shRNA沉默CCAT2通過(guò)抑制自噬對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549化療敏感性的影響①

喬 飛 崔凌燕 楊東明 陳鴻運(yùn) 徐萌博

(南陽(yáng)醫(yī)專(zhuān)第一附屬醫(yī)院胸外科，南陽(yáng) 473000)

肺癌是發(fā)病率最高的癌癥之一，并且是世界范圍內(nèi)癌癥致死的主要原因。其中非小細(xì)胞肺癌占比約為85%，吸煙是該病的主要危險(xiǎn)因素，而大氣污染和輻射也是主要誘因[1]。非小細(xì)胞肺癌主要包括鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、肺泡細(xì)胞癌、大細(xì)胞癌等，近年來(lái)盡管非小細(xì)胞肺癌分子機(jī)制方面的研究取得了進(jìn)展，治療方法有所改進(jìn)，但由于缺乏有效的診斷措施，大多數(shù)患者確診時(shí)已處于中晚期，生存率較低[2,3]。非小細(xì)胞肺癌的治療主要通過(guò)手術(shù)和化療，目前的一線(xiàn)治療方案是以順鉑為主聯(lián)合其他藥物的治療[4]。然而腫瘤細(xì)胞的耐藥性嚴(yán)重影響了抗腫瘤化療藥物的療效[5]。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一種長(zhǎng)度大于200 nt的非編碼RNA，可以從染色體修飾、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、翻譯、翻譯后修飾等水平參與基因表達(dá)調(diào)控，lncRNA可為癌癥治療提供新的診斷標(biāo)志物以及靶向治療位點(diǎn)[6,7]。lncRNA結(jié)腸癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄本2(colon cancer-associated transcript-2,CCAT2)在多種腫瘤中異常表達(dá)，研究表明，在非小細(xì)胞肺癌中CCAT2與癌細(xì)胞對(duì)基于順鉑的化療敏感性存在一定的關(guān)聯(lián)，但其準(zhǔn)確作用及機(jī)制還需要進(jìn)一步研究[8]。本研究通過(guò)培養(yǎng)人源非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549耐順鉑細(xì)胞株，并沉默其CCAT2基因表達(dá)，探討CCAT2對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549/DDP化療敏感性的影響，分析其可能的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549及A549耐順鉑細(xì)胞株(A549/DDP)購(gòu)自美國(guó)ATCC公司，DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清購(gòu)自Gibco公司；順鉑(cisplatin,DDP)購(gòu)自山東齊魯制藥廠；……