化療誘導的衰老細胞胞外囊泡的分離及相關特性研究①

周 琦 丁麗麗 李 芬 劉愛國 周學鋒 楊 燕

(華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院，武漢 430000)

細胞衰老是指細胞受到外界壓力時細胞周期進入長久停滯的狀態。細胞衰老可分為復制性衰老與治療誘導性衰老(therapy-induced senescence，TIS)[1]。復制性衰老是對DNA損傷、癌基因激活、端粒縮短等的應急反應，是阻止腫瘤發生的一種自我保護機制。TIS是指放療、化療或藥物靶向治療引起的腫瘤細胞衰老，其可由治療導致的DNA損傷或抑制細胞分裂必需的激酶(如極光激酶aurora kinase,AURKA)引起[2]。TIS因其能使腫瘤細胞進入生長靜止期且其藥物毒性遠低于細胞凋亡而倍受關注。早期研究在肺癌、乳腺癌中觀察到化療誘導的細胞衰老與治療應答正相關[3，4]。衰老的腫瘤細胞停止分裂，腫瘤進展得到控制。近期研究表明化療誘導的細胞衰老是一把“雙刃劍”：一方面衰老細胞周期阻滯可有效控制腫瘤生長；另一方面衰老細胞并沒有死亡，其可自分泌或旁分泌生長因子、細胞因子及蛋白酶等，這種現象稱為衰老相關的分泌表型(senescence-associated secretory phenotype，SASP)。SASP 可使衰老的成纖維細胞轉成促炎細胞，產生炎癥因子和基質金屬蛋白酶，促進周邊非衰老腫瘤細胞生長、復發[5,6]。衰老細胞可分泌胞外囊泡(EVs)，其分泌的EVs能夠調節受體細胞表型，如加速衰老、炎癥、干細胞失能與癌癥進展，功能類似于SASP，因此認為衰老相關EVs(senescence-associated EVs，SAEs)是一類新的SASP因子[7]。為了解SAEs對腫瘤細胞及免疫細胞的影響，本文利用AURKA抑制劑MLN8237處理神經母細胞瘤細胞系IMR32建立細胞衰老模型，收集培養上清中衰老細胞分泌的EVs(SAEs)，分別觀察SAEs對IMR32細胞與單核細胞THP-1的影響，初步判斷SAEs是否影響腫瘤微環境相關細胞，為進一步探討SAEs對腫瘤微環境的影響及其機制提供參考。……