miR-138靶向OX40L對實驗性自身免疫性腦脊髓炎幼鼠的作用機制研究①

趙秀英 符之富 符彬莎 李文華

(海南省人民醫院，海南醫學院附屬海南醫院，海口 570311)

自身免疫性腦炎是兒童較常見的腦部疾病。這種腦炎由多種免疫介導，主要癥狀包括精神障礙、行為異常、記憶衰退、癲癇等癥狀，嚴重影響兒童健康，通常需要多學科聯合治療[1]。研究顯示，T細胞對全身免疫穩態的維持至關重要[2]，然而經過十多年的研究，對自身免疫應答過程中T細胞的分子應答機制尚未完全明確。有研究顯示，microRNA(miRNA)是生物體內的關鍵基因，可調節T細胞的增殖和凋亡等生物學行為，這說明miRNA對T細胞介導的免疫穩態至關重要[3,4]。研究顯示，miR-138在大腦中富集，可調節多種生物學過程，如小鼠海馬神經元中樹突棘的形態發生；也有研究表明miR-138在癌癥中具有多方面的作用，但miR-138與免疫系統間的互作機制尚不清楚[5-8]。因此，本研究將通過構建實驗性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠模型，獲取自身免疫性腦炎中的關鍵細胞，在細胞水平探究miR-138對T細胞增殖和凋亡的影響及分子機制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實驗動物 健康SPF級C57BL/6小鼠購于廣東省醫學實驗動物中心，體質量15～18 g，5周齡，雌雄各半。

1.1.2主要試劑 MOG35-55多肽購于上海翱博生物公司；含卡介苗弗氏完全免疫佐劑(FCA)購于上海遠慕生物科技有限公司；百日咳結核桿菌毒素PTX購于美國Sigma公司；percoll分離液、FACS緩沖液購于上海穎心實驗室設備有限公司；小鼠FC Block抗體、CD45-PE抗體、TLR3抗體、TLR4抗體及FIZZ-1抗體購于北京百奧萊博科技有限公司；Lipofectamine 2000試劑盒購于美國Invitrogen公司；PrimeScript miRNA cDNA試劑盒購于大連寶生物工程有限公司；……