姜黃素對膿毒癥急性肺損傷大鼠的保護作用

段金旗 林 艷

(張家口學院醫學院，張家口 075000)

目前，膿毒癥發病率、病死率居高不下，臨床救治十分困難，是當今重癥醫學所面臨的難題[1]。姜黃素具有抗腫瘤、清除自由基、抗氧化、抗炎等藥理作用，在多種疾病的治療方面有廣闊的應用前景[2]。許多文獻報道姜黃素對膿毒癥引起的器官損傷有保護作用，但對于膿毒癥引發的急性肺損傷(acute lung injury，ALI)療效，目前研究甚少[3]。本研究采用盲腸結扎穿刺(CLP)建立膿毒癥ALI大鼠模型，觀察大鼠肺組織病理變化，進一步研究姜黃素對膿毒癥ALI中炎癥因子的表達及相關作用機制。

1 材料與方法

1.1材料 TNF-α、IL-6 ELISA 試劑盒(武漢博士德公司)；HMGB1抗體(Santa Cruze公司)；RNA 提取試劑(美國 Gibco公司);SYBR Green PCR 試劑盒(TaKaRa 公司)；HMGB1引物合成(中國北京鼎國生物技術公司)；BCA 蛋白濃度測定試劑盒(碧云天生物工程有限公司)；姜黃素和二甲基亞砜(DMSO)(美國 Sigma公司)；Real-time PCR檢測儀ABI7900(美國 Applied Biosystems公司)。

1.2方法

1.2.1動物分組與給藥 清潔級，雄性，6～8周齡SD 大鼠，體質量180～200 g，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，合格證號：SCXK(湘) 2015-0013，術前適應性喂養1周。 大鼠隨機分為 3 組(每組10 只)：對照組、模型組及治療組。對照組大鼠在麻醉開腹后立即關閉腹腔，術后不給藥。而模型組和治療組均依照文獻[4]采用CLP法建立膿毒癥ALI模型。治療組術后 2 h 經腹腔注射200 mg/kg的姜黃素(0.1% DMSO溶解)，模型組術后 2 h 經腹腔注射0.1 % DMSO (1 ml/kg)。

1.2.2標本處理 建模后，將大鼠麻醉腹主動脈采血4 ml ，分離血清，-80℃保存；對肺組織進行灌洗，收集灌洗液，-20℃保存；手術切取右肺葉于液氮中保存。

1.2.3檢測指標

1.2.3.1觀察大鼠生存率 以各組大鼠造模時間為起始點，觀察大鼠存活情況，以天為時間節點，共觀察7 d。……