珠海地區985例變態反應性皮膚病患者變應原檢測結果分析

魏秋姣，杜 鵬，劉小鳳，黃嘉怡，沈守星

珠海市慢性病防治中心，廣東 珠海 519000

變態反應性疾病又稱過敏性疾病，包括過敏性鼻炎、過敏性哮喘、濕疹、蕁麻疹、接觸性皮炎和過敏性胃腸炎，機體通過吸入、食入、注入或接觸某種含有致敏成分的物質（稱為過敏原或變應原）后觸發機體產生過量的免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)，從而引起各種功能性障礙或組織損傷的一類疾病［1-2］，其病因復雜，而且容易受內外環境因素的影響，導致防治較困難。研究表明，治療過敏性疾病的關鍵在于過敏原的檢測，如果過敏原檢測結果不準確，則無法為醫生提供治療的可靠依據［3］。患者血清特異性IgE(Specific IgE antibodies,sIg)的檢測可以確定過敏原，過敏原的分布具有區域、氣候、自然環境以及生活方式的差異性，因此，了解變態反應性皮膚病患者血清總IgE和特異性IgE（sIgE）的種類、分布及其相互關系，可以為疾病的診療與本地區過敏性疾病的防治提供實驗室依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2015年5月—2016年11月珠海市慢性病防治中心收治的變態反應性皮膚病患者985例，男440例，女545例，年齡1個月到83歲，平均年齡26歲。患者在檢查前1周未使用過抗過敏及糖皮質激素類等藥物。按年齡分為4 組: 嬰幼兒組(≤5 歲)123 例，青少兒組(6 歲～19 歲) 150 例，中青年組(20歲～49歲) 481例，老年組(≥50歲) 267 例。

1.2 標本采集與保存

抽取靜脈血5 ml，置于干燥管內，3 000 r/min 離心10 min，分離血清，不能及時檢測的樣本2 °C～8 °C 保存，不超過3天。

1.3 總IgE與特異性變應原的檢測

患者總IgE 的檢測采用歐蒙醫學實驗診斷有限公司的總IgE 檢測試劑盒，嚴格按試劑說明書操作，依試劑說明書標準進行反應性判定；特異性變應原的檢測采用歐蒙醫學實驗診斷有限公司的吸入性和食入性特異性IgE(sIgE)抗體檢測試劑盒，該試劑盒采用免疫印跡法，膜條上包被了10 種吸入性過敏原：樹組合2（柳樹/楊樹/榆樹）、艾草、艾蒿、塵螨組合（屋塵螨/粉塵螨）、屋塵、貓毛、狗上皮、蟑螂、霉菌組合1（點青霉/分枝孢霉/煙曲霉/交鏈孢霉）、葎草，同時包被了10 種食入性過敏原：雞蛋白、牛奶、花生、黃豆、牛肉、羊肉、海魚組合1（鱈魚/龍蝦/扇貝）、淡水魚組合1（鮭魚/鱸魚/鯉魚）、蝦、蟹。實驗儀器為歐盟EUROBlotMaster 和EUROLineScan 系統。試驗步驟：先將檢測膜條預處理，然后加入患者血清與檢測膜條在搖擺床上進行孵育，使血清中的IgE 抗體與膜條上包被的相應抗原相結合，然后用緩沖液進行膜條清洗，去掉未結合的抗體，加入酶結合物與IgE 抗體抗原復合物再次孵育，再次洗滌，加入色原/底物液進行孵育，最后經蒸餾水洗滌，風干膜條，粘附于結果判定模板中的塑料膜上。

1.4 結果判定

采用“EUROLineScan”軟件自動讀取風干后的膜條，按照sIgE 濃度的分級標準，把結果分為0～6 級：0 級為＜0.35 kU/l（未檢出特異性抗體）；1 級為0.35～0.7 kU/l(極低抗體滴度，通常沒有臨床癥狀，但比較敏感)；2級為0.7～3.5 kU/l（低滴度抗體，如果在該類別的上限，則通常有臨床癥狀）；3 級為3.5～17.5 kU/l（檢測到特定抗體，通常會有臨床癥狀）；4 級為17.5～50 kU/l（檢測到高滴度抗體，通常具有臨床癥狀）；5 級為50～100 kU/l（檢測到高抗體滴度）；6級為＞100 kU/l（檢測到非常高的抗體滴度）。

1.5 統計學方法

采用SPSS 17.0 統計學軟件進行數據統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t 檢驗；計數資料以例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 總IgE和sIgE的檢測結果

985 例患者中，578 例總IgE 檢測有反應性，716 例sIgE檢測有反應性，具體的結果，見表1。

表1 總IgE檢測與sIgE檢測結果

2.2 sIgE檢測結果

716 例sIgE 檢測有反應性的樣本中，吸入性過敏原最多的是塵螨組合（屋塵螨/粉塵螨），其次是蟑螂，食入性過敏原最多的是海魚組合1（鱈魚/龍蝦/扇貝），其次是淡水魚組合1（鮭魚/鱸魚/鯉魚），表中列出前五位組合，詳細結果，見表2。

