百里香揮發油及其主成分的生物活性研究

臧 皓，張露云，于 帥，徐 倩，夏廣清，于俊林

1 儀器與材料

美國Thermo Fisher Trace 1300-ISQ GC-MS聯用儀；ZNHW-2 型智能控溫儀（鞏義市宇翔儀器有限公司）；Sartorius QUINTIX35-1CN 電子分析天平（北京賽多利斯天平有限公司）；百里酚、β-石竹烯、3-甲基-4-異丙基酚和γ-萜品烯均購自薩恩化學試劑公司，實驗中所用試劑及溶劑均為分析純.

大腸桿菌（Escherichia coliATCC25922）、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureusATCC29213）和單核細胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenesATCC19111）由通化師范學院微生物研究室提供.百里香采于吉林省龍井市，由通化師范學院醫藥學院于俊林教授鑒定為百里香.

2 方法

2.1 揮發油的提取

將新鮮百里香切碎，稱取600 g，加5 倍量水浸泡，用水蒸氣蒸餾法提取4 h，收集揮發油，用無水硫酸鈉干燥后4 ℃下保存，備用.

2.2 色譜條件

SE-54 石英毛細管柱（0.25 mm × 30 m，0.25 μm）；進樣口溫度250 ℃.程序升溫：初始溫 度50 ℃，以5 ℃·min-1的 速 度 均 勻 升 至200 ℃，再 以1 ℃·min-1的 速 度 均 勻 升 至220 ℃.載氣為高純氦氣，流速1 mL·min-1，進樣量1.0 μL，分流比10∶1.

2.3 質譜條件

離子源溫度230 ℃；色譜-質譜接口溫度280 ℃；電離源（EI）；電子能量70 eV；傳輸線溫度280 ℃；掃描質量范圍（m/z）50～500；掃描周期0.2 s.

2.4 抑菌活性研究

按文獻［2］的方法測定揮發油及其主成分的最低抑菌濃度（MIC）和最低殺菌濃度（MBC），氯霉素和鏈霉素作為陽性對照.

2.5 DPPH 實驗

在96 孔 板 中 先 加 入100 μL 50 μmol·L-1DPPH 甲醇溶液，再加入100 μL 不同濃度樣品的甲醇溶液，混合后在暗處孵化20 min，在492 nm 下測定吸光值，計算IC50值.維生素C和Trolox 用作陽性對照［3］.

根據以上交流中出現的問題，作者重點觀察和收集學生在遇到這三種突出問題時所采取的反應和方法，并根據Dornyei和Scott(1997)的交際策略分類，總結出學生經常使用的7種交際策略。

2.6 ABTS 實驗

在96 孔板中先加入……