長期大劑量質子泵抑制劑對大鼠體內炎癥因子和微量元素的影響*

秦 青，沈 翔，劉 萍，楊 勇，張 慧，王萬亮，方 園，周 云

安徽省蕪湖市第一人民醫院，安徽 蕪湖 241000

質子泵抑制劑（proton pump inhibitors，PPI）是一類弱 堿性苯并咪唑類化合物，主要藥理機制是降低胃黏膜壁細胞中質子泵活性，進而抑制胃酸分泌，臨床上廣泛用于治療胃食管反流病、消化性潰瘍、胃泌素瘤等，有較好的安全性。隨著臨床應用的逐漸增多，不良反應也逐漸被發現。短期服用不良反應較輕微，停藥后可消失，長期服用不良反應的報道越來越多，尤其見于65歲以上老年群體［1］。有學者報道急性冠狀動脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）患者同時服用氯吡格雷和PPI，抗血小板的療效可能降低。長期應用PPI 容易導致骨質疏松或心血管不良事件的風險［2］。美國食品藥品監督管理局（Food and Drug Administration，FDA）建議：大劑量和/或長期服用PPI 可能導致骨折風險增加。此外，PPI 還可以減弱胃竇D 細胞分泌生長抑素，促進G 細胞分泌胃泌素，導致高胃泌素血癥。胃泌素增高可導致多種組織萎縮，刺激體外培養的腫瘤細胞包括結腸癌細胞的生長等［3］。對于腎功能不全患者服用PPI 制劑應密切觀察腎功能的變化，尤其以奧美拉唑最為常見，較易引起急性間質性腎炎（acute interstitial nephritis，AIN）［4］。

目前缺乏關于PPI 應用導致人體不良反應的可能機制相關研究，基于此，該研究從動物模型角度探討長期大量應用PPI對大鼠模型體內炎癥因子和微量元素的影響。

1 動物模型和研究方法

1.1 實驗動物

選擇6～8 周齡健康SPF 級雄性SD 大鼠共40 只，體重（100±5）g，由安徽省蕪湖市第一人民醫院醫學院動物實驗中心提供，分籠飼養在濕度40%，溫度28℃的動物實驗室內，自由進食、進水。

1.2 制備動物模型

（1）左手抓取固定動物，腹部朝上，頸部拉直；（2）右手持接灌胃針的注射器吸取PPI 藥液，將針頭從口角插入口腔，用灌胃針頭壓其頭部，使口腔與食管成一條直線，再將灌胃針頭沿上顎壁輕輕進入，轉動枕頭刺激吞咽，然后沿咽后壁慢慢插入食道；（3）當感覺有落空感時表明灌胃針進入胃內，向外抽動注射器活塞，感覺有負壓說明灌胃針未插入氣管，此時可將藥物灌入，插入深度5 cm。

1.3 研究方法

隨機抓取法分為對照組和觀察組各20只，對照組采用普通飲食，觀察組同時進行PPI 灌胃，每天1 次，持續20周。每個月采集鼠尾靜脈檢測炎癥因子IL-1 和IL-10，微量元素鈣、鎂和鐵，血常規白細胞和血小板。

1.4 檢測方法

取鼠尾靜脈血以3 000 r/min、15 min 離心，取上清，-80 ℃保存備用。所有血清標本同批測定。采用全自動生化分析儀測定大鼠血清微量元素、白細胞和血小板，ELISA 法測定炎癥因子，試劑均購自南京碧云天科技有限公司，各步驟嚴格按照說明書操作。

1.5 統計學方法

使用SPSS 22.0 軟件進行統計學處理，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t 檢驗；計數資料以例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清IL-1和IL-10水平

隨著處理時間延長，觀察組血清IL-1 和IL-10 水平比對照組增加，在持續干預12 周、16 周和20 周時尤為明顯，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 兩組血清鈣、鎂和鐵含量

隨著處理時間延長，觀察組血清鈣、鎂和鐵含量比對照組減少，在持續干預12 周、16 周和20 周時尤為明顯，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

2.3 兩組血清白細胞和血小板計數

隨著處理時間延長，觀察組血清白細胞計數比對照組升高，而血小板計數下降；在持續干預12 周、16 周和20周時尤為明顯，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

3 討論

骨質疏松癥對老年人及絕經婦女來說是一種常見的骨骼性疾病，PPI 可能導致鈣吸收減少、骨密度下降、骨質疏松及骨折風險增加，可能機制為胃酸下降影響鈣的正常吸收，大多數情況下鈣鹽在中性及偏堿性溶液中相對難以溶解，而在酸性溶液中較易溶解。食物中攝入鈣大約40%以蛋白結合形式存在，正價鈣離子和負價氨基酸結合在一起，酸性環境能使負價氨基酸質子化，游離的鈣離子變為可溶性。而且在高pH 值環境下鈣更容易與膳食纖維結合。因此，胃酸使飲食中的鈣更容易吸收，胃酸下降導致鈣吸收障礙［5］。同時，PPI 誘導的高胃泌素血癥導致甲狀旁腺增生，甲狀旁腺激素分泌增加、骨吸收速度加快、骨轉換增加，導致骨量減少。

PPI引起急性腎損傷，病理表現為PPI相關性急性間質性腎炎，長時間應用PPI 可由慢性間質性腎炎進展為慢性腎臟病甚至腎功能衰竭。PPI 導致AIN 的發生機制中炎癥因子異常表達可能發揮重要作用。PPI 及其代謝產物沉積在腎小管及腎間質中，作為半抗原與腎小管基底膜的正常成分相結合，誘導針對該抗原的免疫和炎癥反應，從而導致腎小管及間質的損傷［6］。長期應用PPI可導致胃內酸環境被破壞，胃內pH 值升高，影響微量元素及維生素C 的吸收，進而降低維生素B12 和鐵的吸收以及補充，可能產生貧血［7］。胃酸促使鐵鹽從食物中分離，使高鐵還原為可溶性更高的亞鐵形式，與抗壞血酸、糖和胺形成復合物，促進在十二指腸吸收。PPI 可使膳食中非血紅蛋白鐵的吸收減少一半。所有PPI處方藥說明書均將加入了低鎂血癥的風險信息。PPI 相關低鎂血癥通?？赏ㄟ^補充鎂劑逆轉，但約25%病例單獨補充鎂劑不能改善低鎂血癥，需停用PPI［8］。PPI引起血液系統不良反應常表現為白細胞、粒細胞下降，血小板減少以及溶血性貧血等，臨床中容易被忽視，一旦發生嚴重程度較高，可導致急性粒細胞缺乏、血小板減少性紫癜、引起大出血甚至死亡［9］。此外，PPI可導致多個系統的不良反應，包括癡呆、骨質疏松以及骨折、內分泌紊亂、肺炎、貧血、肝功能受損及過敏反應等［10-11］。

表1 兩組血清IL-1和IL-10水平（mg/L）

表2 兩組血清鈣、鎂和鐵含量（mmol/L）

表3 兩組血清白細胞和血小板計數（×109/L）

綜上所述，長期大量PPI 增加了大鼠炎癥因子表達，微量元素丟失，以及白細胞計數升高和血小板計數下降。