表2 sIgE檢測結果

2.3 年齡與特異性變異原分布

將患者分為嬰幼兒組、青少年組、中青年組、老年組。吸入性過敏原中各組最多的是塵螨組合；食入性過敏原中，嬰幼兒組最多是雞蛋白，其它三組為海魚組合，詳細結果，見表3。

2.4 總IgE濃度與特異性過敏原等級關系

患者總IgE 數值分為正常組、2 倍參考值組、3 倍參考值組、大于3倍參考范圍值組。sIgE各等級占比不隨總IgE濃度而改變，除當總IgE的濃度大于3倍參考值時6級數量明顯增加，詳細結果，見表4。

3 討論

近年來，由于環境污染、食品安全和生活方式改變等原因，過敏原的種類越來越多，變態反應性皮膚病的發病率較前明顯提高［4］。據世界變態反應組織（World Allergy Organization，WAO）白皮書報告，全世界有30%～40%的人被過敏問題所困擾，過敏已成為全球第六大疾病［5］。在日常生活中，常把由IgE 抗體介導的體液免疫反應認為是過敏反應的主要產生機制［6］，主要通過結合多價抗原并交聯肥大細胞、嗜堿性粒細胞表面受體，促使細胞托顆粒而產生炎癥反應［7］，而過敏原特異性IgE 與過敏原息息相關，已被納入多項疾病診療指南。因此，總IgE 和特異性IgE檢測在過敏性疾病中具有重要意義。

我們對985 例患者進行了總IgE 和sIgE 的檢測，總IgE檢測有反應性578 例（58.7%），sIgE 檢測有反應性716 例（80.7%），總IgE 與sIgE 具有相關性（χ2=42.5，P<0.01）。sIgE 檢測分為吸入性和食入性，吸入性過敏原最多的是塵螨組合（屋塵螨/粉塵螨），占58.2%，其次是蟑螂，占33.0%，與國內其它南方地區的研究結果基本一致［8-10］，但新疆［11］以艾蒿、樹組合為主，這可能與當地的氣候環境有關，南方地區夏季高溫高濕并且長期使用空調容易導致室內空氣流通不均，有利于螨蟲和蟑螂的繁殖生長；食入性過敏原最多的是海魚組合1（鱈魚/龍蝦/扇貝），其次是淡水魚組合1（鮭魚/鱸魚/鯉魚）、蟹，國內部分研究與本研究結論相同［12-13］，但有些研究表明牛奶是主要的過敏原［14-15］，主要原因可能是珠海作為沿海城市，居民喜歡食用海鮮。同時，我們將患者按年齡分為嬰幼兒、青少年、中青年、老年四組，各組吸入性過敏原最多的是塵螨組合，而食入性過敏原中，嬰幼兒組最多是雞蛋白，其它三組為海魚組合，筆者猜測這是由于嬰幼兒與成人具有不同的飲食結構。有報道指出，雞蛋致敏主要發生在生命早期，我們應該密切監測嬰幼兒食物過敏情況，避開這些變應原［16］，但雞蛋具有較高的營養價值，又是中國餐桌常見食物，是否完全拋棄需要慎重考慮。

表3 年齡與特異性變異原分布的關系

表4 總IgE與特異性過敏原等級關系

對總IgE 濃度與sIgE 的等級之間的關系進行分析，發現sIgE 等級1 級在各總IgE 濃度組別中占主要部分， sIgE的各等級的占比不隨總IgE濃度的變化而變化，但當總IgE的濃度大于3 倍參考值時，sIgE 等級6 級數量明顯增加，所以筆者推測較低濃度的總IgE 與sIgE 的等級即臨床癥狀沒有必然的關系，但在高濃度時關系得到加強。可能的原因有：（1）參加檢測的患者處于疾病非發作期；（2）患者過敏反應可能由檢測項目以外的其他過敏原引起；（3）患者處于疾病高峰期與IgE 耗竭期，出現假陰性結果［17］。

過敏原陽性患者可根據檢測報告調整自己的食物結構或者生活方式。吸入性過敏原陽性者要避免與過敏原接觸，改善居住環境，保持房間通氣干燥，衣被充分晾曬，清潔空調、空氣凈化器濾網等，不養寵物［18］, 食入性過敏原陽性者要盡量避免攝入含陽性成分的食物。由于包被抗原的種類與抗原特異性的限制，過敏性疾病與變應原的檢測做不到完全符合，臨床醫生在結果解釋時需慎重。雖然過敏原檢測安全可靠，但也存在著缺乏符合我國國情的檢測項目和陽性預計值參考范圍以及沒有國內標準物質的缺點。