體內(nèi)熒光活體成像觀察miR-581對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞SW620轉(zhuǎn)移能力的影響①

丁婷婷 張 紅 馮繼紅 馬 虎

(遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤醫(yī)院腫瘤科，遵義 563003)

結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)是世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤。主要發(fā)生于直腸和乙狀結(jié)腸交界處，在40～50歲人群發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)最高，男性的發(fā)病率是女性的2～3倍[1]。CRC具有侵襲性和轉(zhuǎn)移性，伴有療效差、復(fù)發(fā)率高、預(yù)后差及高發(fā)病率等特點(diǎn)，其發(fā)病率和死亡率分別排在所有惡性腫瘤的第三和第四[2，3]。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和人們生活方式的變化，CRC的發(fā)病率升高，且發(fā)病人群年輕化[4]。2017年Siegel等[5]發(fā)現(xiàn)，盡管年輕群體中CRC患者僅占癌癥患者總數(shù)的一小部分，但在該群體中CRC的發(fā)生率正在以驚人的速度上升。其隱匿的臨床表現(xiàn)和預(yù)后不良的特點(diǎn)，已經(jīng)對(duì)人類(lèi)健康造成重大負(fù)擔(dān)。

miR-581是一類(lèi)新近發(fā)現(xiàn)的大小約85 bp的miRNA分子[6]。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)miR-581在CRC組織中低表達(dá)，且在細(xì)胞水平檢測(cè)出其可抑制CRC細(xì)胞的侵襲和遷移并驗(yàn)證miR-581靶向調(diào)控PRDX1[7]。本研究通過(guò)上調(diào)CRC細(xì)胞株SW620中miR-581表達(dá)，利用帶有熒光素酶標(biāo)記的病毒感染CRC細(xì)胞株SW620(記為miR-581-NC-Luc、miR-581-UP-Luc)，經(jīng)尾靜脈注射入裸鼠體內(nèi)，建立裸鼠CRC轉(zhuǎn)移模型，通過(guò)體內(nèi)熒光成像動(dòng)態(tài)觀察miR-581對(duì)CRC生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移能力的影響。體外細(xì)胞水平驗(yàn)證結(jié)合體內(nèi)組織水平驗(yàn)證綜合評(píng)估m(xù)iR-581在體內(nèi)外對(duì)CRC細(xì)胞株生物學(xué)行為的影響，為深入研究抑制CRC腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的相關(guān)機(jī)制并找到抑制手段提供一定的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與細(xì)胞 4周齡左右的雌性BALB/c SPF級(jí)裸小鼠，購(gòu)自長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)碼：SCXK(湘)2014-0011；SW620細(xì)胞株購(gòu)自上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞庫(kù)。……