吉馬酮激活AMPK誘導宮頸癌Hela細胞自噬和凋亡①

姚宗花 張先娟 郭敬敬 劉美艷 張麗麗 (濱州醫學院附屬醫院婦產科，濱州 256603)

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤，位居世界女性惡性腫瘤第三，全球每年發病人數約為50萬，死亡率高達50%，主要發生于亞洲[1]。目前宮頸癌治療仍以手術、放療、化療等為主，但不良反應發生率較高，嚴重影響患者身心健康[2，3]。因此，急需繼續尋找宮頸癌的有效治療策略。姜黃屬植物是廣泛應用于亞洲國家的抗腫瘤藥物，其主要成分為吉馬酮(gemmarone，GMC)，具有抗腫瘤、抑制脂肪形成、抗炎和免疫調節作用[4,5]。GMC是單環倍半萜類化合物,具有倍半萜類化合物共有的特性，近年關于GMC的藥理作用研究越來越廣泛[6-8]。GMC具有抗腫瘤作用，可抑制肝癌、肺癌等癌癥細胞增殖并誘導細胞凋亡，且可直接殺傷腫瘤細胞，但其對宮頸癌的作用鮮有報道。由于宮頸癌細胞增殖、自噬能力不足和凋亡機制失調，導致宮頸癌患者預后較差[9，10]。因此，尋找抑制增殖、促進凋亡和自噬的有效靶向抗癌劑對宮頸癌患者具有重要意義。本文旨在研究GMC對宮頸癌Hela細胞自噬和凋亡的影響。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗藥物和試劑 GMC購自美國Sigma-Aldrich (42924)；Dulbecco′s modified Eagle′s medium培養基(12002-090)、胰蛋白酶(27254-019)胰蛋白酶(25200-056)和青-鏈霉素(15140-122)購自GIBCO BRL公司；AMPK抑制劑AICAR (A8184)購自美國APExBIO生物科技有限公司；CCK-8試劑盒購自Dojindo公司(KH668)；AnnexinV/PI雙染試劑盒購自南京凱基生物科技發展公司(KGI106)；Anti-Ki67(ab15580)和Anti-Caspase-3(ab13585)均購自Abcam公司；BCA試劑盒購自碧云天生物技術研究所(P001S)；抗Beclin 1(sc54782)、 P62(sc58241)、 LC3Ⅰ/Ⅱ(sc47821)購自Santacruz公司；免疫熒光試劑盒購自上海優予生物科技有限公司(KGIF002)。

1.1.2細胞來源 ECT1/E6E7人宮頸永生化鱗狀細胞與人宮頸癌Hela細胞來源于中國科學院典型培養物保藏委員會細胞庫。……