miR-411-3p靶向PAK2介導Wnt信號通路對口腔鱗狀細胞癌侵襲和轉移的影響及調控機制①

麥明思 趙 焱 馬 鍇 (三亞市人民醫院口腔科，三亞 572000)

口腔鱗狀細胞癌指發病于口腔，以鱗狀細胞為主的惡性腫瘤，是頭頸部腫瘤中惡性程度最高且危害最大的腫瘤[1，2]。腫瘤的侵襲和轉移是引起患者病情惡化的重要因素，因此尋找抑制腫瘤侵襲轉移的方法十分重要[3]。p21活化激酶2(p21 activated kinase 2,PAK2)屬于進化保守的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，是小G蛋白Rho家族中GTP的重要效應物[4]。研究表明PAK2活性升高與人類腫瘤發生發展相關，如PAK2/PIX通路活化能誘導乳腺癌雌激素抵抗[5]。PAK2活化與晚期胃癌的進展及預后不良相關[6]。口腔鱗狀細胞癌相關研究發現，相比于正常口腔黏膜組織，PAK2在口腔鱗癌中表達顯著增強[7]。miR-411經研究證實在腎細胞癌、乳腺癌、大腸癌等多種腫瘤中均發揮抑癌因子作用[8-10]。但其在口腔鱗癌中的作用尚未闡明。Wnt通路經研究證實在包括口腔癌在內的頭頸部腫瘤中均存在異常活化現象。本研究旨在探討miR-411-3p靶向PAK2在口腔鱗狀細胞癌中的作用及機制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1試劑與儀器 基因組DNA提取試劑盒、Lipofectamine 3000試劑盒、Trizol試劑盒、TransScriptⅡGreen One-Step qRT-PCR SuperMix試劑盒、CCK8試劑盒購自賽默飛世爾；人舌鱗癌細胞株HSC-4、Tca8113、TcaSll3及人頰鱗癌細胞株BcaCD885購自拜力生物；miR-411-3p agomir、miR-411-3p antagomir購自上海吉瑪制藥技術有限公司；DAB染液、蘇木素染液、伊紅染液購自北京索萊寶；所有抗體購自ABCAM；Transwell小室購自北京明陽科華生物科技有限公司；Anexin-V-FITC染液、PI染液購自上海碧云天；流式細胞儀購自德國貝克曼；倒置顯微鏡購自奧林巴斯；實時熒光定量PCR儀購自賽默飛世爾；PCR引物序列由華大基因合成。……