酵母多糖作用HaCaT細胞后對Dectin-1、TLR2及IL-6、TNF-α表達的影響

羅 亭 景海霞 王 恒 段德鑒 李 敏

(十堰市太和醫院(湖北醫藥學院附屬醫院)皮膚科，十堰 442000)

目前在臨床上皮膚真菌感染的發病率越來越高，天然免疫作為機體抵御病原體入侵的第一道防線，對于皮膚真菌感染具有重要作用。當真菌感染機體時，天然免疫細胞上的模式識別受體(PRRs)識別入侵的真菌，與真菌成分(如酵母多糖)病原相關分子模式(PAMPs)結合，釋放炎癥因子TNF-α、IL-6等，起到抗真菌感染的作用[1]。目前已經發現的PRRs主要有Toll樣受體(TLRs)、C型凝集素受體(CLRs)和Nod樣受體[2,3]。其中與真菌感染相關的PRRs主要有TLRs和CLRs，其中Dectin-1和TLR2關系最為密切[4-6]。

酵母多糖是釀酒酵母的細胞壁制劑，由β-葡聚糖、甘露聚糖和幾丁質組成，富含真菌的細胞壁成分，能識別包括Dectin-1和TLR2在內的多種配體，可用來模擬體外真菌感染，用于真菌的免疫學研究[7-9]。角質形成細胞是表皮的主要結構，具有免疫功能，還存在多種PRRs，可以識別PAMPs，啟動固有免疫，分泌或表達細胞因子、抗菌肽等，在皮膚真菌感染的天然免疫機制中扮演著重要角色。因此本文擬選用HaCaT細胞(人永生化角質形成細胞，具有與角質形成細胞相同的特點)，用不同濃度的酵母多糖處理HaCaT細胞，檢測細胞中TLR2和Dectin-1的mRNA、蛋白的表達以及TNF-α、IL-6的濃度變化，對酵母多糖啟動機體的天然免疫識別機制進行研究,使構建皮膚真菌感染的細胞模型成為可能，也為皮膚淺表真菌感染的天然免疫機制研究打下基礎。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1細胞來源 HaCaT細胞購自上海美軒生物科技有限公司。……