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P38MAPK在正常豚鼠耳蝸中的表達

2020-11-10 13:05:38廖行偉黃巧翟思佳尹時華
中華耳科學雜志 2020年5期
關鍵詞:實驗

廖行偉 黃巧 翟思佳 尹時華

廣西醫科大學第二附屬醫院耳鼻咽喉頭頸外科(南寧530007)

p38絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)是高度保守的絲氨酸/蘇氨酸絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族成員,共有6個亞型,包括p38α1/α2、p38β1/β2、p38γ和p38δ[1]。p38MAPK在去磷酸化狀態下無活性,當細胞受到紫外線、炎性因子、細胞因子、DNA損傷等刺激后,p38MAPK被激活磷酸化,磷酸化的p38MAPK(p-p38)可活化一系列底物如轉錄因子、蛋白激酶、胞漿和胞核蛋白等,引發炎癥反應、細胞分化、細胞周期停滯、凋亡、衰老、細胞因子產生以及RNA剪接調控等,且這種活化作用通常具有組織細胞特異性[2]。

梅尼埃病是一種以波動性聽力損失和前庭功能障礙為主要表現的疾病,主要由于內耳內環境紊亂和淋巴囊系統調節失效,導致膜迷路積水從而引起相應癥狀[3,4]。水通道蛋白(AQP)是存在于哺乳動物和植物細胞膜上的特異孔道,其功能是介導水在細胞的跨膜轉運,維持生命基本活動[5]。在豚鼠膜迷路積水模型研究發現,膜迷路積水可能與AQP2的表達上調有關[6]。而在小鼠腎臟集合管細胞中,通過p38MAPK途徑能夠改變AQP2蛋白酶體降解,增強AQP2在腎臟的表達[7]。p38MAPK是否通過調控AQP2參與內耳膜迷路積水形成并不清楚,本實驗期望通過研究p38MAPK在豚鼠內耳中的表達,以進一步深入了解膜迷路積水、梅尼埃病的發病機制。

1 材料與方法

1.1 實驗試劑

P38MAPK兔抗鼠單克隆抗體購自美國CST公司;SBAC二抗試劑盒、過氧化物酶阻滯劑及DAB顯色劑均購自boster公司;TRIZOL購自TaKaRa公司;逆轉錄盒與熒光定量PCR試劑盒均購于天根生化科技有限公司;……

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