氧化苦參堿調(diào)節(jié)CIA小鼠濾泡輔助性T細(xì)胞的研究①

曹 干 王寧萍 崔振華 王佩佩 楊勇婭 張艷麗

(寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)系，銀川 750004)

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是慢性、進(jìn)行性、侵蝕性自身免疫性疾病，以關(guān)節(jié)滑膜炎癥為特征，其發(fā)病機(jī)制通常認(rèn)為與CD4+T淋巴細(xì)胞分化異常有關(guān)。濾泡輔助性T(T follicular helper，Tfh)細(xì)胞是可促進(jìn)淋巴濾泡生發(fā)中心形成、輔助B細(xì)胞活化、增殖、分化并產(chǎn)生高親和力抗體的CD4+T細(xì)胞，研究提示Tfh細(xì)胞在RA的炎癥形成、關(guān)節(jié)軟骨及骨質(zhì)破壞、骨侵蝕中具有重要作用[1，2]。RA治療多使用非甾體類抗炎藥和糖皮質(zhì)激素，但僅能緩解癥狀且副作用較多。生物制劑治療逐漸被關(guān)注，已取得一定療效，如英夫利昔單抗(Infliximab)，但價格昂貴。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)從寧夏道地藥材苦豆子中提取的氧化苦參堿(oxymatrine，OMT)在小鼠體內(nèi)顯示了較好的抗炎作用，可通過調(diào)節(jié)Treg/Th17細(xì)胞平衡起抗RA作用，但作用機(jī)制尚不明確[3，4]。本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建DBA/1J小鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(collagen-induced arthritis，CIA)模型，明確OMT治療效果，并探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動物 50只雄性SPF級DBA/1J小鼠購自卡文斯實(shí)驗(yàn)動物有限公司(No.201708981)，6～7周齡，體質(zhì)量18～22 g。飼養(yǎng)于我院動物室潔凈柜，室溫20～25℃，相對濕度55%，自由飲食。DBA/1J小鼠隨機(jī)分為6組：正常組、模型組、地塞米松組、OMT高、中、低劑量組，每組7只。實(shí)驗(yàn)中意外死亡的小鼠或造模未成功的小鼠用同批次其余8只小鼠做相應(yīng)補(bǔ)充。

1.1.2藥物 OMT(批號：20161028)購自寧夏紫荊花藥業(yè)股份有限公司，純度99.18%；地塞米松注射液[5 mg/(2 ml·支)]購自山東辰欣藥業(yè)集團(tuán)。根據(jù)文獻(xiàn)[5]確定本實(shí)驗(yàn)OMT高劑量組(OMT-H)OMT濃度為180.0 mg/(kg·d)，中劑量組(OMT-M)為90.0 mg/(kg·d)，低劑量組(OMT-L)為45.0 mg/(kg·d)。……