徐 杰 徐 鵬 李夢嬌 任建蘭 劉俊玲 郎錦義
(西南醫科大學臨床醫學院腫瘤科,瀘州 646000)
鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是常見的頭頸部腫瘤,具有明顯區域性,常見于我國華南地區[1]。目前我國大部分NPC患者病理類型為低分化型或未分化型非角化性癌,占比95%以上,平均自然生存時間約為18.7個月[2,3]。微小RNA(miRNA)是一類長度約22 bp的內源性非編碼RNA,是生物體內重要的轉錄基因調控因子,在細胞增殖與凋亡中發揮重要作用[4,5]。王路等[6]研究表明,miR-24與NPC的發生發展密切相關。李吉茜等[7]研究表明其可抑制NPC細胞增殖。本文研究miR-24-3p 靶向作用于MMP-16對NPC 5-8F細胞侵襲、遷移和裸鼠成瘤的影響,闡明其作用機制,為NPC治療提供理論依據。
1.1材料
1.1.1細胞組織標本 NPC 5-8F細胞購自中國科學院細胞庫。收集NPC患者腫瘤樣本及癌旁組織34例,男18例,女16例,年齡23~67歲,平均年齡(45.13±10.25)歲;體質量40~82 kg,平均體質量(61.28±8.59)kg,低分化鱗狀細胞癌30例,泡狀核細胞癌患者4例。癌旁組織為用免疫組化ABC法染色距病灶2 cm的組織,光鏡下可見細胞漿或核被染成黃色或棕色,-80℃冰箱備用。
1.1.2實驗動物 SPF級3周齡雄性裸鼠30只,由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供,許可證號:SCXK(京)2017-0022,5只/籠,飼養于我院動物中心實驗室。
1.1.3藥物與試劑 RPMI1640培養液、胎牛血清和0.25%胰蛋白酶均購自美國Gibco公司;MMP-16抗體購自北京傲銳東源生物科技有限公司;LipofecamineTM2000購自美國ThermoFisher公司; Reverse transcriptase Kit反轉錄試劑盒購自上海聯邁生物工程有限公司;TRIzol、SYBR PCR Master Mix試劑盒購自日本TOYOBO公司;中性福爾馬林、酒精、二甲苯購自天津科密歐有限公司。
1.1.4儀器 BS-124s 型電子天平購自北京賽多斯儀器系統有限公司;……