去甲斑蝥素通過調控miR-182-5p抑制卵巢癌細胞增殖和侵襲①

楊瑞英 張翠亞 衛海寧 李鵬哲 閆宇華 侯風敏

(邢臺市人民醫院婦產科，邢臺 054001)

卵巢癌是一種常見的婦科腫瘤，其惡性程度高且對放化療不敏感[1]。臨床治療以手術為主，但患者整體預后較差[2]。去甲斑蝥素(norcantharidin,ND)由斑蝥素衍生而來，為斜方形鱗狀晶體，難溶于水，易溶于丙酮和醋酸乙酯[3]。臨床上用于治療肝癌、乳腺癌、肺癌、食管癌、結腸癌等[4]。有文獻報道ND對肝癌、食管鱗癌等細胞株的形態、增殖有破壞或抑制作用，可提高癌細胞呼吸控制率及溶酶體酶活性，干擾癌細胞分裂，抑制其DNA合成[5]。

現有研究表明，miRNA和LKB1/AMPK在多種惡性腫瘤組織中均有表達，在腫瘤細胞凋亡、轉移和侵襲過程中均發揮重要作用[6]。但miRNA和LKB1/AMPK在卵巢癌中的作用鮮有報道，ND對卵巢癌的作用如何，其是否可通過miRNA和LKB1/AMPK在卵巢癌治療過程中發揮作用尚未明確。因此本研究以卵巢癌SKOV3細胞為研究對象，探討ND對卵巢癌增殖和遷移的作用及其對miRNA和LKB1/AMPK的作用，以期為ND在臨床上治療卵巢癌提供可靠的實驗依據和藥物靶點。

1 材料與方法

1.1材料 SKOV3細胞購自中科院上海細胞庫；si-miR-182-5p由上海吉凱公司提供；蛋白定量試劑盒、SDS凝膠試劑盒、細胞裂解液、結晶紫均購自武漢天根生物有限公司；蛋白酶抑制劑購自羅氏試劑生物有限公司；DMEM培養基、優級胎牛血清、胰蛋白酶消化液均購自美國 HyClone；青鏈霉素混合液、4%多聚甲醛購自北京碧云天有限公司；p-LKB1、p-AMPK、p65及E-cadhrein、Vimentin、Snail抗體和兔二抗購自英國 Abcam；ECL化學發光試劑盒購自美國 Advansta；Transwell小室購自康寧公司；LipofectaminTM2000(Carlsbad,CA)購自Invitrogen。

1.2方法

1.2.1CCK-8檢測細胞增殖 選取對數生長期細胞以4×105個/孔鋪于96孔板。……