李孝全 莫靜欣
(湖北醫藥學院附屬人民醫院急危重癥中心,十堰 442000)
重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是一種易并發多器官衰竭綜合征的炎性疾病,是由胰酶對胰腺自我消化引起的氧化應激反應及全身各器官炎癥損傷反應[1]。SAP引起的腎衰竭和肺損傷在臨床上非常常見,嚴重時引起急性心肌炎,死亡率極高[2]。中藥在中國有幾千年的應用歷史,其中最早與胰腺炎治療相關的中藥是大黃[3]。《神農本草經》記載,大黃為寥科植物,以干燥的根或根莖入藥,其味苦寒,具下淤血、推陳致新、調中化食等功效[4]。現代醫學發現,大黃具抗菌、抗炎、保肝利膽、改善腎功能等作用[5]。大量研究報道大黃具有治療SAP作用,但作用機制尚未明確[6]。本研究通過觀察大黃對SAP大鼠肺泡巨噬細胞凋亡、炎癥因子分泌及JAK2/STAT3信號通路的影響,揭示大黃治療SAP的機制與JAK2/STAT3信號通路的關系。
1.1材料 清潔級SD大鼠60只,體質量180~220 g,購自上海凱學生物公司;大黃免煎顆粒購自河北第二醫院中藥房;TNF-α檢測試劑盒、人NO ELISA檢測試劑盒購自碧云天;Annexin V-FITC/PI凋亡檢測試劑盒購自北京索萊寶公司;胰蛋白酶購自美國Sellect公司;SDS-PAGE 試劑盒、ECL發光液、RIPA蛋白裂解液、BCA蛋白定量試劑盒和逆轉錄試劑盒購自大連TaKaRa公司;PVDF膜購自Roche公司;大鼠肺泡巨噬細胞分離培養試劑盒購自無錫欣潤生物;兔抗鼠p-JAK2多克隆抗體、兔抗鼠p-STAT2多克隆抗體、HRP標記的羊抗鼠抗體購自上海信裕生物科技有限公司。
1.2方法
1.2.1SAP大鼠模型的建立及分組大黃溶液的制備 大黃免煎顆粒用無菌生理鹽水配制成1 g/L的大黃溶液。……