某地區非典型趨化因子受體1多態性與丙型病毒性肝炎易感性的研究

張樹婷 邵林楠 周世航 王 霓 肖 南 劉 銘2

（1 大連市血液中心血型室，遼寧 大連 116001；2 大連醫科大學細胞生物學教研室，遼寧 大連 116044）

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）發現于1989年，目前全球感染者已達到7100萬，2015年全世界新增175萬HCV感染者，這對發展中國家和發達國家都是一個嚴峻的公眾健康問題。超過70%的丙型肝炎患者會發展為慢性HCV感染者，隨著病情的進展會繼續發展成肝硬化、肝癌甚至肝功能衰竭[1]。15%～45%的HCV感染者在未得到任何治療的情況下，可通過強有力的免疫反應自動將病毒清除。據統計，我國的HCV感染人數達2500萬，疾病流行率為0.43%～3.20%[2]。Duff y血型系統抗原又被稱為Duff y抗原趨化因子受體或非典型趨化因子受體1（atypical chemokine receptors，ACKR1）。ACKR1是一種主要表達于細胞膜表面的糖蛋白，在肝、脾、腎的毛細血管微靜脈，腎、肺的上皮細胞，以及小腦浦肯野細胞均有表達[3]。Duffy基因定位于1號染色體的長臂上，主要有3種等位基因，即FY*A、FY*B和FY*BES。核酸序列第125位的單核苷酸多態位點（single nucleotide polymorphism，SNP）（G125A，rs12075）是引起FY*A和FY*B等位基因差異的原因[4]。而FY*BES等位基因對應Fy（a-b-）基因型，是由啟動子上游的SNP（T-33C，rs2814778）引起的[5]。紅細胞膜上的ACKR1被形象的描述為趨化因子“槽”，可與趨化因子發生交互作用，清除多余的炎性趨化因子，減少炎性趨化因子釋放到循環系統中，進而發揮調節炎性反應的作用。ACKR1的SNP與許多疾病相關，如中性粒細胞減少癥、乳腺癌和惡性瘧疾等[6-8]。有研究證實，紅細胞膜上的補體受體與HCV相關，而ACKR1作為紅細胞膜上的另一種受體，其多態性也可能會影響HCV的易感性[9]。目前，關于ACKR1的多態性是否與HCV易感性相關的研究較少。因此，本研究旨在調查大連地區人群ACKR1多態性與HCV易感性的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年4月至2015年12月就診于大連市傳染病醫院的231例抗-HCV及丙型肝炎病毒核酸（HCV-RNA）陽性的HCV感染者作為觀察組，選取同期239名無血緣關系的健康獻血者作為對照組。觀察組DNA提取采用核酸自動純化系統（RBC Bioscience,Lot，型號 SM-001-15102001），按照說明書嚴格操作。

1.2 ACKR1分型 ABI Prism 7300實時熒光PCR儀購自美國Applied Biosystems公司。使用TaqMan-MGB探針實時定量PCR技術對兩組樣本進行ACKR1基因分型[10]。

1.3 統計學分析 采用直接計數法對ACKR1基因型頻率及基因頻率進行計算。群體代表性檢驗采用Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗。應用SPSS 21.0統計學軟件對數據進行分析，基因型頻率及基因頻率的比較采用Fisher精確檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義，并計算OR值及95%CI。

2 結果

兩組ACKR1基因分型見表1。兩組ACKR1基因型分布情況符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律（觀察組P=0.26；對照組P=0.84），表明選取的人群具有代表性。觀察組FY*A/FY*A、FY*B/FY*B和FY*A/FY*B的基因型頻率分別為86.1%、0%和13.9%；對照組FY*A/FY*A、FY*B/FY*B和FY*A/FY*B的基因型頻率分別為86.2%、0.4%和13.4%。兩組基因型頻率組間比較，差異有統計學意義（P=1.000，OR=1.004，95%CI：0.594～1.695）。觀察組FY*A和FY*B的等位基因頻率分別為93.1%和6.9%；對照組FY*A和FY*B的等位基因頻率分別為92.9%和7.1%。兩組等位基因頻率比較，差異有統計學意義（P=1.000，OR=0.972，95%CI：0.589～1.603）。

表1 兩組ACKR1基因型和等位基因分布

3 討論

1950年，ACKR1被發現在紅細胞表面表達，屬于一種人類血型抗原。20世紀90年代，經臨床實踐發現ACKR1是白細胞介素-8和其他炎性趨化因子的受體。近些年，因ACKR1的SNP在諸多疾病中起到關鍵作用而逐漸成為人們關注的焦點。Jenkins等[7]研究發現，攜帶有等位基因FY*BES的乳腺癌患者傾向于特定的腫瘤表型，產生由ACKR1介導的腫瘤免疫應答。He等[11]研究結果證實，ACKR1-46C/C可以增加約40%的感染1型人類免疫缺陷病毒的風險。Gai等[8]臨床試驗發現，FY*B攜帶者可預防嚴重惡性瘧疾。

本研究結果顯示，兩組FY*A/FY*A、FY*B/FY*B和FY*A/FY*B的基因型分布與FY*A、FY*B的等位基因分布未發現顯著差異。無論在觀察組還是對照組中，基因型FY*A/FY*A和等位基因FY*A頻率均占絕對優勢，而基因型FY*B/FY*B是罕見的，符合亞洲人群分布特征。本研究試驗設計是基于假設——紅細胞上補體受體與HCV有關[9]。考慮到紅細胞上另一種受體ACKR1可吸附1型人類免疫缺陷病毒并轉運給CD4+易感T細胞，所以推測ACKR1與HCV間會發生交互作用。但結果卻發現，觀察組和對照組中ACKR1的多態性差異無統計學意義。Lettow等[12]基于高加索人群的研究也得到了類似的結果，即ACKR1的SNP（rs12075）與HCV感染無關。由此推測，ACKR1的多態性（rs12075）不能直接影響HCV的易感性。對此結果可能的解釋是，盡管紅細胞膜上的ACKR1可與人類免疫缺陷病毒、趨化因子、瘧原蟲Duffy結合蛋白等配體發生復雜的交互作用，但不能結合HCV，其間沒有交互作用發生。

綜上所述，ACKR1的多態性（rs12075）不能直接影響HCV的易感性。但其多態性可顯著影響趨化因子在血清中的表達水平。在HCV感染過程中，CC家族的趨化因子呈高表達狀態，且與肝損傷程度有關[13]。在今后的工作中將會繼續調查ACKR1多態性與HCV病程之間是否存在相關性。