丙泊酚通過上調miR-204對乳腺癌MDA-MB-231細胞侵襲遷移和上皮間充質轉化的影響①

崔 鵬 胡 杰 王曉飛 夏玉中 阮孝國 蔡 明 (鄭州大學附屬洛陽中心醫院麻醉科,鄭州 471000)

乳腺癌是臨床上最為常見的婦科腫瘤，是導致世界范圍內的女性死亡的首要原因之一。由于發展中國家對早期診斷的忽視，乳腺癌患者的生存率遠低于發達國家，5年生存率不到40%[1]。外科手術切除治療是現今治療乳腺癌的一線方案，局部或轉移性復發是導致術后患者死亡的主要原因之一，在手術期間往往會導致應激反應，造成細胞免疫抑制，加速腫瘤生長及擴散，而麻醉藥的選擇對緩解腫瘤的手術治療中的應激反應至關重要[2,3]。丙泊酚是一種臨床上廣泛使用的短效靜脈麻醉藥，大量研究表明其在腫瘤治療過程中發揮腫瘤抑制作用，然而其作用機制還有待進一步明確[4]。本研究培養人乳腺癌細胞MDA-MB-231，并通過丙泊酚和miR-204 inhibitor處理，探究了丙泊酚對miR-204的影響及其對乳腺癌細胞侵襲遷移和上皮間充質轉化的作用機制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1主要試劑 DMEM細胞培養液、胎牛血清購自Gibco公司；Lipofectamine 2000購自Thermo Fisher公司；丙泊酚購自Sigma公司，miR-204 mimic、miR-204 inhibitor、陰性對照mimic(mimic NC)購自上海吉瑪制藥技術有限公司；所有引物由上海生工生物工程有限公司合成；反轉錄試劑盒和SsoFastTMEva-Green?Supermix試劑盒購自Bio-Rad公司；TRIzol試劑、RIPA試劑購自上海碧云天生物技術研究所；熒光素酶報告系統購自Promega公司；GAPDH抗體購自武漢博士德生物工程有限公司；兔基質金屬蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、上皮性鈣黏附蛋白(E-cadherin)、神經性鈣黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)一抗，HRP酶標記的山羊抗兔IgG二抗購自Abcam公司。

1.1.2細……