miR-125b-5p靶向STAT3調控血管內皮細胞凋亡①

李松濤 岳玉林 王均樂 郁 飛 談 誠 曹 波

(南京醫科大學附屬兒童醫院檢驗科，南京 210008)

血管內皮是人體內分泌器官，維持機體穩態，血管內皮細胞具有物質轉運、凝血、免疫調節、活性物質釋放等作用[1]。氧化應激誘導的血管內皮細胞過度凋亡是糖尿病血管并發癥和動脈粥樣硬化等多種疾病的重要原因[2]。miRNA在機體生理病理過程中扮演重要角色，維持細胞正常生理功能，與疾病進展相關[3]。miR-125b-5p在機體內廣泛表達，參與腫瘤、神經損傷等疾病發生，調控細胞生長和凋亡[4，5]。研究顯示，miR-125b-5p可引發心血管系統疾病，在冠狀動脈狹窄患者中表達水平低于無狹窄的心臟病患者，且表達水平越低患者冠狀動脈病變支數越多[6]。miR-125b-5p在過氧化氫誘導的血管內皮細胞損傷模型中表達下調，但其對血管內皮細胞凋亡的影響尚不明確[7]。STAT3是機體中廣泛存在的信號轉導通路，參與細胞凋亡，促進過氧化氫誘導的血管內皮細胞凋亡[8]。本研究闡明miR-125b-5p在過氧化氫誘導的血管內皮細胞凋亡中的作用和靶向調控機制，為血管內皮損傷相關疾病的靶向基因治療提供參考。

1 材料與方法

1.1材料 人臍靜脈血管內皮細胞購自中科院細胞庫；PCNA抗體和C-caspase-3抗體購自武漢艾美捷科技有限公司；pCDNA3.1-STAT3、pCDNA3.1、miR-125b-5p mimics、mimics control由上海吉瑪制藥技術有限公司構建；STAT3抗體購自上海酶聯生物研究所；熒光素酶報告載體由基爾頓生物科技(上海)有限公司構建；p-STAT3抗體購自美國圣克魯斯公司；Lipofectamine 2000購自美國Invitrogen公司。

1.2方法

1.2.1qPCR測定過氧化氫處理后血管內皮細胞miR-125b-5p水平 血管內皮細胞用0、100 μmol/L過氧化氫細胞培養液(含10%胎牛血清的ECM)培養(每組3個復孔)，分別記為Control、H2O2組?！?br>