在多種惡性腫瘤中高表達，扮演癌基因角色，參與惡性腫瘤的發生發展過程[2]。TBX3可通過Wnt信號通路發揮作用，Wnt信號通路在胃癌的增殖、侵襲及遷移過程中發揮重要作用[3，4]。因此本文對胃癌細胞中TBX3表達及沉默TBX3表達對胃癌細胞增殖、侵襲、遷移及Wnt/β-catenin信號通路的影響進行研究，探討TBX3在胃癌中的可能作用機制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細胞系 胃癌細胞系MGC-803、正常胃黏膜細胞系GES-1購自美國ATCC公司。

1.1.2試劑和儀器 Lipofectamine 2000試劑盒(美國Santa Cruz公司)，TBX3 siRNA及陰性對照siRNA(德國Qigen公司)，TBX3的shRNA引物序列：F：5′-CCGGGCTGATGACTGTCGTTATAAACTCGAGTTTATAACGACAGTCATCAGCTTTTTG-3′，R：5′-AATTCAAAAAGCTGATGACTGTCGTTATAAACTCG-AGTTTATAACGACAGTCATCAGC-3′，逆轉錄試劑盒、PCR試劑盒、Trizol試劑、結晶紫、ECL化學發光試劑盒(美國Sigma公司)，CCK8試劑、Wnt/β-catenin信號通路抑制劑XAV939、DMEM培養基、胰蛋白酶(美國BPB公司)，兔抗人TBX3單克隆抗體、兔抗人神經-鈣黏蛋白(N-cadherin)單克隆抗體、兔抗人上皮-鈣黏蛋白(E-cadherin)單克隆抗體、兔抗人Snail單克隆抗體、兔抗人Wnt3α單克隆抗體、兔抗人β-catenin單克隆抗體、兔抗人C-myc單克隆抗體(美國Invitrogen公司)。Transwell小室(美國TaKaRa公司)，酶標儀及流式細胞儀(美國Bio-Rad公司)，PCR擴增儀(美國Gibco公司)等。……